تحسين عملية التحلية للإنسولين البشري المُعاد تركيبه

في السنوات الأخيرة، دفعت زيادة أعداد مرضى السكري الطلب على الأنسولين، لكن الأنسولين الميسور التكلفة غير متاح بكثرة. إنتاج الأنسولين بشكل كفؤ وأقتصادي أمر بالغ الأهمية. يتم إنتاجه بشكل أساسي باستخدام بكتيريا الإشريكية القولونية (E. coli) والخميرة بسبب نموها السريع وتكاليفها المنخفضة، ولكن E. coli تواجه عمليات معقدة بعد العمليات.

نظرة عامة على المعالجة اللاحقة:

تنقية الأنسولين البشري المُعاد تركيبه من جسيمات E. coli تتضمن عدة خطوات، بما في ذلك الاسترداد، الغسيل، الذوبان والأكسدة، القطع، تبديل المحلول المرافق، التنقية الكروماتوجرافية، الترسيب، إعادة الطبيعة، القطع الإنزيمي، والصياغة.

تتمتع Yaohai Bio-Pharma بخبرة واسعة في إنتاج وتنقية الأنسولين المُعاد تركيبه، بالإضافة إلى فريق من الخبراء، مما يضمن إتمام إنتاج الأنسولين الخاص بك بكفاءة عالية. باستغلال خبرتنا من مئات المشاريع، تلخص Yaohai كيف يمكن تحسين عملية التنقية اللاحقة للأنسولين البشري المُعاد تركيبه.

استعادة الجسم الشامل وغسله:

تُكسر الخلايا باستخدام طرق ميكانيكية (مثل الترددات فوق الصوتية، التجانس تحت الضغط العالي) أو معالجة الليزوزيم، تليها محاليل غسيل (تحتوي على اليوريا، تريتون X-100، وما إلى ذلك) لإزالة الشوائب. أثناء الغسيل، يجب تحسين المعايير لضمان جودة البروتين مع السيطرة على التكاليف.

محلول الجسم الشامل وأكسدة:

تُستخدم مذيبات قوية التركيز (مثل كلوريد الغوانيدين واليوريا) لحل الأجسام الشاملة، مع إضافة ثنائي ثايوثريتول أو β-مركابتوэтانول لمنع تكوين روابط ثنائي الكبريت غير الصحيحة. يأثر pH والحرارة بشكل كبير على réactions الحل والتآكل.

الانقسام واستبدال العاز:

يُستخدم انقسام السيانوجين بروميد لإزالة الحمض الأميني الابتدائي النيتروسinal، ولكنه يشكل مشكلات سمية وقلة في التخصص. من خلال التنقية أو الترشيح الفائق أو كروماتوغرافيا الانفصال حسب الحجم، يتم إزالة المواد الكيميائية الضارة استعدادًا للعمليات اللاحقة.

التنقية الكروماتوغرافية والتبلور:

تُستخدم تقنيات كروماتوغرافية متعددة لتنقية الأنسولين، بما في ذلك الكروماتوغرافيا بالارتباط، وكروماتوغرافيا تبادل الأيونات، وكروماتوغرافيا الطور العكسي، وكروماتوغرافيا التفاعل الهيدروفوبي، وكروماتوغرافيا الانفصال حسب الحجم. يتم استخدام طرق الترسيب مثل ترسيب درجة الحموضة والترصّد باستخدام الزنك لإزالة الشوائب وتركيز البروتينات.

إعادة التشكيل:

يتم تخفيف البروتين المذاب في محلول إعادة التشكيل لتعزيز تكوين الروابط ثنائي الكبريت بشكل صحيح وطي البروتين. يتم أيضًا استخدام كروماتوغرافيا السائل لطي البروتينات والتنقية كطرق لإعادة التشكيل.

الانقسام الإنزيمي والتوزيع:

تُستخدم التربسين وكاربوكسيبيبتيداز ب لقطع الببتيد ج، مما يشكل ثنائي الأنسولين النشط. أخيرًا، يتم استخدام التبلور والتجميد بالفراغ لإزالة الأملاح والمحاليل المتبقية، لتحضير صيغة مستقرة. يتم إضافة مضافات معينة (مثل الزنك والبروتامين) لتلبية الاحتياجات السريرية المختلفة.

الخاتمة:

معالجة الأنسولين بعد الاستخراج من إي. كولاي معقدة. يجب أن يكون التركيز المستقبلي على تحسين هذه الخطوات لتحقيق إنتاج كفؤ واقتصادي لتلبية الطلب وتقليل التكاليف.

ياوهاي بايو-فارما تبحث أيضًا عن شركاء عالميين، سواء كانوا مؤسسات أو أفراد، وتقدم أكثر التعويضات تنافسية في الصناعة. إذا كان لديك أي أسئلة، لا تتردد في التواصل معنا: [email protected]