تحسين عملية تنقية الأنسولين البشري المؤتلف

في السنوات الأخيرة، أدى نمو عدد مرضى السكري إلى زيادة الطلب على الأنسولين، ولكن هناك نقص في الأنسولين بأسعار معقولة. يعد إنتاج الأنسولين بكفاءة وبطريقة اقتصادية أمرًا بالغ الأهمية. يتم إنتاج E. coli بشكل أساسي عن طريق البكتيريا الإشريكية القولونية (E. coli) والخميرة بسبب النمو السريع والتكلفة المنخفضة، وتواجه عملية معالجة لاحقة معقدة.

نظرة عامة على المعالجة اللاحقة:

تتضمن عملية تنقية الأنسولين البشري المعاد تركيبه من أجسام الإشريكية القولونية خطوات متعددة، بما في ذلك الاسترداد والغسيل والذوبان والأكسدة والانقسام وتبادل العازل والتنقية الكروماتوغرافية والترسيب وإعادة التطبيع والانشطار الأنزيمي والصياغة.

تتمتع شركة Yaohai Bio-Pharma بخبرة واسعة في إنتاج الأنسولين المؤتلف وتنقيته، إلى جانب فريق من الخبراء، مما يضمن اكتمال إنتاج الأنسولين بكفاءة عالية. بالاستفادة من خبرتنا من مئات المشاريع، تلخص شركة Yaohai بلطف كيفية تحسين عملية التنقية اللاحقة للأنسولين البشري المؤتلف.

الإدماج استعادة الجسم والغسيل:

يتم تفكيك الخلايا باستخدام طرق ميكانيكية (مثل الموجات فوق الصوتية، والتجانس تحت الضغط العالي) أو معالجة الليزوزيم، متبوعة بمحاليل الغسيل (التي تحتوي على اليوريا، وتريتون إكس-100، وما إلى ذلك) لإزالة الشوائب. أثناء الغسيل، يجب تحسين المعلمات لضمان جودة البروتين مع التحكم في التكاليف.

إذابة الجسم المتضمن والأكسدة:

يتم استخدام المواد المذيبة عالية التركيز (مثل هيدروكلوريد الغوانيدين واليوريا) لإذابة أجسام التضمين، مع إضافة ديثيوثريتول أو بيتا ميركابتويثانول لمنع تكوين روابط ثاني كبريتيد غير صحيحة. تؤثر درجة الحموضة ودرجة الحرارة بشكل كبير على تفاعلات الذوبان والأكسدة.

الانقسام وتبادل العازلة:

تُستخدم عملية انقسام بروميد السيانوجين لإزالة الأحماض الأمينية المبدئية من الطرف الأميني، ولكنها تسبب سمية ومشاكل تتعلق بانخفاض الخصوصية. ومن خلال غسيل الكلى أو الترشيح الفائق أو كروماتوغرافيا استبعاد الحجم، تعمل عملية تبادل العازل على إزالة الكواشف الضارة استعدادًا للعمليات اللاحقة.

التنقية والترسيب الكروماتوغرافي:

يتم استخدام تقنيات كروماتوغرافية متعددة لتنقية الأنسولين، بما في ذلك كروماتوغرافيا التقارب، وكروماتوغرافيا التبادل الأيوني، وكروماتوغرافيا الطور العكسي، وكروماتوغرافيا التفاعل الكاره للماء، وكروماتوغرافيا استبعاد الحجم. يتم استخدام طرق الترسيب، مثل ترسيب الأس الهيدروجيني وتبلور الزنك، لإزالة الشوائب وتركيز البروتينات.

إعادة الطبيعة:

يتم تخفيف البروتين المذاب في محلول منظم لإعادة التطبيع لتعزيز التكوين الصحيح لروابط ثنائي الكبريتيد وطي البروتين. كما تُستخدم أيضًا كروماتوغرافيا السائل لطي البروتين والتحليل الكيميائي لإعادة التطبيع.

الانقسام الأنزيمي والتكوين:

يتم استخدام التربسين وكاربوكسي ببتيداز ب لتقسيم الببتيد سي، وتشكيل ثنائي هيتروديز ​​الأنسولين النشط. وأخيرًا، يتم استخدام التبلور والتجفيف لإزالة الأملاح المتبقية والمخازن، وإعداد تركيبة مستقرة. تتم إضافة إضافات محددة (مثل الزنك والبروتامين) لتلبية الاحتياجات السريرية المختلفة.

الخلاصة:

المعالجة اللاحقة للأنسولين من E. كولاي إن عملية التصنيع معقدة. وينبغي أن ينصب التركيز في المستقبل على تحسين هذه الخطوات لتحقيق إنتاج فعال واقتصادي لتلبية الطلب وخفض التكاليف.

كما تسعى شركة Yaohai Bio-Pharma بنشاط إلى استقطاب شركاء عالميين من المؤسسات أو الأفراد وتقدم التعويضات الأكثر تنافسية في الصناعة. إذا كانت لديك أي أسئلة، فلا تتردد في الاتصال بنا: [email protected]