alla kategorier
In vitro-transkription, IVT

In vitro-transkription, IVT

Hem >  IVT RNA  >  Anpassad RNA-syntes  >  Anpassad mRNA-syntes  >  In vitro-transkription, IVT

IVT, In vitro-transkription

När det gäller massproduktion av mRNA är in vitro transkription (IVT) en mer effektiv och mogen metod. IVT-reaktionen antar linjäriserat plasmid-DNA innehållande T7-promotorn som mall, och mRNA syntetiseras med nukleosidtrifosfater (NTP) som substrat i närvaro av T7-RNA-polymeras.

Nukleotidmodifiering är ett genombrott i utforskningen av mRNA, där omodifierade mRNA-molekyler känns igen av intracellulära RNA-sensorer för att aktivera medfödd immunitet. För överväganden av mRNA in vivo-immunogenicitet och translationseffektivitet använder IVT-processen vanligtvis vissa typer av modifierade NTP, och vanliga modifierade nukleotider är pseudouridin (Ψ), N1-metyl-pseudouridin (N1Ψ) och 5-metylcytosin (5mC).

odefinierad

In vitro transkriptionsprocess av mRNA

图片

In vitro transkription (IVT) reaktionsdiagram

Tjänster detaljer
Valfri tjänst
Service detaljer
Leveransperiod (arbetsdag)
In vitro transkription (IVT)
IVT, In vitro transkription 1
Nukleotidmodifikationer (Ψ/N1Ψ/5mC, etc.)
DNA-mallborttagning (DNas I)
IVT-tillståndsoptimering - valfritt
IVT reaktionskomponenters design och optimering 2-5
Våra funktioner
  • Diversifierade nukleotidmodifieringsstrategier

Förbättra mRNA-stabilitet och proteinuttryck in vivo.

  • Rigorös testdesign och optimering

mRNA-fragmentberedning upp till 10 kb kan uppnås.

  • Effektiv transkription

Genom att optimera IVT-reaktionsförhållandena är transkriptionshastigheten upp till 1:200.

  • Stringent kontroll av RNase

Stringent kontroll av RNas genom en experimentell miljö och förbrukningsvaror kan effektivt förhindra nedbrytning av mRNA.

Fallstudie

Det nuvarande IVT-reaktionssystemet är grovt optimerat för syntetiska system med en längd på cirka 100 nt, inte för mRNA av godtycklig längd. Ju längre mRNA-sekvensen är, desto svårare är den att transkribera och desto mer benägen är den för nedbrytning.

För att förbereda skräddarsydda mRNA-sekvenser med en längd på cirka 10 kb har Yaohai Bio-Pharma framgångsrikt preparerat högkvalitativa prover med ett högt transkriptionsförhållande på 1:135 och erhållit 135 μg initialt renade mRNA-produkter efter 1 μg linjäriserad plasmid transkriberades in vitro genom rigorös experimentell design, kontinuerlig optimering av reaktionsbetingelser och strikt kontroll av RNas.

图片

mRNA Identifiera (agarosgelelektrofores)

Få en gratis offert

Kontakta oss