مراقبة الجودة وتطبيقات البروتينات المعاد تركيبها

إن مراقبة جودة البروتينات المعاد تركيبها أمر بالغ الأهمية لضمان موثوقية البيانات التجريبية وإمكانية إعادة إنتاجها. وتتطلب كل خطوة، من تصميم المشروع إلى عملية الإنتاج، استراتيجيات صارمة لمراقبة الجودة.

استراتيجيات مراقبة الجودة

يلتزم القطاع الصناعي بإجراءات تشغيلية صارمة، في حين يحتاج المجتمع الأكاديمي إلى تعزيز المعرفة المهنية لتحسين إمكانية إعادة إنتاج البيانات. تتطلب البروتينات ذات التطبيقات البيولوجية أو الخصائص الكيميائية الحيوية المحددة استراتيجيات مراقبة الجودة المصممة خصيصًا.

أمثلة وحلول صعبة

تتمتع شركة Yaohai Bio-Pharma بخبرة واسعة في إنتاج البروتين المعاد تركيبه وتنقيته، إلى جانب فريق من الخبراء، مما يضمن اكتمال إنتاج البروتين الخاص بك بنقاء عالٍ. بالاستفادة من خبرتنا من مئات المشاريع، تلخص Yaohai بلطف كيفية تحسين تنقية البروتين.

البروتينات المرتبطة بالأحماض النووية: تعتبر خطوات إزالة الأحماض النووية، مثل النوكليازات أو ترسيب PEI، ضرورية. تتم مراقبة نسبة A260nm/A280nm للكشف عن تلوث الأحماض النووية.

سلسلة الفيريتين الثقيلة 1 للفأر لفحص المجهر الإلكتروني بالتبريد: يجب تحسين خطوات التنقية، ويجب إضافة النوكليازات لتقليل نسبة A260nm/A280nm وضمان نقاء البروتين.

البروتين الكيميري البشري dsRBEC: تستخدم عملية تحلل الخلايا محلولًا يحتوي على اليوريا، يليه إعادة طي العمود للحصول على بروتينات نشطة وظيفيًا.

البروتينات التي تربط الكاتيونات ثنائية التكافؤ: يجب إضافة كاتيونات ثنائية التكافؤ محددة أثناء التعبير والتطهير، ويجب تجنب عوامل التخلب.

بروتينات الحديد والكبريت: يجب تجنب الإيميدازول لمنع تعطل مجموعة [2Fe ± 2S]، وضمان طي البروتين ووظيفته بشكل صحيح.

جزء قابل للذوبان من LLT1: يعمل تصميم الطفرة على تحسين تكوين رابطة ثاني كبريتيد وطي البروتين، مما يؤدي إلى الحصول على بروتينات مستقرة وعالية الإنتاجية.

تبلور كيناز CLK1: يؤدي التعبير المشترك مع λ-فوسفاتاز إلى إزالة الفوسفات من مواقع الفسفرة، ويتم استخدام كروماتوغرافيا استبعاد الحجم (SEC) وكروماتوغرافيا التبادل الأنيوني للحصول على CLK1 متجانس بدون فسفرة غير متجانسة.

البروتينات المستخدمة في المستضدات: إن تقييم النقاء ضروري لتجنب التلوث بالبروتينات شديدة المناعة. بالنسبة للأجسام المضادة للنمط البنيوي، يجب الحفاظ على التكوين الثلاثي الأبعاد للمستضد.

البروتينات المعرضة للتجمع: ويتم استخدام استراتيجيات مثل فحص السلالات المختلفة وخفض درجات حرارة الزراعة للحد من مشاكل التجمع، كما يتم تصميم استراتيجيات التنقية السريعة.

إزالة السموم الداخلية: تعمل طرق مثل كروماتوغرافيا الشحنة الموجبة وكروماتوغرافيا تقارب ربيطة البولي كاشون على إزالة السموم الداخلية، مما يضمن أن مستويات LPS أقل من حدود التطبيق.

المجمعات البروتينية: يتم التعبير عن الوحدات الفرعية بشكل منفصل وتجميعها في المختبر أو التعبير عنها معًا لتكوين مجمعات وظيفية. يتم تقييم سلامة المجمع من خلال التجانس والكتلة المولية.

وفي الختام

يبدأ إنتاج البروتين بالتصميم الاستراتيجي، مع مراعاة السمات والتطبيقات الكيميائية الحيوية. أثناء التعبير والتنقية ومراقبة الجودة، يتم تحسين الظروف والأساليب لتحقيق الاستقرار وعدم التجمع والحالة الطبيعية. تخدم البروتينات النقية استخدامات لاحقة مختلفة، مثل التوصيف البيوفيزيائي.

كما تسعى شركة Yaohai Bio-Pharma بنشاط إلى استقطاب شركاء عالميين من المؤسسات أو الأفراد وتقدم التعويضات الأكثر تنافسية في الصناعة. إذا كانت لديك أي أسئلة، فلا تتردد في الاتصال بنا: [email protected]