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Demande d'informationARN circulaires (circRNA) sont une classe d'ARN simple brin, fermés covalentiellement, sans extrémités 5' ou 3'. Cette particularité peut empêcher la dégradation des circRNA par les exonucléases et conférer aux circRNA une grande stabilité et une efficacité de traduction supérieure par rapport aux ARN messagers linéaires.
le circRNA est synthétisé par circulation in vitro à partir d'un précurseur d'ARN linéaire. Les impuretés liées au processus ou au produit peuvent provoquer une réponse immunitaire innée, en particulier les ARN linéaires (précurseurs d'ARN, ARN endommagés, introns excisés). Il est crucial d'éliminer les impuretés d'ARN linéaire et d'obtenir de hauts rendements de circRNA pur pour des applications de recherche in vitro/vivo et thérapeutiques.
Yaohai Bio-Pharma a développé un ensemble de technologies de synthèse de circRNA pour fournir un circRNA hautement pur, impliquant la conception et l'optimisation des séquences, la transcription in vitro (IVT), la circularisation/cyclisation, la purification par chromatographie liquide haute performance préparative (HPLC) et l'encapsulation dans des nanoparticules lipidiques (LNP). Tous les produits sont libérés sous des normes strictes de contrôle qualité (QC).
Livraisons
Produit | CircRNA hautement pur sur mesure |
Méthode de Synthèse | Auto-épissage des introns de groupe I |
Contenu en ARN | 100 µg~10 mg (OD260) |
Longueur | 50~8 000 nucléotides |
Pureté | A260/A280 |
Identification et pureté | Électrophorèse sur gel d'agarose (AGE), Chromatographie lipidique haute performance (HPLC) |
Tampon | Eau sans RNase (liquide) |
Expédition | Expédition avec glace sèche ; ou à température ambiante |
Stockage | Liquide, à ou en dessous de -20°C ; Poudre lyophilisée, à 4°C |
Application | Développement de formulations LNP, essais basés sur des cellules, expériences animales |
Études de cas
Nous avons développé un procédé de purification évolutif utilisant principalement l'HPLC préparative, et préparé de l'ARN circulaire avec une haute pureté (>95 %).
Fig. Purification et analyse de l'ARN circulaire à haute pureté (98 %)