I processen för in vitro transkription (IVT) mRNA krävs linjär plasmid-DNA som transkriptionsmall för IVT med hjälp av T7 RNA-polymeras. Högkvalitativ plasmid-DNA är avgörande för in vitro transkription.
På grund av den mognade plasmidförberedelse-plattformen kan Yaohai Bio-Pharma erbjuda en tjänst för förberedelse av linjär plasmid-DNA av hög renhet och hög standard för att uppnå effektiv IVT-transkription.
Servicedetaljer
| Process |
Valfritt tjänstetillbud |
Tjänstdetaljer |
Leveranstid (arbetsdag) |
| Preparation av cirkulärt plasmid |
Gensyntes |
GeneSyntes (Tredjepart) |
7-10 |
| Plasmidamplifiering |
Plasmidamplifiering |
2 |
| Plasmidextraktion |
| Linjär plasmidförberedelse |
Plasmidlinjärisering och renad |
Plasmidlinjärisering |
1 |
| Linjärisering DNA renadning |
| Kvalitetskontroll av plasmid-DNA |
Koncentration renaad |
Ultraviolett (UV) Spektrofotometri |
1-2 |
| Plasmidkonformation |
Agarosagel Elektrofores (AGE) |
| Kapillärelektrofores (CE) - Valfritt |
| Plasmididentifiering |
Restriktions enzymidentifiering/AGE |
Våra egenskaper
Flexibel val av lineariseringsmetoder
Optimering av DNA-extraherings- och reningsmetoder för att uppnå höga återvinningskvoter.
Strikt processkontrollstandard, med en superhelisk konformationsfrekvens på plasmidprov för forskning på över 80%.
Hög standard och effektiv plasmidtillberedning och kvalitetskontrolltjänster för att uppfylla experimentella behov.
Fallstudie
Med Yaohai Bio-Pharma-katalogens mRNA_luciferase-produkt som exempel har transkriptionstemplatets plasmidprov (forskningsekvalitet) en superhelisk ratio på mer än 90%, en lineariseringsratio nära 100% och en efterföljande transkriptionsratio upp till 1:200 (lineariserat plasmid DNA:mRNA).
MRNA_luciferase som erhålls genom att använda ett lineariserat plasmid som mall transfekteras i 293T-celler, och enzym-substrats reaktionsaktiviteten utvärderas 24 timmar efter transfektionen.
En tydlig stark luciferasaktivitetssignal kan upptäckas, dvs. luciferaseproteinet exprimeras effektivt, vilket indikerar att renheten av transkriptionstemplet fullständigt kan uppfylla kraven för högkvalitativ mRNA-förberedelse.
Analys av superhelisk plasmidratio
Validering av luciferas mRNA-uttryck in vitro
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
