Рэпарцёрскія метады мадыфікацыі РНК

Пры выбары таго, які метад мадыфікацыі рэпарцёрнай мРНК пераважней, няма канчатковага адказу, паколькі кожны метад і кожны рэпарцёрны ген маюць свае перавагі і прыдатныя сцэнарыі. Вось некаторыя распаўсюджаныя метады мадыфікацыі мРНК і гены-рэпарцёры, а таксама іх характарыстыкі і прыдатнасць.

Метады мадыфікацыі мРНК

Метыляванне:

1. м6А: Звязаны са стабільнасцю мРНК, сплайсінгам, трансляцыяй і працэсінгам мікраРНК. Праблемы выяўлення ўключаюць выбар і лакалізацыю антыцелаў.
2. 5' Cap Nm: Павышае стабільнасць, зрошчванне, поліадэнілаванне і ядзерны экспарт. Дапамагае адрозніць уласную РНК ад чужароднай.
3. Псеўдаурыдыляцыя: Змяняе кодоны, павышае стабільнасць і рэагуе на стрэс. Каталізуецца псеўдаурыдынсінтазамі.

Увядзенне ненатуральных нуклеатыдаў:

1. Уведзены падчас транскрыпцыі з падвойнай стратэгіяй хімічнай мадыфікацыі. Гэта павышае стабільнасць, эфектыўнасць і экспрэсію бялку.

Рэпарцёрскія гены

1. Ген зялёнага флуарэсцэнтнага бялку (GFP): Перавагі: Лёгка выяўляецца, стабільныя флуарэсцэнтныя ўласцівасці, не таксічны для клетак, прыдатны для візуалізацыі жывых клетак. Недахопы: абмежаваная інтэнсіўнасць флуарэсцэнцыі.
2. Палепшаны зялёны флуарэсцэнтны бялок (eGFP): Перавагі: больш чым у 6 разоў ярчэй, чым GFP дзікага тыпу, што робіць яго больш прыдатным у якасці гена-рэпарцёра для вывучэння экспрэсіі генаў, рэгуляцыі, дыферэнцыяцыі клетак, а таксама лакалізацыі і транспарціроўкі бялкоў у арганізмах.
3. Чырвоныя флуоресцентные вавёркі (напрыклад, mCherry): Перавагі: большая даўжыня хвалі ўзбуджэння і выпраменьвання, што прыводзіць да зніжэння фону падчас унутрыклеткавай візуалізацыі, выдатнай яркасці флуарэсцэнцыі і фотастабільнасці, а таксама меншай клеткавай таксічнасці. Недахопы: можа не так часта выкарыстоўвацца, як GFP, у пэўных эксперыментальных умовах.
4. Люцыфераза светлячка: Перавагі: у прысутнасці АТФ, іёнаў магнію і кіслароду ён можа каталізаваць акісленне люцыферыну ў аксілюцыферын, выпраменьваючы біялюмінесцэнцыю. Ён падыходзіць для выкарыстання ў якасці кантролю для вывучэння эфектыўнасці трансляцыі генаў-мішэняў у клетках млекакормячых, жыццяздольнасці клетак і візуалізацыйных аналізаў in vivo.

Conclusion

Пры выбары таго, які метад мадыфікацыі рэпарцёрнай мРНК з'яўляецца пераважным, гэта залежыць ад канкрэтных эксперыментальных мэтаў, фону даследавання і ўмоў эксперыменту. Напрыклад, калі патрабуецца высокая адчувальнасць, eGFP можа быць лепшым выбарам. Калі для памяншэння фонавых перашкод патрабуецца візуалізацыя на больш доўгіх хвалях, чырвоныя флуарэсцэнтныя бялкі, такія як mCherry, могуць быць больш прыдатнымі. Акрамя таго, зыходзячы з канкрэтных патрэб мадыфікацыі мРНК (напрыклад, павышэння стабільнасці, павышэння эфектыўнасці трансляцыі), можна выбраць адпаведны метад мадыфікацыі.

Будучы першым і найбуйнейшым мікробным біялагічным CRDMO ў Вялікім Кітаі, Yaohai Bio-Pharma прапануе скразныя комплексныя індывідуальныя рашэнні або аўтаномныя паслугі, пачынаючы ад сінтэзу РНК, распрацоўкі і канструявання штамаў, распрацоўкі працэсаў вышэй і ніжэй па плыні, да GMP і не. - Вытворчасць лекавых рэчываў на ўзроўні GMP, а таксама паслугі па напаўненні і аздабленні для розных відаў, такіх як мРНК, цырРНК, плазмидная РНК, рэкамбінантныя вавёркі, пептыды, ферменты, аднадаменныя антыцелы і VLP для выкарыстання ў людзях і ветэрынарыі.

Yaohai Bio-Pharma таксама актыўна шукае інстытуцыйных або індывідуальных глабальных партнёраў і прапануе найбольш канкурэнтаздольную кампенсацыю ў галіны. Калі ў вас ёсць якія-небудзь пытанні, калі ласка, не саромейцеся звяртацца да нас: [email protected]