الـ RNA الدائري (circRNA) هي فئة من الـ RNA ذي السلسلة الواحدة والمغلق بالتآلف الكيميائي بدون أطراف 5' أو 3'. هذه الميزة الفريدة يمكن أن تمنع تحلل الـ circRNA بواسطة العوامل الناقلة للإكسونات وتعطي الـ circRNA استقرارًا عاليًا وكفاءة ترجمة مقارنة بالـ mRNA الخطي.
يتم تكوين circRNA عن طريق التدوير في المختبر من سلف RNA خطي. يمكن أن تؤدي الشوائب المتعلقة بالعملية أو المنتج إلى استجابة مناعية داخلية، خاصة RNAs الخطية (سلائف RNA، RNA المشقوق، الأجزاء الداخلية المقطوعة). من الضروري إزالة الشوائب الخطية لـ RNA والحصول على غلات عالية من circRNA النقية لاستخدامها في البحث والتطبيقات العلاجية داخل وخارج الجسم.
قامت Yaohai Bio-Pharma بتطوير مجموعة من تقنيات تكوين circRNA لتوفير circRNA ذات نقاء عالٍ، والتي تتضمن تصميم وتحسين التسلسل، النسخ في المختبر (IVT)، الدوران / التحلل، التنقية باستخدام الكروماتوجرافي السائل ذي الأداء العالي الإعدادي (HPLC)، وحزمة nanolipid (LNP). يتم إطلاق جميع المنتجات تحت معايير صارمة للتحكم في الجودة (QC).
النتائج المقدمة
منتج | CircRNA ذات النقاء العالي المخصصة |
طريقة التركيب | الإنترون الذاتي من مجموعة I |
محتوى RNA | 100 µg~10 mg (OD260) |
الطول | 50~8,000 نوكليوتيد |
نقاء | A260/A280 |
التحديد والصفاء | فصل الكهربائي باستخدام جل الآغاري (AGE)، الكروماتوجرافي السائل ذي الأداء العالي (HPLC) |
المخزن المؤقت | ماء خالي من RNase (سائل) |
الشحن | شحن مع الثلج الجاف؛ أو عند درجة حرارة الغرفة |
تخزين | سائل، عند أو أقل من -20°C؛ مسحوق مجفف بالتجميد، عند 4°C |
تطبيق | تطوير صيغ LNP، اختبارات خلوية، تجارب حيوانية |
دراسات الحالة
طورنا عملية تنقية قابلة للتوسيع باستخدام HPLC التحضيرية بشكل رئيسي، وأعددنا circRNA بنقاء عالٍ (>95%).
الشكل. تنقية وتحليل circRNA بنقاء عالٍ (98%)