CircRNA-beredning kräver linjärt RNA som prekursormaterial (RNA-prekursor) för cyklisering, där RNA-prekursorn vanligtvis framställs med hjälp av linjäriserat plasmid-DNA som transkriptionsmall och transkriberas in vitro med hjälp av T7 RNA-polymeras.
Högkvalitativt plasmid-DNA är väsentligt för in vitro-transkription (IVT). Baserat på tjänsteplattformen för mogna plasmidberedningar kan Yaohai Bio-Pharma tillhandahålla en hög renhet och standard lineariserad plasmid DNA (pDNA) förberedelsetjänst för att säkerställa integriteten hos IVT-produkter.

Tjänster detaljer
Behandla |
Valfri tjänst |
Service detaljer |
Leveransperiod (arbetsdag) |
Cirkulär plasmidberedning |
Gensyntes |
Gensyntes (tredje part) |
7-10 |
Plasmidförstärkning |
Plasmidförstärkning |
2 |
Plasmidextraktion |
Linjäriserad plasmidberedning |
Plasmidlinjärisering och rening |
Plasmidlinjärisering |
1 |
Linjärisering DNA-rening |
Plasmid DNA kvalitetskontroll |
Koncentration renhet |
Ultraviolett (UV) spektrofotometri |
1-2 |
Plasmidkonformation |
Agarosgelelektrofores (AGE) |
Kapillärelektrofores (CE)-valfritt |
Plasmididentifiering |
Restriktionsenzymidentifiering/ AGE |
Våra funktioner
Flexibelt urval av linjäriseringsmetoder
Optimering av DNA-extraktion och reningsmetoder för att uppnå höga återvinningsgrader.
Stringenta processkontrollstandarder, med en superhelical konformationshastighet av plasmidprover för forskning på över 80 %.
Hög standard och högeffektiv plasmidberedning och kvalitetskontrolltjänster för att möta experimentella behov.
Fallstudie
Om man tar Yaohai Bio-Pharmas produkt mCherry circRNA som ett exempel, är det supercoilade förhållandet av transkriptionsmallplasmidprover (forskningskvalitet) mer än 70 %, med en linjäriseringshastighet på nära 100 %.
mCherry circRNA framställs med linjäriserad plasmid som mall och transfekteras in i 293T-celler. Hög nivå av fluorescensuttryck (röd fluorescens) detekteras efter 24 timmars transfektion, vilket kommer att förstärkas efter 48 timmar, och kan fortfarande detekteras på den 7:e dagen och den 14:e dagen efter transfektion.
mCherry-protein uttrycks stabilt och effektivt, och transkriptionsmallrenheten kan uppfylla kravet på circRNA-läkemedelsprodukt (DP) med hög kvalitet.

In vitro expressionsvalidering av mCherry circRNA