Cellbaserade potensanalyser
Betydelsen av mRNA-potensanalys
Med den snabba utvecklingen av mRNA-vacciner och terapeutika behövs en specifik panel av analysmetoder för att testa styrkan (definiera deras biologiska aktivitet), som involverar translationseffektiviteten hos mRNA. Dessa metoder är vanligtvis baserade på celltransfektion och funktionella analyser av målproteinet.
Yaohai Bio-Pharma erbjuder cellbaserade potensanalyser för mRNA-läkemedelssubstanser eller LNP-produkter, inklusive celltransfektion (293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7 celler, etc.) och ELISA eller Western Blotting (WB) analyser.
Regulatoriska krav för potensanalyser
Enligt WHO:s reglerande överväganden, "styrkan för varje parti av det slutliga vaccinet bör bestämmas med hjälp av en lämplig kvantitativ och validerad funktionell metod(er). Potentiella potensanalyser in vitro kan inkludera cellbaserade transfektionssystem eller cellfria analyser." Och USP rekommenderade en "cellbaserad analys" för att testa styrkan av mRNA, dvs uttryck av målproteinet.
Analytisk metod
|
Analys
|
Metoder
|
|
Potensanalyser
|
Cellbaserad transfektion och målprotein identifierar:
293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7 celler, etc.
|
Tillvägagångssätt
Steg 1. Cellbaserad transfektion med mRNA eller mRNA-LNP
Cellerna odlas och transfekteras med mRNA eller mRNA-LNP. I detalj transfekteras mRNA efter att ha blandats med ett transfektionsreagens, medan mRNA-LNP transfekteras direkt in i cellerna. Efter 24-48 timmar, klargör supernatanten som innehåller det uttryckta proteinet genom centrifugering.
Steg 2. Funktionella analyser av målproteinet
Utför ELISA- eller WB-analyser för att bedöma den funktionella bindningen av målproteinerna.
Fallstudie
Cellbaserade potensanalyser av mRNA-prover
Yaohai-BioPharma har utvecklat en cellbaserad potensanalysmetod för mRNA, som involverar cellodling, celltransfektion och proteinfunktionella analyser. Vi transfekterade eGFP-mRNA, mCherry-mRNA, luciferas-mRNA, spikprotein-mRNA till 293T-celler och detekterade målprotein genom fluorescens, luminescerande eller färgad signal, WB, ELISA.
Cellbaserade potensanalyser av mRNA-produkter av Yaohai Bio-Pharma
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NEJ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
