Падтрымка Мэтадаў Модыфікацыі Raportёра RNA

Пры выбарze, якiм спосабам модыфікацыі mRNA адметнікаў вынікае першапланаваным, няма агульнай адказу, колькі кожны спосаб і ген адметніка маюць сваі перавагі і падходящыя сцэнары. Ужо некалькі частых спосабаў модыфікацыі mRNA і адметнікаў гена, разам з іх уласцівасцямі і падзятнасцю.

спосабы модыфікацыі mRNA

Металізацыя:

1. m6A : Сувязана з стаялісцам mRNA, сплайсынгам, транслатацыяй і працэсінгом miRNA. Выклікае вызовы ў выявленні, уключаючы выбар антыбадаў і лакалізацыю.
2. 5' Кап Нм : Павелічвае стаялісцё, сплайсынг, поліадэнавляцыю і ядра вывазу. Дапамагае розлучыць сам-RNA ад чужога RNA.
3. Псеўдуюрыдыляцыя : Змяняе кодоны, павелічвае стаялісцё і адказ на стрэс. Каталізуецца псеўдуюрыдынаты сінтэзатарамі.

Увод не натуральніх нуклеатыдаў:

1. Уведзеныя падчас транскрыпцыі з двайчынай хімічнай модыфікацыяй. Паводле гэтага падходу, павышаецца стабільнасць, эфектыўнасць і экспрэсія белка.

Репартарныя гены

1. Ген зелёнае флуорэсцэнтнага белку (GFP) : Перавагі: Легка выявляецца, стабільныя флуорэсцэнтныя ўласцівасці, няяўдэктыўны для клетак, падыходзіць для абарачвання жывых клетак. Недастаткі: Умежаная інтынсіўнасць флуорэсцэнцыі.
2. Палепшанае зелёнае флуорэсцэнтнае белкі (eGFP) : Перавагі: Болей чым 6 разоў ярчэй за дыкая форму GFP, што робіць яго больш падыходящым як репартарны ген для даследавання экспрэсіі гена, рэгулявання, дыферэнцыяцыі клетак і локалізацыі белка і яго пераносу ў організамах.
3. Чырвоныя флуорэсцэнтныя белкі (напрыклад, mCherry) : Перавагі: Далейшыя вайны ексцытацыі і эмісіі, што прыводзіць да меншай фонавай флуорэсцэнцыі падчас інтраклетковага абразавання, адлюстраванне чырвенай флуорэсцэнцыі і фотастабільнасці, а таксе меншай клеткавай токсічнасці. Недастаткі: Магчыма, не так часта выкарыстоўваецца як GFP у пэўных eksperymentalnych умовах.
4. Люціфераза светлячка : Перавагі: У наяўнасці ATP, іона magnesium і кіслороду, яно можа каталізаваць аksідацыю луціферыну ў аксілyціферын, выдадзенне біолюмінесцэнцы. Яно падыходзіць для выкарыстання як кантроль для даследвання эфектыўнасці трансліяцыі цэлевых генаў у мамаліяных клетках, жыццёспасабнасці клетак і асесах ін-жыво.

Заключэнне

Пры выбаре, які метод модыфікацыі репортёрскага mRNA першапланаваны, гэта залежыць ад спецыфічных eksperymentalных аб'ектаў, даследвальнага фону і eksperymentalных умоваў. Напрыклад, калі патрабуецца вялікая чуласць, eGFP можа быць лепшым выборам. Калі неабходна малюнаванне ў большых хвалах, каб зменшыць фанавую інтэрферынцыю, красныя флуорэсцэнтныя белкі, такія як mCherry, могуць быць больш падыходливыя. Дадаткова, на падставе спецыфічных патрабаванняў да модыфікацыі mRNA (напрыклад, паўнуможэнне стаялі, павелічэнне эфектыўнасці трансліяцыі), можна выбраць адпаведны спосаб модыфікацыі.

Як першая і найбуйнейша CRDMO мікробіяльных біягалікаў у Вялікай Кіна, Yaohai Bio-Pharma працюе ў рэжыме ад края да края, прапануяць персоналізаваныя рашэнні пад ключ ці асобныя сэрвісы, якія ўключаюць сінтэз RNA, інжынерію і канструюванне штамаў, розробку верхняга і ніжняга тэхналагічнага процесу, вытворчасць субстанцыі лекарстваў па стандартзе GMP ці не-GMP, а таксама сэрвісы заливання і закрывання для розных модальнасцей, уключая mRNA, circRNA, плазмідны RNA, рекамбінацыйныя белкі, пептыды, энзымы, адзінковыя дамены антыгенаў і VLP (вірусопадобныя частынкі) для карыстацця ў чалавечых і ветэрантарных цэлях.

Yaohai Bio-Pharma таксама акtyўна шукае глобальныя партнёраў — інстытуцыі або адзінак — і прапануе найвышчыя ва ўсьцім промысловым секторы выкуп. Калі у вас ёсць якія-небудзь пытанні, калі ласка, не лячас ці свяжыцеся з намі: [email protected]