Legăturile disulfur sunt uneori denumite legături S-S sau poduri disulfur. Podurile disulfur afectează bioactivitatea biologilor, cum ar fi peptidii, proteinele și anticorpolele.
Yaohai Bio-Pharma oferă servicii de analiză a legăturilor disulfur în principal pe baza Cromatografiei Lichide-Maspectrometriei (LC-MS).
Am fost implicați în Caracterizarea Structurii Proteicilor a diferitelor molecule mari, inclusiv Vacine Recombinante Subunitare, Nanocorpuri/VHHs/ Antibodii Unidomene (sdAbs), Fragmente de Antibodii, Hormoni/Peptide, Citochine, Factori de Creștere (GF), Enzime, Collagene, etc.
Exigente Reglementare pentru Legăturile Disulfur
Există numere diferite și formări ale podurilor disulfur în diferite biologice, care trebuie evaluate complet în studiile de caracterizare a proteinelor dacă secvența primară de aminoacizi aprodusului conține aminoacidul cisteină. Acest lucru este de asemenea cerut din documentul reglementar ICH Topic Q6B.
Metode analitice
analiză |
Metode |
Legăturile Disulfurice |
Cromatografie Lichidă-Masă Spectrometrie (LC-MS) după digestie |
Pentru datele necesare evaluării complete a podurilor disulfide și a tiolurilor libere, cercetătorii din Yaohai Bio-pharma efectuează hartițarea peptidică post-digestie cu o protează specifică. Apoi se analizează folosind LC/Electrospray Ionizare Masă Spectrometrie (ES-MS) și/sau LC/ES-MS/MS înainte și după reducere.
Yaohai Bio-pharma poate să efectueze de asemenea testul lui Ellman, care este o parte importantă a evaluării oricărui produs ce conține Cisteină. În cadrul testului lui Ellman, derivatizăm tiolurile folosind (5,5’-ditiobis-[2-nitrobenzoic acid]). Pentru a determina nivelurile de tioli liberi, produsul rezultat este analizat prin spectofotometrie UV la 412nm.