Sinteză personalizată saRNA
MRNA autoamplificativă (saRNA), cunoscută și ca RNA replicon, codifică secvențe mRNA transcripție in vitro (IVT) și gene replicase virale derivate din alphavirus sau flavivirus. Genele replicase virale permit autoamplificarea mRNA-ului, ceea ce duce la o expresie proteinică crescută și o doză minimă necesară de RNA în comparație cu mRNA-uri care nu se amplifică. Un alt aspect este că saRNA este o moleculă relativ mare (mai mult de 14 kb).
Yaohai Bio-Pharma a dezvoltat un set de tehnologii de sinteză mRNA pentru a oferi mRNA-uri care nu se amplifică și mRNA-uri autoamplificative (1000 nt~14000 nt), cum ar fi proiectarea și optimizarea secvențelor, IVT, purificare, liofilizare și incapsulare în nanoparticule lipidice (LNP). Toate produsele sunt eliberate sub standarde stricte de control al calității.
Fig.1 Caracteristici Structurale ale mRNA-urilor IVT: Convenționale, Circulare și Auto-amplificatoare mRNA.
Caracteristici de Secvență ale mRNA-ului Auto-amplificator
RNA-ul auto-amplificator cuprinde patru proteine nestructurale (denumite nsP1, nsP2, nsP3 și nsP4), care sunt derivate din alphavirusuri, virusul venezuelan al encefalitiei echine (VEEV). Printre acestea, nsP1 prezintă două activități enzymice, anume GTase și N7MTase, în timp ce nsP2 deține activitatea RTPase, esențială pentru punerea în cap a mRNA-ului IVT cu scopul de a genera structura Cap 0. De asemenea, nsP2 funcționează ca o protează și helicază, facilitând procesarea complexă a întregului complex nsP. Funcția exactă a nsP3 rămâne încă necunoscută, dar aceasta interacționează cu diferite proteine ale celulei gazdă, contribuind astfel la atenuarea răspunsului antivirus arătat de gazdă.
O zonă de promotor subgenomic (SGP) a unui alphavirus se află înainte de genul de interes (GOI). Elementul SGP facilitează inițializarea transcrierii GOI prin ignorarea citirii secvenței care codifică proteinele virale nsP.
Fig. 2 Sinteza și teste celulare ale saRNA cu eGFP a Platformei RNASci Yaohai Bio-Pharma.
Soluții Personalizate de saRNA
Protocooul de sinteză al saRNA este similar celui al mRNA: Sinteză personalizată mRNA
- Proiectarea Secvenței
- Prepararea șablonului plasmid
- transcrierea in vitro (IVT)
- închidere enzymatică mRNA
- închidere co-transcripțională mRNA
- purificare mRNA
- liofilizare mRNA
- Encapsulare LNP
- Analiză și Testare
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
