Plazmid: Malá kulatá DNA molekula s velkým potenciálem

Plazmidy, malé kruhové DNA molekuly, slouží jako zásadní vektory pro rekombinaci DNA ve výzkumu molekulární biologie a genové terapie. Výnos a kvalita plazmidů jsou klíčové, přičemž poměr nadobalených forem a obsah endotoxinů jsou dvěma důležitými faktory ovlivňujícími kvalitu plazmidů.

Podtypy plazmidů

Plazmidy extrahované z Escherichia coli (E. coli) existují v různých podtypech: nadobalené (SC), otevřené kruhové (OC) a lineární (L) formy (Obrázek 1). Z nich je nejstabilnější a nejefektivnější v transfekci a expresi nadobalená forma plazmidů.

Obrázek 1. Schéma běžných podtypů plazmidů

Při elektroforezi plazmové DNA v agárovém geлу je pořadí rychlosti migrace následující: nadobalená DNA, lineární DNA a otevřená kruhová DNA (Obrázek 2).

Obrázek 2. Vzor migrace elektroforeze v agárovém geлу u různých podtypů plazmidů

Yaohai Bio-Pharma neustále zdokonaluje své procesy a techniky, aby zajistilo, že podíl supercoilů u plazmidů transfekční kvality je ≥85% a u plazmidů výzkumné kvality je ≥50%. Následující je příklad demonstrování (Obrázek 3), kde je kombinována agarásová elektroforeze s programem Gel-Pro Analyzer pro detekci podílu supercoilů.

Obrázek 3. Výsledky kontrolního testu podílu supercoilů plazmidů

Endotoxin

Endotoxiny, součást stěn gramnegativních bakterií, mají jako svou toxickou složku primárně lipopolysacharid A (LPS-A). Během extrakce plazmidů se endotoxiny uvolňují do lyzátu, což vážně ovlivňuje účinnost transfekce plazmidů do buněk. Kromě toho mohou aktivovat nespecifické imunitní reakce v buňkách, což může vést ke falešně pozitivním výsledkům experimentů.

Yaohai Bio-Pharma přijímá přístup "bez přidávání" a "vysoce účinného odebírání", přísně kontroluje použití reagentů a materiálů obsahujících endotoxiny během celého procesu čištění. Společnost také vyvinula efektivní metodu pro odstranění endotoxinů, nabízí tři úrovně obsahu endotoxinů: ≤0,1 EU/µg, ≤0,01 EU/µg a ≤0,005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma disponuje vysokoprůchodnou produkční linkou na extrakci plazmidů, schopnou dodat 1 mg extrahovaných plazmidů v časovém rámci jednoho týdne. Standardně poskytuje více než sedm testů kvality (QC), aby zajistila dodání plazmidů vysoké kvality a standardu z více perspektiv.

Hledáme také aktivně globální partnery, jak institucionální, tak jednotlivce. Nabízíme nejvyšší odškodnění v odvětví. Pokud máte jakékoli otázky, neváhejte nás kontaktovat: [email protected]