Plantillas de plásmidos de ARNm: elementos clave y estrategias de diseño

La creación de ARNm para vacunas o terapias comienza con una plantilla de plásmido bien diseñada. Aquí se ofrece una guía rápida de los elementos clave y cómo optimizarlos para lograr el éxito.

El promotor: donde comienza la transcripción

El promotor T7 es la opción más popular para iniciar la síntesis de ARNm. Su secuencia clásica, “TAATACGACTCACTATAGGG”, garantiza una transcripción eficiente. Con el tiempo, los científicos han desarrollado variaciones como las plantillas GG, AG y AT/AU para trabajar con sistemas de capping avanzados, como CleanCap o plataformas de ARN autoamplificado.

Linealización: corte del plásmido para lograr precisión

Para evitar que el plásmido se transcriba sin fin, es necesario cortarlo en un sitio específico. Las enzimas de tipo IIS, como BspQⅠ o BsaⅠ, son perfectas para esta tarea. Cortan el ADN fuera de su secuencia de reconocimiento, sin dejar fragmentos adicionales y preservando la crucial cola de poliA.

El modelo del ARNm: los pilares del éxito

La secuencia de ARNm incluye una tapa 5', regiones no traducidas (UTR), una secuencia codificante (CDS) y una cola de poliA. Así está diseñada cada parte:

• UTR:Estos pueden tomarse prestados de genes naturales altamente expresados ​​(como los de los virus) o diseñarse a medida utilizando algoritmos avanzados para un mejor rendimiento.
• CDS:Los científicos primero diseñan la secuencia de proteínas y luego optimizan el código de ADN para una expresión eficiente.
• Cola de poliA:Un tramo de 100 a 120 adeninas, o una versión segmentada como 30A + Linker + 70A, garantiza que el ARNm se mantenga estable y funcional.

Al dominar estos elementos, los investigadores pueden crear potentes plantillas de ARNm para todo, desde vacunas hasta terapias de vanguardia. ¡El futuro de la medicina comienza aquí!

Yaohai Bio-Pharma es una empresa de plataformas especializada en servicios para sistemas de expresión microbiana. Con una década de experiencia, Yaohai ha desarrollado un conjunto integral de tecnologías que cumplen con las normas GMP para sintetizar ARNm lineal y circular, ofreciendo productos de ARN de alta calidad que abarcan el diseño y la optimización de secuencias, la síntesis de genes, la transcripción in vitro (IVT), la circularización, la purificación de ARN y la encapsulación de LNP.

También estamos buscando activamente socios globales institucionales o individuales. Ofrecemos la compensación más competitiva de la industria. Si tiene alguna pregunta, no dude en contactarnos: Director de [email protected]