Deamidacija stranica glutamina i asparagina je uobičajena modifikacija u pogledu uticaja na osobine proteinskih biofarmaceutsaka. Deamidacija može da se dešava i kod resitua glutamina, ali obično u mnogo nižem stepenu. Stopovi deamidacije su utičući od temperature, pH-a, lokalne strukture proteina i okružujućih aminokiselin.
Yaohai BioPharma nudi uslugu testiranja deamidacije aminokiselina, koja vam omogućava detekciju deamidacije aminokiselina pomoću tehnike Likvidne hromatografije-Masne spektroskopije (LC-MS).
Bili smo uključeni u karakterizaciju strukture proteina različitih velikih molekula, uključujući Rekombinantne podjedinične vakcine, Nanotijele/VHHs/Jednodomene antitijela (sdAbs), Odlomke antitijela, Hormone/Peptidi, Cytokine, Rastuće faktore (CF), Enzime, Kolađe, itd.
Regulatorni zahtevi za deamidaciju aminokiselina
Prema smernicama ICH Q6B, deamidirane forme mogu biti otkrivene i karakterisane hromatografskim, elektroforetskim i/ili drugim relevantnim analitičkim metodama.
Analitičke metode
| Analiza |
Metode |
| Deamidacija |
Tecna hromatografija-mas spektrometrija (LC-MS) |
Postupke
npr., deamidacija asparagina
1. Enzimatska degeneracija
2. LC-MS u uslovima visoko performantne tečne hromatografije (HPLC)
3. Analiza podataka
Deamidacija asparagina nastaje putem suksinimidnog intermediata (Suc), koji je osetljiv na racemizaciju i hidrolizu, dajući četiri izomera Asp-a, uključujući L-Asp, L-IzoAsp, D-Asp i D-IzoAsp.
Teorijski, Gln deamidacija bi mogla da generiše četiri odgovarajuća Glu izomera kroz proces sličan deamidaciji Asn.
Visokorezolucijska masa spektroskopija lako identifikuje razliku od 1 Da u masi između peptida koji sadrže Asn/Gln i njihovih odgovarajućih deamidiranih protivnika Asp/Glu.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
