Плазміда: невялікая кругавая малекула ДНК з вялікім патэнцыялам

Плазміды, невялікія кругавыя малекулы ДНК, служаць важнымі вектарамі для рэкамбінацыі ДНК у даследаваннях малекулярнай біялогіі і геннай тэрапіі. Выхад і якасць плазмід маюць вырашальнае значэнне, прычым прапорцыя звышспіралі і ўтрыманне эндатаксіну з'яўляюцца двума важнымі фактарамі, якія ўплываюць на якасць плазміды.

Падтыпы плазмид

Плазміды, вынятыя з кішачнай палачкі (E. coli), існуюць у розных падтыпах: суперспиральные (SC), адкрытыя кругавыя (OC) і лінейныя (L) формы (малюнак 1). Сярод іх суперспіралізаваныя плазміды дэманструюць выдатную стабільнасць, антыгеннасць і высокую эфектыўнасць трансфекцыі і экспрэсіі.

Малюнак 1. Схематычная дыяграма распаўсюджаных падтыпаў плазмід

Пры электрафарэзе плазміднай ДНК у агарозным гелі парадак хуткасці міграцыі: суперскручаная ДНК, лінейная ДНК і адкрытая кальцавая ДНК (малюнак 2).

Малюнак 2. Схема міграцыі розных падтыпаў плазмід пры электрафарэзе ў агарозным гелі

Кампанія Yaohai Bio-Pharma пастаянна ўдасканальвала свае працэсы і метады, каб гарантаваць, што доля суперскручаных плазмід класа трансфекцыі складае ≥85%, а доля плазмід даследчага класа - ≥50%. Ніжэй прыводзіцца дэманстрацыя выпадку (малюнак 3), дзе электрафарэз у агарозным гелі спалучаецца з праграмным забеспячэннем Gel-Pro Analyzer для выяўлення суперскручанай долі.

Малюнак 3. Вынікі праверкі якасці суперскручанай прапорцыі плазміды

Эндотоксин

Эндатаксін, кампанент клеткавай сценкі грамотріцательных бактэрый, у асноўным складаецца з ліпапаліцукрыду A (LPS-A) у якасці таксічнага кампанента. Падчас экстракцыі плазміды эндатаксіны вылучаюцца ў раствор для лізісу, што сур'ёзна ўплывае на эфектыўнасць трансфекцыі плазмід у клеткі. Акрамя таго, ён можа актываваць неспецыфічныя імунныя рэакцыі ў клетках, што прыводзіць да ілжывых спрацоўванняў у эксперыментах.

Yaohai Bio-Pharma прытрымліваецца падыходу «без увядзення» і «высокага выдалення», строга кантралюючы выкарыстанне рэагентаў і матэрыялаў, якія змяшчаюць эндатаксіны, на працягу ўсяго працэсу ачысткі. Кампанія таксама распрацавала эфектыўны метад выдалення эндатаксінаў, які прапануе тры ўзроўні ўтрымання эндатаксінаў: ≤0.1 ЕС/мкг, ≤0.01 ЕС/мкг і ≤0.005 ЕС/мкг.

Кампанія Yaohai Bio-Pharma валодае высокапрадукцыйнай службай экстракцыі плазмід, здольнай даставіць 1 мг экстрагаваных плазмід за адзін тыдзень. Па змаўчанні ён забяспечвае больш за сем тэстаў кантролю якасці (QC), каб гарантаваць дастаўку высакаякасных плазмід высокага стандарту з розных пунктаў гледжання.

Мы таксама актыўна шукаем інстытуцыйных або індывідуальных глабальных партнёраў. Мы прапануем найбольш канкурэнтаздольную кампенсацыю ў галіны. Калі ў вас ёсць якія-небудзь пытанні, калі ласка, не саромейцеся звяртацца да нас: [email protected]