I beredningsprocessen av in vitro transkription (IVT) mRNA, krävs linjäriserat plasmid DNA som transkriptionsmall för IVT med hjälp av T7 RNA polymeras. Plasmid-DNA av hög kvalitet är avgörande för transkription in vitro.
Baserat på tjänsteplattformen för mogna plasmidberedningar kan Yaohai Bio-Pharma erbjuda en linjäriserad plasmid-DNA-beredningstjänst av hög renhet och hög standard för att uppnå effektiv IVT-transkription.
Tjänster detaljer
| Behandla | Valfri tjänst | Service detaljer | Leveransperiod (arbetsdag) |
| Cirkulär plasmidberedning | Gensyntes | Gensyntes (tredje part) | 7-10 |
| Plasmidförstärkning | Plasmidförstärkning | 2 |
| Plasmidextraktion |
| Linjäriserad plasmidberedning | Plasmidlinjärisering och rening | Plasmidlinjärisering | 1 |
| Linjärisering DNA-rening |
| Plasmid DNA kvalitetskontroll | Koncentration renhet | Ultraviolett (UV) spektrofotometri | 1-2 |
| Plasmidkonformation | Agarosgelelektrofores (AGE) |
| Kapillärelektrofores (CE)-valfritt |
| Plasmididentifiering | Restriktionsenzymidentifiering/ AGE |
Våra funktioner
Flexibelt urval av linjäriseringsmetoder
Optimering av DNA-extraktion och reningsmetoder för att uppnå höga återvinningsgrader.
Stringenta processkontrollstandarder, med en superhelical konformationshastighet av plasmidprover för forskning på över 80 %.
Hög standard och högeffektiv plasmidberedning och kvalitetskontrolltjänster för att möta experimentella behov.
Fallstudie
Om man tar Yaohai Bio-Pharma-katalogen mRNA_luciferas-produkt som ett exempel, har transkriptionsmallplasmidprovet (forskningskvalitet) ett superhelixförhållande på mer än 90 %, ett linjäriseringsförhållande nära 100 % och ett efterföljande transkriptionsförhållande upp till 1:200 ( linjäriserad plasmid DNA:mRNA).
Det mRNA_luciferas som erhålls genom framställning av en linjäriserad plasmid som en mall transfekteras in i 293T-celler, och enzym-substratreaktionsaktiviteten utvärderas 24 timmar efter transfektion.
En uppenbar stark luciferasaktivitetssignal kan detekteras, dvs. luciferasproteinet uttrycks effektivt, vilket tyder på att renheten hos transkriptionsmallen helt kan tillfredsställa kravet på högkvalitativt mRNA-beredning.
Supercoiled Plasmid Ratio Assay
Validering av luciferas-mRNA-uttryck in vitro
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NEJ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
