Plazmid: Kis, kör alakú DNS-molekula nagy potenciállal

A plazmidok, kis, körkörös DNS-molekulák a DNS-rekombináció alapvető vektoraiként szolgálnak a molekuláris biológiai kutatásokban és a génterápiában. A plazmidok hozama és minősége döntő jelentőségű, a szuperspirált arány és az endotoxin-tartalom két jelentős tényező, amely befolyásolja a plazmid minőségét.

Plazmid altípusok

Az Escherichia coli-ból (E. coli) kivont plazmidok különféle altípusokban léteznek: szuperspirált (SC), nyitott körkörös (OC) és lineáris (L) formában (1. ábra). Közülük a szuperspirált plazmidok kiváló stabilitást, antigenitást, valamint magas transzfekciós és expressziós hatékonyságot mutatnak.

1. ábra: Közös plazmidaltípusok sematikus diagramja

A plazmid DNS agaróz gélelektroforézisében a migrációs sebesség sorrendje a szuperspirált DNS, a lineáris DNS és a nyílt körkörös DNS (2. ábra).

2. ábra: Különböző plazmid altípusok agaróz gél elektroforézises migrációs mintázata

A Yaohai Bio-Pharma folyamatosan fejlesztette eljárásait és technikáit annak biztosítására, hogy a transzfekciós minőségű plazmidok szupertekercses aránya ≥85%, a kutatási minőségű plazmidoké pedig ≥50%. Az alábbiakban bemutatunk egy esetet (3. ábra), ahol az agaróz gél elektroforézist a Gel-Pro Analyzer szoftverrel kombinálják a szuperspirált arány kimutatására.

3. ábra: A plazmid szupertekercselési arányának minőségellenőrzési eredményei

Endotoxin

Az endotoxin, a Gram-negatív baktériumok sejtfalának egyik összetevője elsősorban lipopoliszacharid A-ból (LPS-A) áll, mint toxikus komponenséből. A plazmid extrakció során endotoxin szabadul fel a lízisoldatba, ami súlyosan befolyásolja a plazmid sejtekbe történő transzfekciójának hatékonyságát. Ezenkívül aktiválhatja a nem specifikus immunválaszokat a sejtekben, ami téves pozitív eredményekhez vezet a kísérletekben.

A Yaohai Bio-Pharma a "nem bevezetés" és a "nagy eltávolítású" megközelítést alkalmazza, szigorúan ellenőrzi az endotoxint tartalmazó reagensek és anyagok használatát a tisztítási folyamat során. A vállalat egy hatékony endotoxin eltávolítási módszert is kifejlesztett, amely három endotoxin-tartalmat kínál: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg és ≤0.005 EU/µg.

A Yaohai Bio-Pharma nagy áteresztőképességű plazmid extrakciós szolgáltatási vonallal rendelkezik, amely 1 mg extrahált plazmidot képes szállítani akár egy hét alatt. Alapértelmezés szerint több mint hét minőség-ellenőrzési (QC) tesztet biztosít, hogy biztosítsa a kiváló minőségű, magas színvonalú plazmidok több szempontból történő szállítását.

Aktívan keresünk intézményi vagy egyéni globális partnereket is. Az iparág legversenyképesebb javadalmazását kínáljuk. Ha kérdése van, forduljon hozzánk bizalommal: [email protected]