Кантроль якасці і застосуванні рекамбінантных белкоў

Кантроль якасці рекамбінатных белкаў ўжытнічае для няперарванасці і аднаўлення эксперыментальных дадзеных. Кожны крок, ад дызайну праекта да працэсу вытвору, патрабуе сувязных стратэгій кантралю якасці.

Стратэгіі кантралю якасці

Прамысловы сектор дастаяўваецца да сцрыглых стандартных аперацыйных працэдаў, у той час як акадэмічная спалочнасць павінна пабуйваць прафесійную ведамасць, каб павялічыць аднаўляемасць дадзеных. Белкі з спецыфічным біялагічным застосаваннем ці біяхімічнымі характарыстыкамі патрабуюць персаналізаваных стратэгій кантралю (QC) якасці.

Выклікавыя прыклады і рашэнні

Yaohai Bio-Pharma мае шырокі досвед у вытвору і чысценні рекамбінатных белкаў, разам з камандай экспертаў, што забяспечвае высокую чыстку вашага белка. Ужывоўшы наш дасвяд з сотняў праектаў, Yaohai ласкава падзяліцца, як аптымізаваць чысценню белка.

Белкі, якія звязваюцься з нуклеінай кіслатаю: Крокі адцягнення нуклеінаў, такія як нуклеазы ці выпадэнцыя PEI, неабходныя. Спін а260нм/а280нм ўяўляецца для выявлення забруджэння нуклеінамі.

Жалудзевы цеп пальчыка мышы для крыйа-ЭМ: Потрэбна аптымізаваць ступені чысценьня, дадаваць нуклеазы, каб зменшыць спін а260нм/а280нм і зацвердзіць чыстата белка.

Хімерны белак Чалавечага dsRBEC: Лізіс клетак выкарыстоўвае буфер, які ўтрымлівае урэю, пасля чаго праводзіцца рэфалдынг на колонцы для атрымання функцыянальна актыўных белкаў.

Белкі, якія звязвайць дваяльныя катыёны: Падчас экспрезіі і чысценьня трэба дадаваць спецыфічныя дваяльныя катыёны і уяўляць шыльнікі.

Жалезна-сарычавыя белкі: Імідазам трэба уяўляць, каб не перарваць [2жл ± 2с] кластар, зацверджваючы правільнае складанне і функцыя белка.

Рашольны фрагмент LLT1: Дызайн мутанта аптымізавае фармаванне двусерных сувязаў і складанне белка, што прыводзіць да стабільных і высокадаходных белкаў.

Крысталізацыя кіназы CLK1: Саадміністрацыя з λ-фосфатазай ўдзельвае фосфаты з месц фосфарыліравання, і выкарыстоўваецца розлучэнне па велічыне (SEC) і аніянаўная хроматаграфія для атрымання аднороднага CLK1 без неаднороднага фосфарыліравання.

Белкі для карыстання як антыгена: Ацэньванне чыстасці неабходна, каб уяшчэраць забраленне высоцана імунагенымі белкамі. Для структурных эпітопных антыбадоў трэба захаваць трохмерную канфігурацыю антыгена.

Белкі, якія склонныя да агрэгацыі: Выкарыстоўваюцца стратэгіі, такія як скранінг розных штамаў і зніжэнне тэмпературы выраскання, каб абмежаваць праблемы агрэгацыі, і разміжваюцца стратэгіі быстрой пурывацыі.

Пасунак эндатоксінаў: Метады, такія як пазітыўная хармачная хроматаграфія і афінітэтная хроматаграфія з полікатыоннымы лігандамі, пасуваюць эндатоксіны, дзеля таго каб узроўень LPS был паміж норамі для карыстання.

Белковыя камплексы: Падразьёлы выражаюцца асобна і збіраюцца in vitro ці спалучана выразжаюцца, каб утвараць функцыянальныя камплексы. Цэліснасць камплекса ацэньваецца па дыягамальнасці і мольнай масе.

Заключэнне

Выработка белка пачынаецца з стратэгічнага праектавання, ўлічаючы біяхімічныя ўласцівасці і застосаванні. Пры выразze, чыстынні і КБ, умовы і метады аптымізуюцца для стаякасці, неагрегацыі і натуральнага стана. Чыстыя белкі карыстаюцца ў розных наступных мэтах, як біяфізічная характарыстыка.

Yaohai Bio-Pharma таксама акtyўна шукае глобальныя партнёраў — інстытуцыі або адзінак — і прапануе найвышчыя ва ўсьцім промысловым секторы выкуп. Калі у вас ёсць якія-небудзь пытанні, калі ласка, не лячас ці свяжыцеся з намі: [email protected]