Кантроль якасці і прымяненне рэкамбінантных бялкоў

Кантроль якасці рэкамбінантных бялкоў мае вырашальнае значэнне для надзейнасці і ўзнаўляльнасці эксперыментальных дадзеных. Кожны крок, ад распрацоўкі праекта да вытворчага працэсу, патрабуе строгіх стратэгій кантролю якасці.

Стратэгіі кантролю якасці

Прамысловы сектар прытрымліваецца строгіх стандартных аперацыйных працэдур, у той час як акадэмічная супольнасць павінна пашыраць прафесійныя веды для паляпшэння ўзнаўляльнасці даных. Вавёркі са спецыфічным біялагічным прымяненнем або біяхімічнымі характарыстыкамі патрабуюць індывідуальных стратэгій кантролю якасці (КК).

Складаныя прыклады і рашэнні

Кампанія Yaohai Bio-Pharma можа пахваліцца вялікім вопытам вытворчасці і ачысткі рэкамбінантнага бялку ў спалучэнні з камандай экспертаў, якія гарантуюць, што ваша вытворчасць бялку будзе завершана з высокай чысцінёй. Выкарыстоўваючы наш вопыт сотняў праектаў, Yaohai ласкава рэзюмуе, як аптымізаваць ачыстку бялку.

Вавёркі, якія звязваюць нуклеінавыя кіслаты: Неабходныя этапы выдалення нуклеінавых кіслот, такія як асаджэнне нуклеазамі або PEI. Суадносіны A260nm/A280nm кантралююцца для выяўлення забруджвання нуклеінавай кіслатой.

Цяжкі ланцуг мышынага ферытыну 1 для крыя-ЭМ: Неабходна аптымізаваць этапы ачысткі і дадаць нуклеазы, каб паменшыць суадносіны A260nm/A280nm і забяспечыць чысціню бялку.

Чалавечы химерный бялок dsRBEC: Для лізісу клетак выкарыстоўваецца буфер, які змяшчае мачавіну, з наступнай рэфолдынгам на калонцы для атрымання функцыянальна актыўных бялкоў.

Вавёркі, якія звязваюць двухвалентныя катыёны: Спецыфічныя двухвалентныя катыёны неабходна дадаваць падчас экспрэсіі і ачысткі, і варта пазбягаць хелатирующих агентаў.

Жалеза-серныя вавёркі: Варта пазбягаць імідазолу, каб прадухіліць разбурэнне кластара [2Fe ± 2S], забяспечваючы правільнае згортванне і функцыю бялку.

Растваральны фрагмент LLT1: Мутантны дызайн аптымізуе адукацыю дысульфідных сувязяў і згортванне бялку, што прыводзіць да стабільных і высокапрадукцыйных бялкоў.

Крышталізацыя кіназы CLK1: Сумесная экспрэсія з λ-фасфатазай выдаляе фасфаты з сайтаў фасфаралявання, а эксклюзійная храматаграфія (SEC) і аніёнаабменная храматаграфія выкарыстоўваюцца для атрымання аднастайнага CLK1 без гетэрагеннага фасфаралявання.

Вавёркі для выкарыстання антыгенаў: Ацэнка чысціні неабходная, каб пазбегнуць заражэння высокаімунагеннымі вавёркамі. Для антыцелаў да структурнага эпітопу павінна захоўвацца трохмерная канфармацыя антыгена.

Вавёркі, схільныя да агрэгацыі: Для абмежавання праблем з агрэгацыяй выкарыстоўваюцца такія стратэгіі, як скрынінг розных штамаў і зніжэнне тэмпературы культывавання, а таксама распрацаваны стратэгіі хуткай ачысткі.

Выдаленне эндатаксінаў: Такія метады, як храматаграфія станоўчага зарада і афінная храматаграфія полікатыённага ліганда, выдаляюць эндатаксіны, гарантуючы, што ўзровень ЛПС ніжэйшы за межы прымянення.

Бялковыя комплексы: Субадзінак экспрэсуюць паасобку і збіраюць in vitro або сумесна экспрэсуюць з адукацыяй функцыянальных комплексаў. Комплексную цэласнасць ацэньваюць па аднастайнасці і малярнай масе.

Conclusion

Вытворчасць бялку пачынаецца са стратэгічнага дызайну, улічваючы біяхімічныя характарыстыкі і прымяненне. Падчас экспрэсіі, ачысткі і кантролю якасці ўмовы і метады аптымізаваны для забеспячэння стабільнасці, адсутнасці агрэгацыі і натыўнага стану. Вычышчаныя вавёркі служаць розным наступным мэтам, напрыклад, для біяфізічных характарыстык.

Yaohai Bio-Pharma таксама актыўна шукае інстытуцыйных або індывідуальных глабальных партнёраў і прапануе найбольш канкурэнтаздольную кампенсацыю ў галіны. Калі ў вас ёсць якія-небудзь пытанні, калі ласка, не саромейцеся звяртацца да нас: [email protected]