التحكم في الجودة واستخدامات البروتينات المعيدة التشكيل

التحكم في الجودة للبروتينات المركبة ضروري لموثوقية وقابلية تكرار البيانات التجريبية. يتطلب كل خطوة، من تصميم المشروع إلى عملية الإنتاج، استراتيجيات صارمة للتحكم في الجودة.

استراتيجيات التحكم في الجودة

يتبع القطاع الصناعي إجراءات تشغيل قياسية صارمة، بينما يحتاج المجتمع الأكاديمي إلى تعزيز المعرفة المهنية لتحسين قابلية تكرار البيانات. البروتينات ذات التطبيقات البيولوجية أو الخصائص الكيميائية الحيوية المحددة تتطلب استراتيجيات مخصصة للتحكم في الجودة (QC).

أمثلة صعبة وحلول

تتمتع Yaohai Bio-Pharma بخبرة واسعة في إنتاج وتنقية البروتينات المركبة، بالإضافة إلى فريق من الخبراء، مما يضمن إكمال إنتاج البروتين الخاص بك بدرجة نقاء عالية. باستخدام خبرتنا من مئات المشاريع، تلخص Yaohai كيف يمكن تحسين تنقية البروتين.

البروتينات الواصلة للحمض النووي: خطوات إزالة الحمض النووي، مثل النукليازات أو الترسيب باستخدام PEI، ضرورية. يتم مراقبة نسبة A260nm/A280nm لاكتشاف تلوث الحمض النووي.

بروتين الفيريتين الثقيل لل فأرة لاستخدامه في التصوير الإلكتروني البارد: يجب تعديل خطوات الت提هية وإضافة النوكليازات لتقليل نسبة A260nm/A280nm وضمان نقاء البروتين.

بروتين شيميري بشري dsRBEC: تستخدم عملية تحلل الخلايا خليطًا يحتوي على اليوريا، يتبعها إعادة طي البروتين على العمود للحصول على بروتينات نشطة وظيفيًا.

البروتينات التي تتصل بالأيونات الثنائية الشحنة: يجب إضافة الأيونات الثنائية الشحنة المحددة أثناء التعبير والتَّيهية، ويجب تجنب المواد المخلبة.

البروتينات الحديد- الكبريت: يجب تجنب استخدام الإميدازول لمنع تفكك مجموعة [2Fe ± 2S]، مما يضمن الطي الصحيح لوظيفة البروتين.

جزء قابل للذوبان من LLT1: تصميم الطفرة يُحسِّن تكوين رابطات الكبريتيد ثنائية والطي البروتيني، مما يؤدي إلى بروتينات مستقرة وذات إنتاجية عالية.

بلورة كيناز CLK1: التعبير المشترك مع فوسفاتاز λ يزيل الفوسفات من مواقع التفويض. ويُستخدم التصنيف حسب الاستبعاد الحجمي (SEC) والتصنيف بالتبادل الأيوني للحصول على CLK1 متجانس بدون تفويض غير متجانس.

البروتينات لاستخدامها كأجسام مضادة: تقييم النقاء ضروري لتجنب التلوث بالبروتينات ذات المناعة العالية. بالنسبة لل الأجسام المضادة للبيوتيوب البناء، يجب الحفاظ على التشكيل الثلاثي الأبعاد للأنتيجين.

البروتينات المعرضة للتكتل: تُستخدم استراتيجيات مثل فحص سلالات مختلفة وتقليل درجات الحرارة أثناء الزراعة لتقليل مشاكل التكتل، وتصمم استراتيجيات تنقية سريعة.

إزالة الإندوتوكسين: تُستخدم طرق مثل الكروماتوجرافيا الشحنة الموجبة والكروماتوجرافيا الارتباط بالمكونات البولي阳يون لإزالة الإندوتوكسينات، مما يضمن أن مستويات LPS تكون أقل من حدود التطبيق.

المجمعات البروتينية: تُعبَّر الوحدات الفرعية بشكل منفصل وتُجمع في المختبر أو تُعبَّر معًا لتكوين مركبات وظيفية. يتم تقييم سلامة المركب من خلال التجانس والكتلة المولية.

خاتمة

تبدأ إنتاج البروتينات بتصميم استراتيجي، مع الأخذ بعين الاعتبار الصفات الكيميائية الحيوية والاستخدامات. أثناء التعبير، التنقية، والتحكم في الجودة، يتم تحسين الظروف والطرق لتحقيق الاستقرار، ومنع التكتلات، والحالة الطبيعية. تُستخدم البروتينات المُنقاة في العديد من التطبيقات اللاحقة مثل التوصيف الفيزيائي الحيوي.

ياوهاي بايو-فارما تبحث أيضًا عن شركاء عالميين، سواء كانوا مؤسسات أو أفراد، وتقدم أكثر التعويضات تنافسية في الصناعة. إذا كان لديك أي أسئلة، لا تتردد في التواصل معنا: [email protected]