Plazmid: Malá kruhová molekula DNA s velkým potenciálem

Plazmidy, malé kruhové molekuly DNA, slouží jako základní vektory pro rekombinaci DNA ve výzkumu molekulární biologie a genové terapii. Výtěžek a kvalita plazmidů jsou rozhodující, přičemž podíl nadšroubovic a obsah endotoxinu jsou dva významné faktory ovlivňující kvalitu plazmidu.

Podtypy plazmidu

Plazmidy extrahované z Escherichia coli (E. coli) existují v různých podtypech: nadšroubovicové (SC), otevřené kruhové (OC) a lineární (L) formy (obrázek 1). Mezi nimi nadšroubovicové plazmidy vykazují vynikající stabilitu, antigenicitu a vysokou účinnost transfekce a exprese.

Obrázek 1. Schematický diagram běžných podtypů plazmidu

Při elektroforéze plazmidové DNA na agarózovém gelu je pořadí rychlosti migrace superspirální DNA, lineární DNA a otevřená kruhová DNA (obrázek 2).

Obrázek 2. Schéma migrace různých podtypů plazmidu elektroforézou na agarózovém gelu

Společnost Yaohai Bio-Pharma neustále zdokonalovala své procesy a techniky, aby zajistila, že nadšroubovicový podíl plazmidů transfekčního stupně je ≥ 85 % a podíl plazmidů výzkumného stupně ≥ 50 %. Následuje případová demonstrace (obrázek 3), kde je elektroforéza na agarózovém gelu kombinována se softwarem Gel-Pro Analyzer k detekci nadšroubovicové části.

Obrázek 3. Výsledky kontroly kvality proporce plazmidové supercoiled

endotoxin

Endotoxin, složka buněčné stěny gramnegativních bakterií, sestává především z lipopolysacharidu A (LPS-A) jako jeho toxické složky. Během extrakce plazmidu se do lyzačního roztoku uvolňuje endotoxin, což vážně ovlivňuje účinnost transfekce plazmidu do buněk. Navíc může aktivovat nespecifické imunitní reakce v buňkách, což vede k falešně pozitivním experimentům.

Yaohai Bio-Pharma používá přístup „nezavedení“ a „vysoké odstranění“, přičemž přísně kontroluje použití činidel a materiálů obsahujících endotoxin během procesu čištění. Společnost také vyvinula účinnou metodu odstraňování endotoxinů, která nabízí tři úrovně obsahu endotoxinů: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg a ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma má vysoce výkonnou servisní linku pro extrakci plazmidů, která je schopna dodat 1 mg extrahovaných plazmidů již za jeden týden. Ve výchozím nastavení poskytuje více než sedm testů kontroly kvality (QC), aby bylo zajištěno dodání vysoce kvalitních, vysoce standardních plazmidů z různých perspektiv.

Aktivně také hledáme institucionální nebo individuální globální partnery. Nabízíme nejkonkurenceschopnější kompenzaci v oboru. Máte-li jakékoli dotazy, neváhejte nás kontaktovat: [email protected]