Plasmid-DNA, som vitro transkriptionsmall (IVT), är ett impotant råmaterial för mRNA-tillverkning. Högt utbyte, hög rening och hög återvinning av plasmid-DNA är huvuddelen mål under plasmidprocessutveckling.
Yaohai Bio-Pharma tillhandahåller en enda lösning för plasmidutveckling, inklusive uppströms (fermentering), nedströms (rening) processutveckling och processkarakterisering och processvalidering. Vi har lång erfarenhet av att förbättra plasmidutbytet och isolera det från komplexa matriser genom att utveckla och optimera processer för fermentering, rening och borttagning av föroreningar.
Grundläggande bioprocess för plasmidtillverkning inkluderar: Escherichia coli (E. coli) fermentering, cellskörd och alkalisk lysering, klarning, koncentrering, trestegs kromatografiprocess (infångning, mellanliggande rening och polering) och koncentrering.
Service detaljer | Enhetsverksamhet | parametrar |
E.coli jäsning |
Skaka kolven | Mediekompositioner, antibiotika, inokulumvolym, tillväxttemperatur och etc. |
jäsnings (7 liter) |
Antibiotikum, inokulumvolym, tillväxttemperatur, pH, löst syre (DO), utfodringsläge (t.ex. matad-batch), matningsmedier, jäsningstid och etc. |
|
Cellskörd | mikro~~POS=TRUNC | Standard E.coli skördeprocess |
Celllys | Cellresuspendering, alkalisk lysering, neutralisering | Alkaliförhållande, lyseringstid |
Förtydligande | Filtrering | Råfiltrering, 20 µm och ett 5 µm filtertåg (föredraget) |
Koncentration | Ultrafiltrering, tangentiell flödesfiltrering | Porstorlek (eller NMWC), Transmembrantryck (TMP), Flux, förhållande mellan filtratvolym och membranarea |
Trestegskromatografi | Storleksexklusionskromatografi (SEC) eller gelfiltreringskromatografi (GFC) | Kolonnlängd och diameter, buffertsammansättning, injektionsvolym, mobilfassammansättning (adsorption och desorption), pH, flödeshastighet, jämvikt, bindning, tvättning och elueringsförhållanden. |
Affinitetskromatografi (AF) | ||
Anjonbyteskromatografi (AEX) | ||
Koncentration | Ultrafiltrering, tangentiell flödesfiltrering | Porstorlek (eller NMWC), Transmembrantryck (TMP), Flux, förhållande mellan filtratvolym och membranarea |
Fler biologiska reningsprocesslösningar |