Plazmid: Kicsi körös DNA molekula nagy potenciával

A plazmidák, kis, körös DNA molekulák szolgálnak fontos vektorokként a DNS újragózásához a molekuláris biológiai kutatásban és a génterápia területén. A plazmidák teljesítménye és minősége döntően fontos, melynek két jelentős tényezője a szuperhajlított arány és az endotoxintartalom.

Plazmida alaptípusok

Az Escherichia coli-ból (E. coli) extrahált plazmidák többféle alaptípusban fordulnak elő: szuperhajlított (SC), nyitott körös (OC) és lineáris (L) formák (Ábra 1). Ezek közül a szuperhajlított plazmidák kiemelkedő stabilitást, antigénicitást és magas transzekció- és kifejezési hatékonyságot mutatnak.

Ábra 1. A gyakori plazmida alaptípusok schematikus ábrája

A plazmida DNS agározgelelektrófózise során a migrálási sebesség sorrendje a következő: szuperhajlított DNS, lineáris DNS és nyitott körös DNS (Ábra 2).

Ábra 2. Különböző plazmida alaptípusok agározgelelektrófózis-migrációs mintája

A Yaohai Bio-Pharma folyamatosan fejlesztette tovább folyamatait és technikáit annak biztosítására, hogy a transzfekciós minőségű plazmidok superkarikált aránya ≥85%-os legyen, míg a kutatási minőségű plazmidoké ≥50%-os. A következő egy esetmutató (Ábra 3), amelyben az agározgelelektrófozist kombinálják a Gel-Pro Analyzer szoftverrel a superkarikált arány detektálására.

Ábra 3. Plazmid-superkarikált arány minőségi ellenőrzési eredményei

Endotoxin

Az endotoxin, a Gram-negatív baktériumok sejt falának összetevője, elsősorban lipopoliszsacharid-A (LPS-A) toxikus részként áll. A plazmid-kivonatkozás során az endotoxin kiengedődik a lizis-oldatba, súlyosan befolyásolva a plazmid transzfekció hatékonyságát a sejtbe. Emellett nem-specifikus immunválaszt is aktiválhat, ami hamis pozitívakhoz vezethet a kísérletek során.

A Yaohai Bio-Pharma egy „nem vezetéses” és „magas eltávolításos” megközelítést alkalmaz, szigorúan ellenőrzi az endotoxin tartalmú reagenszek és anyagok használatát a fokozatos processz során. A cég egy hatékony endotoxin-távolítási módszert is kidolgozott, három különböző endotoxin-tartalom szintet kínálva: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg és ≤0.005 EU/µg.

A Yaohai Bio-Pharma rendelkezik magas átviteli képességű plazmid kivonási szolgáltatással, amely lehetővé teszi 1 mg kivont plazmid kézbesítését maximum egy hét alatt. Alapértelmezés szerint több mint hét minőségbiztosítási (QC) tesztet biztosít, hogy több szempontból minőséges, magas szabványú plazmidot kézbezessen.

Aktívan keresünk intézményi vagy egyéni globális partnereket. A legversenyképesebb kompenzációt kínáljuk az iparágban. Ha bármilyen kérdése van, kérjük, vegye fel velünk a kapcsolatot: [email protected]