Bakteriális IB-k felhasználása rekombináns fehérjetermeléshez

A rekombináns fehérjetermelésben a bakteriális zárványtestek (IB-k) könnyű elválasztást, stabilitást, magas expressziós és degradációs rezisztenciát kínálnak, és biológiai aktivitással rendelkező toxikus fehérjéket is expresszálhatnak. Az IB-megértés előrehaladása új utakat nyit meg a feldolgozás előtt, és kihívásokat és megoldásokat azonosított a jövőbeli kutatás számára.

A Yaohai Bio-Pharma több mint 10 éves tapasztalattal rendelkezik a rekombináns fehérjék mikrobiális fermentációs rendszerekkel történő előállításában. Erős és professzionális szakértői csapatunk garantálja, hogy a tisztított újrahajtogatott fehérje elérje az 1.5 g/l-t.

Az IB-k feldolgozási stratégiái és kihívásai

Az IB-k elkülönítése Az IB elválasztás módszerei a fehérje szerkezetétől-funkciójától és az alkalmazási igényektől függenek. A fizikai módszerek tönkreteszik a sejteket, de ronthatják a fehérje minőségét. Az enzimes módszerek javítják a tisztaságot, de költségesek. A kímélő mosószerek a klasszikus IB-ekhez működnek, nem a nem klasszikusokhoz. A pH szabályozása kulcsfontosságú az oldhatóság szempontjából. Az elektroforézises lerakódás egyszerű, de nem méretezhető biológiailag aktív fehérjék esetében.

Az IB-k szolubilizálása Az IB-k szolubilizálása kulcsfontosságú az aktív fehérjék visszanyeréséhez. Az erős denaturálók károsítják a natív szerkezetet, míg a nem denaturálók nem alkalmasak a klasszikus IB-ekhez. A gyengéd szolubilizátorok feloldhatják az IB-ket, miközben védik a fehérje szerkezetét, de nem minden fehérjét. A jövőbeni munkához jobb algoritmusokra van szükség az oldódást elősegítő szerek kiválasztásához.

Renaturációs stratégiák A fehérje renaturációja létfontosságú a működéshez. Az in vitro renaturáció kihívásokkal néz szembe. A szolubilizátor kiválasztása, a fehérjekoncentráció, a körülmények és a módszerek befolyásolják az eredményt. A gyengéd oldódást elősegítő szerek védik a természetes szerkezetet és javítják a minőséget. A mérsékelt koncentráció és az optimalizált körülmények csökkentik az aggregációt. A monolitikus mátrixú oszlop alapú módszerek nagyobb tisztaságot és hozamot biztosítanak.

A renaturált fehérjék tisztítása A további tisztítás elválasztja a rosszul hajtogatott fehérjéket a megfelelően hajtogatott fehérjéktől. A hagyományos kromatográfia hasonló fehérjékkel küzd. Az alternatív módszerek előnyöket kínálnak, de célfehérje-specifikus szelekciót igényelnek. Továbbra is kihívást jelent egy univerzális tisztítási módszer kidolgozása.

Következtetés

Az IB-k előnyöket kínálnak a rekombináns fehérjetermelésben, de feldolgozási kihívásokat jelentenek. Az IB-ken belüli fehérjeszerkezet-funkció mélyebb megértésével, valamint az elválasztás, szolubilizálás, renaturáció és tisztítás terén elért előrelépésekkel hamarosan elérhető lesz az aktív fehérjék nagy áteresztőképességű visszanyerése. Ez csökkenti a költségeket és felgyorsítja a biogyógyszerészeti kutatást és fejlesztést, ami elősegíti az iparág növekedését.

A Yaohai Bio-Pharma emellett aktívan keres intézményi vagy egyéni globális partnereket, és az iparág legversenyképesebb javadalmazását kínálja. Ha kérdése van, forduljon hozzánk bizalommal: [email protected]

A Yaohai Bio-Pharma további részleteiért kérjük, látogasson el a weboldalra: www.yaohaibio-pharma.com