組み換えタンパク質の生産: 遺伝子組み換え大腸菌株

大腸菌 (E. coli) はバイオ医薬品産業における組み換えタンパク質の生産において重要な役割を果たしており、生物学的医薬品の製造における最初の発現ベクターとして機能しています。E. coli は、成長が速く、遺伝子操作が容易で、組み換えタンパク質を迅速に合成できるなどの利点があります。広範囲にわたる改良により、E. coli はタンパク質発現に最適な選択肢となり、さまざまな遺伝子組み換え E. coli 株が設計されました。

Yaohai Bio-Pharma は、大腸菌発現システムを使用した一連のバイオ医薬品の発酵、精製、製剤プロセス開発、生産のためのワンストップアウトソーシングサービスを専門に提供しています。 Yaohai の豊富な経験に基づいて、組み換えタンパク質生産に使用される一般的な大腸菌株 4 種類とその特徴をまとめました。

BL 21株

BL21 株は大腸菌 B 系統に由来し、Lon プロテアーゼと外膜プロテアーゼ OmpT を欠いています。Lon プロテアーゼは主に外因性タンパク質を分解し、OmpT は主に細胞外マトリックスタンパク質を分解します。この XNUMX つの重要なプロテアーゼが欠如しているため、組み換えタンパク質の分解を効果的に防ぐことができます。

折り紙株

大腸菌 K-12 の派生株である Origami 株は、チオレドキシン還元酵素とグルタチオン還元酵素に変異があり、ジスルフィド結合を含む正しく折り畳まれたタンパク質の形成を促進し、タンパク質の溶解性を高めます。Origami、Origami 2、Origami B を含む Origami 株は、ジスルフィド結合を含む活性タンパク質の発現に適しています。

シャッフル株

SHuffle 株は、細胞質内でジスルフィド結合イソメラーゼ DsbC を恒常的に発現し、酸化タンパク質における正しいジスルフィド結合の形成を促進します。また、タンパク質の折り畳みの分子シャペロンとして機能し、正しい構造の形成を補助します。

ロゼッタ株

Rosetta 株は、原核生物システムにおける外来遺伝子、特に真核生物遺伝子の発現レベルを向上させることを目的として、希少コドンに対応する tRNA を大腸菌に補充します。BL21 から派生し、クロラムフェニコール耐性 pRARE プラスミドを保有するこの株は、元々大腸菌に存在しない希少コドン (AUA、AGG、AGA、CUA、CCC、および GGA) に対応する XNUMX つの tRNA を補充し、より「普遍的な」タンパク質発現を実現します。

まとめ

組み換えタンパク質の生産を成功させるには、宿主、ベクター、培養条件の 3 つの要素が重要です。組み換えタンパク質の物理化学的特性、各株の固有の利点、実験の特定のニーズを理解した上で、最も適切な宿主を選択する必要があります。さらに、プラスミド ベクター、温度、誘導剤などの要素を最適化して、タンパク質の発現を高める必要があります。

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