塩化リチウム沈殿の魅惑的な世界を探検 日本

塩化リチウム沈殿法は、RNA を溶液から分離するために広く使用されています。

プロセスの詳細は次のとおりです。

1. サンプルの準備: RNAを含むサンプルから始めます。 インビトロ 転写混合物。

2. 塩化リチウムの添加: RNA 溶液に適切な量の濃縮塩化リチウム溶液を加えます。

3. インキュベーション: 塩化リチウムを加えた後、溶液を低温 (通常は -20°C 程度) でインキュベートします。これにより、RNA 分子が溶液から沈殿します。

4. 遠心分離: インキュベーション後、溶液を高速で遠心分離します。これにより、沈殿した RNA が不純物を含む溶液の残りの部分から分離されます。

5. 洗浄: 遠心分離が完了したら、RNA の沈殿を妨げないように注意しながら上清を取り除きます。RNA 粒子を冷たいエタノールまたはイソプロピルアルコールで洗浄し、残っている不純物を取り除きます。

6. RNA の再懸濁: 洗浄後、RNA 沈殿物を短時間空気乾燥させ、TE バッファー (Tris-EDTA バッファー) や蒸留水などの適切なバッファーに再懸濁します。RNA を適切に再懸濁するには、穏やかなピペッティングまたは渦電流が必要になる場合があります。

7. 定量と分析: 最後に、分離された RNA を紫外線分光法または蛍光法で定量します。これにより、RNA サンプルの濃度と純度が決定されます。これは、LNP カプセル化や細胞トランスフェクションなどの下流アプリケーションにとって重要です。

Yaohai Bio-Pharma は、製造プロセスにおいて塩化リチウム沈殿法を巧みに使用しています。この方法はシンプルで低コストであり、さまざまな分子生物学アプリケーションに適した高品質の RNA を生産できるためです。ただし、特定のサンプルで最良の結果を得るには、条件 (塩化リチウム濃度、インキュベーション時間、遠心分離速度など) を最適化することが重要です。

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