リチウムクロライ沈殿の魅力的な世界を探る
リチウムクロライ沈殿法は、溶液からRNAを分離するために広く使用されています。
このプロセスの分解は次のとおりです:
1. サンプル準備: RNAを含むサンプル、例えば インビトロ トランスクリプト混合物で開始します。
2. リチウムクロライ添加: RNA溶液に濃縮されたリチウムクロライ溶液の適切な量を加えます。
3. 濃縮: リチウムクロライを添加した後、溶液を一般的に-20°C前後の低温でインキュベートします。これにより、RNA分子が溶液から沈殿します。
4. 離心: インキュベート後に、溶液を高速で遠心します。これにより、不純物を含む溶液の他の部分から沈殿したRNAが分離されます。
5. 洗浄: 離心が完了したら、RNA沈殿に干渉することなく上澄液を慎重に取り除きます。冷たいうる醇またはイソプロピルアルコールでRNA粒子を洗浄して、残留する不純物を取り除きます。
6. RNA再懸濁: 洗浄後、RNA沈殿物は短時間空気乾燥され、その後TEバッファー(Tris-EDTAバッファー)や蒸留水などの適切なバッファーで再懸濁されます。RNAを十分に再懸濁するために、優しくピペット操作を行うか、渦流を使用する必要があります。
7. 計量と分析: 最後に、分離されたRNAは紫外線分光法または蛍光法によって計量されます。これにより、RNAサンプルの濃度と純度が決定され、LNPカプセル化や細胞転染など、下流の応用において重要です。
Yaohai Bio-Pharmaは、リチウムクロライド沈殿法を生産プロセスで使用することに長けています。これは、手法が単純でコストが低く、さまざまな分子生物学的な応用に適した高品質のRNAを生成するためです。ただし、特定のサンプルに対して最良の結果を得るためには、条件(例: リチウムクロライド濃度、インキュベート時間、遠心分離速度)を最適化することが重要です。
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