Profiling N-glikana je ključan za proizvodnju biofarmaceutske. Yaohai Bio-Pharma nudi uslugu profiling-a N-glikana koristeći tekuću hromatografiju-mas spektroskopiju (LC-MS) oslobađenih i označenih glikana. Opšti koraci za pripremu uzorka N-glikana uključuju digestiju glikoproteina (GP), de-glikozilaciju, čišćenje, označavanje/derivaciju i čvrstofaznu ekstrakciju (SPE).
Bili smo angažovani u karakterizaciji strukture proteina različitih velikih molekula, uključujući Rekombinantne Podjedinične Cepice, Nanotijele/VHHs/ Jednodomene Antitijela (sdAbs), Odlomke Antitijela, Hormone/Peptidi, Cytokine, Rastne Faktore (GF), Enzime, Kolagene itd.
Regulativni zahtevi za profilovanje N-glikana
Prema smernici ICH Q6B, „za glikoproteine se određuje sastojak ugljikohidrata (neutralnih šećera, aminoshecera i sijaličnih kiselina). Pored toga, struktura lanaca ugljikohidrata, uzorak oligosaharida (antenski profil) i mesto glikozacije polipeptidskog lanca analiziraju se u mogućem obimu.
Analitička metoda
| Analiza |
Metode |
| Profiling N-glikana |
HPLC-MS analiza oslobodjenih i označenih glikana |
Postupke
1. Enzimatsko oslobađanje glikana Peptide N-Glikozidazom F (PNGase F)
2. Derivacije oslobodjenih glikana 2-aminobenzamidom (2-AB)
3. Čišćenje sakupljenih N-glikana na koloni TSK Amide - 80 ako su prisutne velike količine detergenta, nevolatilnih soli ili materijala sa slobodnim aminogrupama
4. Označavanje fluoroaktivnim 2-aminobenzamidom (2-AB)
5. HPLC-MS analiza označenih N-glikana
6. Уколико је потребно. Анализа података
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
