Alla kategorier
ENEN
mRNA Sekvensdesign

mRNA Sekvensdesign

Hemsida >  IVT RNA  >  Anpassad RNA-syntes  >  Anpassad mRNA-syntes  >  mRNA Sekvensdesign

IVT RNA

mRNA Sekvensdesign

Enligt den centrala dogmen är messengerrna (mRNA) bron för överföringen av genetiskt material från DNA till proteiner.

mRNA uppfyller en biologisk funktion genom att koda för proteiner in vivo, och mogna mRNA i eukaryota består av fem komponenter: 5' Cap (toppstruktur), 5' UTR (okodande region), ORF (öppet läsram), 3' UTR och 3' polyA-svans (polyadenylatsvans).

undefined

Servicedetaljer
Process Valfritt tjänstetillbud Tjänstdetaljer Leveranstid (Dag)
design och optimering av mRNA-sekvenser Design och optimering av kodningssekvenser

Justering av CDS-sekvenser

Optimering av CDS-kodon

1
Design och optimering av icke-kodande sekvenser

design och optimering av 5' UTR-sekvens

design och optimering av 3' UTR-sekvens

design och optimering av polyA-sekvens

1-2
Anpassningsbara alternativ
5’ UTR/3’ UTR
  • Naturgemenskaplig UTR-sekvens
  • Mutant/Utvecklad UTR-sekvens
3' PolyA-svans
  • 100A ~120A svans (rekommenderad)
  • Segmenterad polyA-svans
  • Annan anpassad svans
Vanliga strategier för mRNA-sekvensdesign
mRNA-komponenter Biologiska funktioner Optimeringsstrategier
5’ Kap Skydda mRNA från nedbrytning av exonukleaser och verka tillsammans med polyA-svansen vid 3' änden, polyA-bindningsprotein och translationsinitieringsfaktorprotein för att initiera proteintolkning. Den naturliga Cap1-strukturen undviker mönstererkännande receptorer och minskar därmed den naturliga immunesvarsnivån, vilket kan uppnås antingen genom enstegs co-transkriptionell kapning eller tvåstegs enzymatisk kapning [se mRNA enzymatisk kapning och co-transkriptionell kapning för mer information].
5’ UTR 5' UTR kan kännas av ribosomer, reglera tolkningen av mRNA och påverka stabiliteten hos mRNA. Innehåller Kozaksekvenser utan en mycket stabil sekundärstruktur. Naturliga UTR:er från högt exprimerade gener föredras för in vitro transkription (IVT) mRNA, såsom α-globin och β-globin.
CDS Regioner som kodar för protein och kodningssekvenser för antigener, antikroppar eller andra funktionsprotein. Codonoptimering ökar översättningsnivån, med notering att vissa icke-optimala codoner kan spela en roll i proteinfaldning.
3' UTR Reglerar mRNA-översättning och stabilitet. Naturliga UTR:er från högt exprimerade gener föredras för IVT-mRNA, såsom α-globin och β-globin.
3’ polyA-svans Reglerar proteinetablering och skyddar kapstrukturen mot nedbrytning. En tillräcklig längd (100-150 bp) krävs; kodning av polyA-svans på transkriptionsskabelonplasmidet säkerställer en mer definierad polyA-svanslängd.
Våra egenskaper
  • Diversifierad UTR-källval

Flera källor till högt exprimerade naturliga & modifierade UTR-bibliotek; mogen UTR-modifikationsstrategi;

  • Avancerat CDS-optimeringslag

Samverka med ett professionellt AI-algoritmteam för att slutföra optimeringen av kodoner.

  • Jämn polyA-slutledsfördelning

Lägg till polyA-sekvenser enligt DNA-mallar för att kontrollera mRNA-längden mer exakt.

  • Diversifierade optimeringskombinationer

Uppnå effektiv uttryckning av mRNA med låg immunogenitet.

Fallstudie

Sekvensdesign av en dubbelrapportör-mRNA: mCherry-eGFP mRNA

Yaohai Bio-Pharmas mRNA-tjänst fortsätter att uppgraderas med design och optimering av en dubbelrapportörgen tandemsekvens, vilket uppnår samtidig uttryckning av två gener.

Med hjälp av ett konventionellt transfectionsmedel transfekteras den dubbelgen tandemsekvensen mCherry-eGFP mRNA till 293T-cellerna, och två fluorescentsignaler från mCherry (röd) och förstärkt gröna fluorescerande protein (eGFP) upptäcks med samtidig uttryckning efter 48 timmar, och det överlappande diagrammet markeras i gult.

图片

图片

Uttryckning av mCherry-eGFP mRNA i 293T-cell

Få en gratis offert

Get in touch