Sve kategorije
Priprema proteina bez oznake

Priprema proteina bez oznake

Proteinski tagovi, kao fuzioni partneri koji se koriste u tehnologijama rekombinantne DNK, omogućavaju učinkovitu, jedno-koračnu afinitetnu čišćenje za različite proteine/peptide sa različitim karakteristikama. Nazad ovaj važan prednost, tagovi kao vanjske aminokiseline mogu da promene strukturu proteina i njegove biološke funkcije. Zbog toga su proteini ili peptidi bez oznake (tag-free) više poželjni kako bi se osigurala sigurnost i efikasnost, posebno u biofarmaceutskoj oblasti. Rekombinantnom proteinu sa fuzionim tagom ima ograničene mogućnosti za dobitak odobrenja od medicinskih/farmaceutskih agencija.

Na osnovu platforme za istraživanje i razvoj mikrobioloških biologija, Yaohai Bio-Pharma nudi prilagođene usluge pripreme proteina bez oznake (Tag-free), posvećene ispunjavanju jedinstvenih ciljeva za istraživanje, razvoj i proizvodnju u kliničkoj upotrebi.

Ključne reči: proizvodnja proteina bez oznake, čišćenje proteina bez oznake, priprema proteina na osnovu slobodne oznake, izraz i čišćenje proteina bez oznake, visoko kvalitetni ciljni protein bez oznake

Primena: istraživanje ljudskog lekarenstva, razvoj životinjskih lekova, razvoj rekombinantnih vakcina, proizvodnja rekombinantnih velikomolekularnih bioloških lekova

Nasha mikrobiološka platforma za R&D

Imamo iskustvo u inženjerstvu mikrobioloških štednjaka, fermentaciji i čišćenju proizvoda.

Bakterije: Escherichia coli (E. coli)

Kvasac: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

Prilagođene opcije
Modalitet Rekombinantni Protein
Početni materijali Genetske sekvence, rekombinantni plazmidi ili inženjerski oblikovani štedovi
Isporučivi Očišćavanje: >80%, >85%, >90% Količina: 0.2~10 g (da se odredi prema projektu)
Sistem izražavanja i formiranja

E. coli sekreacija u periplazmu, rastvoriva i inkluzioni tela izražavanja;

Vrste intracelularnog ili sekretnog izražavanja

Metode analize Ultraljubičasto zračenje (UV), asimet od bikinonovne kiseline (BCA), Bradford ili Lowry za količinu
Elektroforeza u poliacrilamidnom gelu sa natrijum dodecilsulfat (SDS-PAGE) za testiranje čišćenja
Opcionalno: Western blot (WB), enzimski imunološki asociran test (ELISA), visoko performantna tečna hromatografija (HPLC)
Ostale nečistote Endotoksin (opcionalno)
Detalji usluge

Usluge

Detalji usluge

Minimalni vremenski plan (radni dan)

Sinteza gene

Optimizacija kodona za određen izrazni domaćin

7~10 dana

Sinteza gene

Konstrukcija plazmida/vektora

Kloniranje u plazmid/vektor

2 dana

Transformacija plazmida

Verifikacija polimeraznom lanacnom reakcijom (PCR), digestija restrikcijskim enzimima, sekvenciranje gene

3 dana

Izraz proteina u E. coli

Transformacija plazmida,

2 dana

Kultiviranje u šeširanoj flaši

3 dana

fermentacija na 7L skali, optimizacija

4 dana / serija

Očišćenje proteina bez tag-a, optimizacija

5~10 dana / serija

Testiranje elektroforezom u gelu od poliacrilamida sa natrijum-dodecilsulfat (SDS-PAGE)

Izraz proteina u kvasinama

Priprema kompetentnih ćelija kvasca

4 dana

Linearnizacija plazmida i elektro-transformacija

fermentacija na 7L skali, optimizacija

5 dana

Očišćenje proteina bez tag-a, optimizacija

7 dana / serija

Ciscenje proteina bez oznake

5~10 dana / serija

Kontrola kvaliteta po SDS-PAGE

Dodatne usluge (opcione)
Dobijte besplatnu ponudu

Get in touch