El Proceso de Fabricación y Aplicaciones de Nanocuerpos
Al dirigirse a virus o estructuras específicas, los anticuerpos ingenierizados pueden tratar potencialmente a ciertas poblaciones de alto riesgo. Sin embargo, al igual que los anticuerpos monoclonales, su aplicación generalizada está limitada por los altos costos de producción y su gran tamaño ( típicamente con un peso molecular de 150 kDa).
Luego, se descubrió un nuevo tipo de anticuerpo en los camelidos. Estos "anticuerpos de cadena pesada" carecen de cadenas ligeras y están compuestos por dos dominios constantes, una región de bisagra y una variable de cadena pesada (VHH) conocida como nanocuerpo (Nanobody, Nb). Estos Nbs son pequeños en tamaño (15 kDa), poseen alta especificidad y tienen una larga vida media, lo que los convierte en candidatos ideales para su uso en emergencias como pandemias u brotes.
Proceso de fabricación de Nbs
La biblioteca de Nb se construye inmunizando animales con antígenos objetivo, aislando posteriormente células mononucleares periféricas de los animales y extrayendo el ADN que codifica los dominios variables de los anticuerpos de cadena pesada. Específicamente, se inmunizan animales de la familia de los camélidos con el antígeno objetivo, y se extrae el ADN que codifica los anticuerpos de cadena pesada. Este ADN luego se clona en un vector de visualización de fagos. A través de un proceso de selección de fagos que se unen al proteína objetivo, se enriquecen aquellos que muestran una unión fuerte con Nbs. Este proceso de selección y enriquecimiento se repite varias veces. Finalmente, se secuencia clones individuales para determinar secuencias únicas de Nb.
Una vez determinadas las secuencias, se realiza una optimización adicional mediante técnicas de mutagénesis o maduración de afinidad para mejorar su afinidad de unión o especificidad. Los Nbs resultantes pueden producirse en grandes cantidades a través de sistemas de expresión bacteriana u otras tecnologías recombinantes.
Beneficiándose de más de 10 años de experiencia en CDMO en biológicos microbianos, Yaohai Bio-Pharma apoya el desarrollo y la fabricación de varios Nbs. Yaohai destaca en la selección de diversos hospederos microbianos, incluidas las bacterias, Escherichia Coli y diferentes levaduras para ayudar a los clientes a encontrar el mejor sistema de expresión para los Nbs.
Aplicaciones de los Nbs en la Terapia Antiviral
Dirigidos a Glicoproteínas Virales: Los Nbs específicamente se dirigen a glicoproteínas en la superficie de los virus, como la proteína de pico de SARS-CoV-2, bloqueando eficazmente la entrada y replicación viral. Los estudios preclínicos indican su potencial como terapia contra el SARS-CoV-2.
Prevención de Interacciones Huésped-Virus: Los Nbs se unen a proteínas celulares críticas involucradas en la unión y entrada viral, como la Enzima de Conversión de Angiotensina I-2 (ACE2), previniendo que el virus entre en las células huésped.
Roles Inmunomoduladores: Además de dirigirse a proteínas virales, los Nbs modulan la inmunidad al potenciar la muerte celular mediada por anticuerpos, mejorar las células/moléculas inmunes antivirales, combinarse con otras terapias, inhibir la replicación viral y regular citocinas para prevenir la inflamación y el daño tisular.
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