L'mRNA viene sintetizzato mediante trascrizione in vitro (IVT) da un DNA plasmidico linearizzato (pDNA). Durante la procedura IVT si formano anche alcuni sottoprodotti, compreso l'RNA a doppio filamento (dsRNA) identificato come i principali fattori scatenanti del percorso immunitario innato. È fondamentale rimuovere le impurità e ottenere rese elevate di mRNA puro per la ricerca sull'mRNA in vitro/vivo e applicazioni terapeutiche.
Yaohai Bio-Pharma ha creato una serie di tecnologie di sintesi dell'mRNA da fornire mRNA altamente puro, come progettazione e ottimizzazione di sequenze, IVT, purificazione, liofilizzazione e incapsulamento di nanoparticelle lipidiche (LNP). Tutti i prodotti vengono rilasciati secondo rigorosi standard di controllo qualità. La cromatografia di affinità (AC), basata sull'interazione forte e selettiva tra la coda 3' poliA dell'mRNA con la fase stazionaria oligo dT, è una strategia di purificazione efficiente e scalabile per l'mRNA.
Risultati finali
| Prodotto |
mRNA altamente puro personalizzato
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| Lunghezza |
100~10,000 nucleotidi |
| Contenuto dell'RNA |
100 µg~10 mg (OD260) |
| Purezza |
A260 / A280 |
| Identificazione e purezza |
Elettroforesi su gel di agarosio (AGE)
Elettroforesi capillare (CE)
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| Buffer |
Acqua priva di RNasi (liquida) |
| Spedizione |
Spedire con ghiaccio secco; o a temperatura ambiente |
| Archiviazione |
● Liquido, pari o inferiore a -20°C
● Polvere liofilizzata, a 4°C
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| Applicazioni |
Sviluppo della formulazione LNP,
Saggi cellulari, esperimenti su animali
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Altre opzioni personalizzabili
| 5' Cap |
● uncapped
● Cap0, co-limitato
● Cap1, co-limitato
● Cap1, tappatura enzimatica
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| 5' UTR/3' UTR |
● Sequenza UTR della natura
● Sequenza UTR mutante/ingegnerizzata
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| Coda PolyA da 3' |
● 100A ~120A Coda (consigliato)
● Coda poliA segmentata
● Altra coda personalizzata
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| Nucleosidi modificati |
● Basi non modificate,
● Pseudouridina (Ψ),
● N1-metilpseudouridina (N1Ψ),
● 5-metilcitosina (m5C),
● 5-metiluridina (m5U),
● 5-metossiuridina (5moU),
● 2-tiouridina (s2U),
● 2'-O-metil-U
● Altri
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Argomento di studio
Abbiamo sviluppato un processo di purificazione cromatografica multifase e preparato mRNA con elevata purezza e integrità (>95%).
Fig. Analisi dell'mRNA con elevata purezza (>98%)
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