CircRNA-förberedelse kräver linjär RNA som föregångarmaterial (RNA-föregångare) för cikliseringsprocessen, där RNA-föregångaren vanligtvis förbereds med hjälp av linjär plasmid-DNA som transkriptionsmall och transkriberas in vitro med hjälp av T7 RNA-polymeras.
Högkvalitativ plasmid-DNA är avgörande för in vitro-transkription (IVT). På grundval av ett etablerat plattformstjänstsystem för plasmidförberedelse kan Yaohai Bio-Pharma erbjuda en tjänst för högrehetlig och standardlinjär plasmid-DNA (pDNA)-föreberedelse för att säkerställa integriteten hos IVT-produkterna.
Servicedetaljer
| Process |
Valfritt tjänstetillbud |
Tjänstdetaljer |
Leveranstid (arbetsdag) |
| Preparation av cirkulärt plasmid |
Gensyntes |
GeneSyntes (Tredjepart) |
7-10 |
| Plasmidamplifiering |
Plasmidamplifiering |
2 |
| Plasmidextraktion |
| Linjär plasmidförberedelse |
Plasmidlinjärisering och renad |
Plasmidlinjärisering |
1 |
| Linjärisering DNA renadning |
| Kvalitetskontroll av plasmid-DNA |
Koncentration renaad |
Ultraviolett (UV) Spektrofotometri |
1-2 |
| Plasmidkonformation |
Agarosagel Elektrofores (AGE) |
| Kapillärelektrofores (CE) - Valfritt |
| Plasmididentifiering |
Restriktions enzymidentifiering/AGE |
Våra egenskaper
Flexibel val av lineariseringsmetoder
Optimering av DNA-extraherings- och reningsmetoder för att uppnå höga återvinningskvoter.
Strikt processkontrollstandard, med en superhelisk konformationsfrekvens på plasmidprov för forskning på över 80%.
Hög standard och effektiv plasmidtillberedning och kvalitetskontrolltjänster för att uppfylla experimentella behov.
Fallstudie
Med Yaohai Bio-Pharmas produkt mCherry circRNA som exempel, är superkoldelen av transkriptionsplasmidssamplarna (forskningsekvalitet) mer än 70%, med en linjäriseringsgrad nära 100%.
mCherry circRNA förbereds med linjäriserat plasmid som mall och transfekteras till 293T-cellerna. Ett högt uttryck av fluorescens (röd fluorescens) upptäcks efter 24 timmars transfektion, vilket förstärks efter 48 timmar och kan fortfarande upptäckas på sjunde och fjortonde dagen efter transfektionen.
mCherry-proteinet uttrycks stabilt och effektivt, och renheten av transkriptionsmallen kan uppfylla kraven på circRNA-läkemedelsprodukt (DP) av hög kvalitet.
In vitro validering av mCherry circRNA-uttryck
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
