Cirkulärt mRNA (circRNA) har använts i stor utsträckning vid studiet av gen- eller proteinfunktioner. Samtidigt är det populärt i utvecklingen av profylaktiska och terapeutiska biologiska läkemedel, liknande mRNA.
Yaohai Bio-Pharma har etablerat en uppsättning circRNA-syntesteknologier för att tillhandahålla högkvalitativt RNA, såsom sekvensdesign och optimering, in vitro-transkription (IVT), cirkularisering/cyklisering, rening och inkapsling av lipidnanopartiklar (LNP). Alla produkter släpps under de stränga kvalitetskontrollstandarderna (QC).
Jämfört med linjärt mRNA är cirkulärt RNA (circRNA) mer stabil i strukturen och är en viktig hotspot inom aktuell nukleinsyraläkemedelsforskning. Det har ett brett utbud av tillämpningar inom olika områden, oavsett om det är kodande circRNA eller icke-kodande circRNA, inklusive profylaktiska vacciner för infektionssjukdomar, terapeutiska onkologiska vacciner, terapeutiska onkologiska läkemedel, proteinersättningsterapi, regenerativ medicin, cell- och genterapi (CGT) molekylär svamproll och RNA-aptamer.
Behandla | Valfri tjänst | Service detaljer | Leveransperiod (dag) |
circRNA sekvensdesign och optimering | Design och optimering av kodningssekvenser | CDS-kodonoptimering | 1 |
Design och optimering av icke-kodande sekvenser | Intron och Exon Sequence, Homolog Arm and Spacer Design and Optimization | 1-2 | |
Cirkulär plasmidberedning | Gensyntes | Gensyntes (tredje part) | 7-10 |
Plasmidförstärkning | Plasmidförstärkning | 2 | |
Plasmidextraktion | |||
Linjäriserad plasmidberedning | Plasmidlinjärisering och rening | Plasmidlinjärisering | 1 |
Linjärisering DNA-rening | |||
In vitro-transkription och cyklisering | In vitro-transkription och cyklisering | In vitro transkription och cykliseringsreaktioner | 1-2 |
RNase R Digestion | |||
Optimering-valfritt | Reaktionssammansättning, tidsoptimering | 2-5 | |
circRNA-rening | Konventionell reningsmetod | Litiumkloridutfällning | 1 |
Magnetisk pärlorrening | 1 | ||
Mycket ren circRNA-rening | Preparativ högpresterande vätskekromatografi (HPLC) | 1-2 | |
Buffertbyte | ultra~~POS=TRUNC | 1 | |
circRNA lyofilisering | Provfyllning | Fyllning | 2-3 |
Lyofilisering | Förfrysning | ||
Primär torkning (sublimering) | |||
Sekundär torkning (desorption) | |||
circRNA-LNP-inkapsling | LNP-inkapsling | Material och flytande förbehandling | 2 |
Blandning av mikrofluidisk anordning | |||
Buffertbyte | Tangentiell flödesfiltrering | 1 | |
Sterilisera | Filtrering | ||
Kvalitetskontroll av plasmid-DNA | Koncentration/renhet | Ultraviolett (UV) spektrofotometri | 1-2 |
Plasmidkonformation | Agarosgelelektrofores (AGE) | ||
Kapillärelektrofores (CE) - Valfritt | |||
Plasmididentifiering | Restriktionsenzymidentifiering/AGE | ||
Kvalitetskontroll av circRNA | Koncentration/renhet | Ultraviolett (UV) spektrofotometri | - |
Renhet | Agarosgelelektrofores (AGE)/E-Gel | 0.5 | |
HPLC-valfritt | 1 | ||
Kvalitetskontroll av circRNA-LNP | Inkapslingseffektivitet | RiboGreen metod | 1 |
Partikelstorlek | Dynamisk ljusspridning (DLS) | 1 | |
Polydispersitetsindex | Dynamisk ljusspridning (DLS) | 1 | |
Zeta potential | Dynamisk ljusspridning (DLS) | 1 | |
Cellbaserad potensanalys | Celltransfektion | Cellplätering, celltransfektion | 4 |
Målproteindetektering | Fluorescensobservation, Western Blot/ELISA | 1-3 |
Vi transfekterade förstärkt grönt fluorescerande protein circRNA (eGFP circRNA), mCherry circRNA, luciferas circRNA till 293T-celler och detekterade målprotein genom fluorescens, luminiscerande eller färgsignal, western blot (WB), enzymlänkad immunosorbentanalys (ELISA).
Cellbaserade potensanalyser av circRNA-prover av Yaohai Bio-Pharma