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Consultael mRNA se sintetiza por transcripción in vitro (IVT) a partir de un ADN plasmídico linealizado (pDNA). También se forman algunos subproductos durante el procedimiento de IVT, incluyendo ARN doble hilado (dsRNA) identificado como principales desencadenantes de la vía inmunitaria innata. Es crucial eliminar impurezas y obtener altos rendimientos de aRN puro para la investigación de ARN mensajero in vitro/vivo y aplicaciones terapéuticas.
Yaohai Bio-Pharma ha desarrollado un conjunto de tecnologías de síntesis de ARNm para proporcionar aRNm de alta pureza , como el diseño y optimización de secuencias, IVT, purificación, liofilización y encapsulación en nanopartículas lipídicas (LNP). Todos los productos se liberan bajo estrictos estándares de control de calidad. La cromatografía por afinidad (AC), basada en la fuerte y selectiva interacción entre la cola poliA del ARNm con la fase estacionaria oligo dT, es una estrategia eficiente y escalable de purificación de ARNm.
Entregables
Producto |
ARNm Altamente Puro Personalizado |
Longitud | 100~10,000 nucleótidos |
Contenido de ARN | 100 µg~10 mg (OD260) |
Pureza | A260/A280 |
Identificación y pureza |
Electroforesis en Gel de Agarosa (AGE) Electroforesis Capilar (CE) |
Buffer | Agua libre de RNasa (líquida) |
Envío | Envío con hielo seco; o a temperatura ambiente |
Almacenamiento |
● Líquido, a o por debajo de -20°C ● Polvo liofilizado, a 4°C |
Aplicación |
Desarrollo de formulaciones LNP, Ensayos basados en células, Experimentación animal |
Otras opciones personalizables
5' Cap |
● Sin cap ● Cap0, co-cappado ● Cap1, co-cappado ● Cap1, cappado enzimático |
5' UTR/3' UTR |
● Secuencia UTR natural ● Secuencia UTR mutante/ingenierizada |
cola poliA 3' |
● cola de 100A ~120A (recomendada) ● Cola poliA segmentada ● Otra cola personalizada |
Nucleósidos modificados |
● Bases no modificadas, ● Pseudouridina (Ψ), ● N1-Metilpseudouridina (N1Ψ), ● citosina-5-metil (m5C), ● uridina-5-metil (m5U), ● 5-metoxiuridina (5moU), ● 2-tiouridina (s2U), ● 2′-O-metil-U ● Otros |
Estudio de Caso
Desarrollamos un proceso de purificación cromatográfica de múltiples pasos y preparamos mRNA con alta pureza e integridad (>95%).
Fig. Análisis de mRNA con alta pureza (>98%)