Усе катэгорыі
Артыкул

Адкрываючы найлепшую дозу RNA адмовальнага eGFP

Nov 22, 2024

У молекулярнай біялогіі і біатэхналогіі, пасіленая зелёная флуоресцэнтная белка (eGFP) стала ключавым репортёрным генам заводзілі таго, што можа вырастаць яркую зелёную флуорэсценцыю ў 509 нм. Гэтая белка, упершыню атрыманая з медузі Aequorea victoria, з'яўляецца маркеры для прастага вылучэння ў культурах сямейных клетак, дапамагаючы ў цягне і аптымізацыі эфектыўнасці трансфэкцыі. Аднак, пазбаўляецца пытанне: якая найlepшaya доза рэпартёрнай RNA eGFP, каб дасягнуць пажаданых ўзроўней экспрезіі?

Даследаванні паказалі, што эфектыўнасць RNA адмітчика eGFP сутыкненая спраўдзяецца ад залежнасці ад яго дозы, у першую чаргу ў кантэкстэ цыркуляванай RNA (circRNA) і сама-пачатковай mRNA (saRNA). Даследаванні, праведзеныя камандай Катрыэн Рэмав у Гентскім універсітэце ў групе даследавання нанамедыцыны, выдзелілі складную вязьму паміж дозай saRNA і яе эфектыўнасцю перакладу ў рэтінальных клетках. Яны атрымалі, што малыя дозы saRNA, памерамі на ўзроўні пад границу актывацыі уладнага имуннага адказу, спрыяюць эфектыўнаму выразу белка. Гэта падкрэсліла значэнне тварога кантролю дозы для выкарыстання ўсёй магчымасці RNA адмітчыка eGFP.

У практычных застосунках звычайнайшыя канцэнтрацыі mRNA eGFP можа ўзмаўляць ад мікраграм (μg) да нанаграм на міклітр (ng/μL). Напрыклад, у эксперыментальных трансфекцыях дозы ад 0.05 μg да 0.5 μg mRNA eGFP паказвалі значныя ўзроўні экспрэсіі ў розных клетачных тыпах, з пазітыўнымі прасентамі клетак, якія дасягаюць 99-100% у пэўных выпадках. Значна, што ў дозах паўнеё 0.1 μg saRNA паказвае лепшую экспрэсію ў супоставленні з лінейнай mRNA, дэманструючы свае самаяўдомое перавагу.

Вератлівасць RNA-рэпартёра eGFP крывіцца не толькі ў яго яркай і стабільнай флуорэсценцыі, але і ў яго адаптацыйнасці да розных eksperymentalnych кампанаванняў. Даследчыкі могуць дакладна настаўляць дозу, каб задавальняць свой спецыфічныя патрабаванні, забяспечваючы дакладнае кантролаванне ўзроўняў гена экспрэсіі. Гэты элемент робіць eGFP незаменнымімінструментам для даследвання функцыі гена, маніторингу клетачнай судьбы і аптымізацыі протакалаў трансфекцыі.

У выніку, оптимальная доза рыбонуклеіна звайца eGFP сцягваецца ад eksperymentalnага kontekstu і пажаданых вынікаў. Выбар правільнай дозы дазволіць навукоўцам выкарыстаць усю магчымасць гэтага вялікапалезнага гена-рэпартара, што спрыяе паглебленню нашага разумеяння молекулярных механізмаў і інавацыям у біатэхналогіі.

Yaohai Bio-Pharma — першая і найбуйнейшая кампанія, якая спецыялізуецца на мікрабіальныя выразныя сістэмы CRDMO ў Вялікай Кітайшчыне. Мы стаям за тым, каб задавольняць клінічныя і камерцыyalныя патрабаванні нашых глабальных кліентаў для біягалічных лікавых сродкаў, vakcyн і дыягностык для чалавека і ветэрынарнага карыстання.

Мы таксама актыўна шукаем глобальныя партнёраў — інстытуцый ці індывідуальных. Мы прапановаем най konkurencyjaснейшую кампенсацыю ў промысле. Калі у вас ёсць якія-небудзь пытанні, калі ласка, не сціліцеся з нами звязацца: [email protected]