Utilizzo dei corpi inclusivi batterici per la produzione di proteine ricombinanti

I corpi inclusivi batterici (IBs) nella produzione di proteine ricombinanti offrono facilità di separazione, stabilità, alta espressione e resistenza alla degradazione, e possono esprimere proteine tossiche con attività biologica. I progressi nella comprensione degli IB aprono nuove vie per il loro trattamento, identificando sfide e soluzioni per la ricerca futura.

Yaohai Bio-Pharma ha più di 10 anni di esperienza nella produzione di proteine ricombinanti utilizzando sistemi di fermentazione microbica. La nostra forte ed esperta squadra di esperti garantisce che la proteina rifoldata purificata possa raggiungere 1,5 g/L.

Strategie di Elaborazione e Sfide degli IB

Separazione degli IB I metodi per la separazione degli IB dipendono dalla struttura-funzione delle proteine e dalle esigenze dell'applicazione. I metodi fisici rompono le cellule ma possono danneggiare la qualità delle proteine. I metodi enzimatici migliorano la purezza ma sono costosi. I detergenti delicati funzionano per gli IB classici, non per quelli non classici. Il controllo del pH è cruciale per la solubilità. La deposizione elettroforetica è semplice ma non scalabile per proteine biologicamente attive.

Solubilizzazione degli IB La solubilizzazione degli IB è fondamentale per recuperare proteine attive. I denaturanti forti danneggiano la struttura nativa, mentre i non-denaturanti non sono adatti per gli IB classici. I solubilizzatori delicati possono sciogliere gli IB proteggendo la struttura della proteina, ma non per tutte le proteine. Futuri studi richiedono algoritmi migliori per selezionare i solubilizzatori.

Strategie di renaturazione La renaturazione delle proteine è fondamentale per la funzionalità. La renaturazione in vitro si confronta con sfide. La scelta del solubilizzante, la concentrazione proteica, le condizioni e i metodi influenzano l'esito. I solubilizzanti delicati proteggono la struttura nativa e migliorano la qualità. Concentrazioni moderate e condizioni ottimizzate riducono l'aggregazione. Metodi basati su colonne con matrici monolitiche offrono una maggiore purezza e resa.

Purificazione di Proteine Renaturate Una purificazione ulteriore separa le proteine mal ripiegate da quelle correttamente ripiegate. La cromatografia tradizionale fatica con proteine simili. Metodi alternativi offrono vantaggi ma richiedono una selezione specifica per la proteina target. Lo sviluppo di un metodo di purificazione universale rimane una sfida.

Conclusione

Le IB offrono vantaggi nella produzione di proteine ricombinanti ma pongono sfide nel processo. Con una comprensione più approfondita della struttura-funzione delle proteine all'interno delle IB e con progressi nella separazione, solubilizzazione, renaturazione e purificazione, potrebbe presto essere raggiunta la recuperazione ad alto rendimento di proteine attive. Ciò abbasserà i costi e accelererà lo sviluppo e la ricerca nei biofarmaci, stimolando la crescita dell'industria.

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