Profilarea N-glicanilor este esențială pentru producerea biofarmaceuticelor. Yaohai Bio-Pharma oferă servicii de profilare N-glicani folosind Cromatografia Lichidă-Culorimetrice-Masă (LC-MS) a glicanelor eliberate și etichetate. Pașii generali pentru pregătirea eșantionului de N-glicani includ digestia proteinelor glicosilate (GP), de-glicosilarea, purificarea, etichetarea/derivatizarea, și Extracția pe Fază Solidă (SPE).
Am fost implicați în Caracterizarea Structurii Proteicilor a diferitelor molecule mari, inclusiv Vacine Recombinante Subunitare, Nanocorpuri/VHHs/ Antibodii Unidomene (sdAbs), Fragmente de Antibodii, Hormoni/Peptide, Citochine, Factori de Creștere (GF), Enzime, Collagene, etc.
Cerințe Reglementare pentru Profilarea N-Glicanilor
Conform indicativelor ICH Q6B, „pentru glicoproteine, se determină conținutul de carbohydrate (zahăruri neutre, zahăruri aminotate și acizi sialici). De asemenea, structura lanțurilor de carbohydrate, modelul de oligosaharide (profil antennar) și locurile de glicosilare ale lanțului polipeptidic sunt analizate în măsura posibilă.
Metodă Analitică
| Analiză |
Metode |
| Profilare N-glican |
Analiza prin Cromatografie Lichidă-Spectrometrie de Masă (LC-MS) a glicanelor eliberate și etichetate |
Proceduri
1. Eliberarea glicanelor enzymatica cu Peptide N-Glicosidaza F (PNGase F)
2. Derivatizarea glicanelor eliberate cu 2-aminobenzamida (2-AB)
3. Purificarea glicanelor N-culegate culese pe o coloană TSK Amide - 80 dacă există cantități mari de detergent, sare nevolatilă sau materiale cu grupuri amino libere
4. Etichetarea cu 2-aminobenzamida (2-AB) fluorescentă
5. Analiza LC-MS a glicanelor N-etichetate
6. Analiza datelor
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
