Atbalsta Reporter RNA modifikācijas metodes

Izvēlnoties, kura metode ziņotāja mRNA modifikācijai ir preferēta, noteikts atbilde nav, jo katra metode un ziņotāja gēns ir ar savām priekšrocībām un piemērotiem scenarijiem. Šeit ir dažas bieži izmantotās mRNA modifikācijas metodes un ziņotāja gēni, kā arī to īpašības un piemērotība.

mRNA Modifikācijas Metodes

Metilēšana:

1. m6A : Saistīta ar mRNA stabilitāti, splicingu, tulkotāju un miRNA apstrādi. Atklāšanas izaicinājumi ietver antikorpūs izvēli un lokāciju.
2. 5' Kap Nm : Palielina stabilitāti, splicingu, poliadenilāciju un kodolu eksportu. Palīdz atšķirt paša RNA no ārējām RNA.
3. Pseudouridilēšana : Maina kodonus, palielina stabilitāti un reaģē uz stresu. Katalizētas pseudouridilsintēzes dēļ.

Nenaturālu nukleotīdu ieviešana:

1. Ieviesta transkripcijas laikā, izmantojot divkārtēju ķīmisko modifikāciju stratēģiju. Tas uzlabo stabilitāti, efektivitāti un proteīna izpausmi.

Signālliecinieku gēni

1. Zaļās fluorescences olbaltumieru gēns (GFP) : Priekšrocības: Ērti noteikt, stabilas fluorescences īpašības, nav toksiskas šūnām, piemērotas dzīvu šūnu attēlošanai. Kaitējošas puses: Ierobežota fluorescences intensitāte.
2. Paaugstinātais zaļais fluorescenču olbaltums (eGFP) : Priekšrocības: Par vairāk nekā sešiem reiziem spožāks nekā wilddzimuma GFP, kas to padara piemērotāku kā signālliecinieku gēnu izpētē par gēnu izpausmi, regulāciju, šūnu diferencēšanos un olbaltumu lokāciju un transportu organismos.
3. Sarkanas fluorescences olbaltumi (piem., mCherry) : Priekšrocības: Garākas stimulēšanas un emisijas vilnis, kas rezultē mazākā fona līmenī iekšējā šūnu attēlošanā, lieliska fluorescences spožums un fotostabilitāte, kā arī zemāka šūnu toksiskuma līmeņa. Kaitējošas puses: Var nebūt tik bieži izmantoti kā GFP noteiktās eksperimentālās apstākļos.
4. Grauzkalna svilpiņas luciferāze : Priekšrocības: Turklāt, ja ir ATP, magnezija joni un skābeklis, tas var katalizēt luciferīna oksidāciju līdz oksiluciferīnam, emejot bioloģisko fosforesenci. Tas ir piemērots kā kontrole pētījumiem par ceļa gēnu tulkotnes efektivitāti uz mammiferu šūnām, šūnu dzīvību un in vivo attēlošanas testiem.

Secinājums

Izvēloties to, kuru ziņotāja mRNA modifikāciju metodi izvēlēties, atkarība ir no specifiskajiem eksperimenta mērķiem, pētnieciskajiem apstākļiem un eksperimenta nosacījumiem. Piemēram, ja nepieciešama augsta jutīguma, eGFP var būt labāka izvēle. Ja nepieciešams attēlošana garākos vilcienos, lai samazinātu fona traucējumus, tad sarkanās fluorescences proteīni, piemēram, mCherry, var būt piemērotāki. Turklāt, pamatojoties uz specifiskajām mRNA modifikācijas vajadzībām (piemēram, stabilitātes uzlabošanu vai tulkotnes efektivitātes uzlabošanu), var izvēlēties atbilstošo modifikācijas metodi.

Kā pirmā un lielākā mikrobioloģiskā biologisko vielu CRDMO Lielajā Ķīnā, Yaohai Bio-Pharma piedāvā kopējus pielāgotus risinājumus vai atsevišķus pakalpojumus, kas ietver no RNA sintēzes, šķiedru inženieru darbu un konstruēšanu, līdz augšējo un apakšējo procesu attīstībai, GMP vai ne-GMP līmeņa vielu ražošanai, kā arī aizpildīšanas un pabeigšanas pakalpojumiem dažādām modalitātēm, piemēram, mRNA, circRNA, plazmidRNA, rekombinētiem olbaltiem, peptīdiem, enzīmiem, vienām domēnu antikorpusiem un VLPs cilvēku un veterinārā izmantošanai.

Yaohai Bio-Pharma arī aktīvi meklē pasaules līmenī iestāžu vai personiskus partnerus, piedāvājot visaugstāko atalgojumu no_brīvās_tirgus. Ja jums ir kādi jautājumi, lūdzu, nekavējoties sazinieties ar mums: [email protected]