Эвалюцыя геннай тэрапіі: новая ДНК і аптымізацыя

У вобласці прымянення ДНК плазмідная ДНК (пДНК) заўсёды карысталася вялікай перавагай дзякуючы сваёй выключнай стабільнасці, лёгкасці вытворчасці, захоўвання і транспарціроўкі. Аднак па меры развіцця навуковых даследаванняў паступова з'явіўся шэраг новых тыпаў ДНК, такіх як ДНК малога кола (mcDNA), ДНК сабачай косткі (dbDNA) і ДНК з закрытым канцом (ceDNA), што адкрывае новыя шляхі для геннай тэрапіі і іншыя перадавыя вобласці.

мкДНК

мкДНК утвараецца ў працэсе рэкамбінацыі бацькоўскіх плазмід з выдаленнем бактэрыяльных элементаў пры захаванні круглай структуры. Працэс яго падрыхтоўкі абапіраецца на спецыфічныя ферментатыўныя дзеянні, такія як інтэграза φC31, што дазваляе дасягнуць больш высокай эфектыўнасці рэкамбінацыі. Характэрнай характарыстыкай mcDNA з'яўляецца адсутнасць бактэрыяльных паслядоўнасцей, што дазваляе ёй абапірацца на невялікія носьбіты ДНК, тым самым паляпшаючы экспрэсію генаў.

dbDNA

dbDNA мае замкнёную двухцепочечную канфармацыю з невялікімі адналанцуговымі завесамі на абодвух канцах і цалкам вольная ад бактэрыяльных паслядоўнасцей і генаў устойлівасці да антыбіётыкаў. Яго меншы памер палягчае дастаўку ў клеткі і ядра, адначасова дэманструючы поўную ўстойлівасць да нуклеазы. Пачатковая форма dbDNA змяшчае толькі неабходныя элементы для экспрэсіі генаў, апускаючы непатрэбныя паслядоўнасці, такім чынам, валодае магутнымі магчымасцямі трансфекцыі генаў і больш высокім узроўнем экспрэсіі бялку.

цэДНК

цеДНК - гэта сканструяваная двухцепочечная лінейная ДНК-канструкцыя з кавалентным замкнёным канцом, якая змяшчае мэтавы ген і іншыя рэгулятарныя элементы экспрэсіі. Яго канцы ўяўляюць сабой інвертаваныя канчатковыя паўторы (ITR), якія забяспечваюць ёмістасць канструкта ў тысячы падстаў, што значна перавышае межы традыцыйных вектараў адэнаасацыяванага віруса (AAV). Структура ITR цеДНК мае вырашальнае значэнне для ўваходжання ў ядро, і яе мадэль экспрэсіі адпавядае неінтэграваным эпісамам. Акрамя таго, працэс падрыхтоўкі ceDNA хуткі і эканамічна эфектыўны, што робіць яго прыдатным для даследаванняў геннай тэрапіі ў такіх галінах, як рэдкія захворванні, вакцыны і анкалогія.

Аптымізацыя ДНК

Што тычыцца аптымізацыі ДНК, даследчыкі ўзмацняюць экспрэсію трансгенных генаў шляхам аптымізацыі ўнутраных кампанентаў плазмидной ДНК. Адначасова замяняюцца селекцыйныя маркеры, напрыклад, замена ампіцыліну на канаміцын, каб паменшыць аутоіммунные рызыкі. Акрамя таго, сістэма адбору цукрозы таксама выкарыстоўваецца для замены традыцыйных маркераў адбору. З пункту гледжання аптымізацыі кадонаў, даследчыкі паляпшаюць узровень экспрэсіі бялку, змяняючы выкарыстанне кадонаў, у той жа час цалкам улічваючы перавагі гаспадара для экспрэсіі геннай паслядоўнасці. У працэсе аптымізацыі даследчыкі таксама павінны звярнуць увагу на зрушэнне кадонаў, стабільнасць другаснай структуры мРНК, пазбяганне трансактыўных элементаў і сайтаў рэстрыкцыйных ферментаў, а таксама баланс утрымання GC.

Падводзячы вынік, распрацоўка новых тыпаў ДНК і аптымізацыя ДНК адкрылі новыя магчымасці і праблемы для такіх галін, як генная тэрапія. Yaohai Bio-Pharma стварыла вытворчыя платформы GMP як для кругавых, так і для лінеарызаваных плазмід. Yaohai таксама можа забяспечыць распрацоўку працэсаў і аптымізацыю розных тыпаў ДНК, уключаючы гэтыя новыя тыпы ДНК, задавальняючы розныя патрэбы кліентаў.

Yaohai Bio-Pharma таксама актыўна шукае інстытуцыйных або індывідуальных глабальных партнёраў і прапануе найбольш канкурэнтаздольную кампенсацыю ў галіны. Калі ў вас ёсць якія-небудзь пытанні, калі ласка, не саромейцеся звяртацца да нас: [email protected]