Grunden för inkapslingen är designen och utvecklingen av leveranssystemet. Ett välutformat leveranssystem låter circRNA-molekyler komma in i kroppen utan att de bryts ner av RNA-enzym och sedan effektivt levereras till målstaden, korsa cellmembranen och släppas ut intracellulärt.
Lipidnanopartiklar (LNPs) är det bästa leveranssystemet som finns tillgängligt, med fördelar i inkapsling, in vivo-uttryck och in vivo-säkerhet jämfört med andra leveranssystem. LNPs med nukleinsyrefragment lättas enkelt in i celler och bildar intracellulära kroppar. När de har trätt in i cellen protoneras och laddas positivt på huvudet av den joniserade lipiderna på grund av den sura miljön i den intracellulära kroppen, därmed fusionerar med den inre membranen på den intracellulära kroppen och släpper ut målnukleinsyran i cellen för verksamhet.
Yaohai Bio-Pharma circRNA-tjänst fortsätter att förbättras och kan erbjuda circRNA-LNP-inkapslingstjänst för att optimera relevanta kritiska processparametrar och förbättra konsekvensen och reproducerbarheten i produktionen av circRNA-läkemedel.
Process | Tjänstdetaljer | Leveranstid (Dag) | Leveranser |
circRNA-LNP Inkapsling | Material och vätskeförebehandling | 2 | circRNA-LNP-drug product (DP) |
Mikrofluidisk enhetsblandning | |||
Tangentiell flödesfiltrering | 1 | ||
Sterrifierande filtration | |||
circRNA-LNP kvalitetskontroll | Encapserings-effektivitet | 1 | Testrapport |
Partikelform och polydisperositetsindex | |||
Zetapotential |
Snabb syntes, hög R&D-effektivitet och förhandsoptimerade lösningar;
Encapsulationsförhållandet kan nå mer än 90%;
Storleken på lipidnanopartiklar kan kontrolleras genom att ändra injektionshastigheten och förhållandet av vätskan;
circRNA-LNP-produkter valideras genom in vitro cellexpression och kan effektivt uttrycka det målprotein som önskas.
LNP-eGFP circRNA-prover förbereds och olika doser av dessa (1ug, 2ug och 4ug) transfekteras direkt till 293T-cellerna för att verifiera om de kan uttrycka det målprotein som önskas. Efter 48 timmars transfektion kan en tydlig fluorescentsignal observeras, och det finns en dos-beroende effekt på fluorescensintensiteten.
Lipo-circ_eGFP, som består av liposom och okapslerad eGFP circRNA, används som kontroll.