Hei der. Har du noen gang undret over hvordan forskere kan klone et RNA? RNA er en spesialmolecule som vi finner i cellene våre, og den gjør mye for å lage proteiner, og disse proteinene er der for at kroppen vår skal kunne gjøre alt det riktige. I denne delen vil vi gå gjennom en mer nysgjerrig protokoll som forskere bruker: In vitro transkript. Og alt det betyr er at forskere tar RNA og lager mye av det i et prøverør (som er de små flaskene laboratorier bruker) så la oss gå inn på hver trinn her.
Etter å ha fullført min foregående innlegg, realiserte jeg at det siste kanskje var litt tørr - kom med på det fuktige laboratoriet; så, for å holde formen nå da du helt sikkert er på toget som lager gøy (siRNA): Hvilke reaktanter og hva vil du trenge for din EF?? For å oppnå dette, trenger vi spesielle proteiner kalte enzym, identiske med Yaohais produkt Recombinant Midkine Produksjon . Det katalyserer kjemiske reaksjoner, disse enzymene hjelper i nedbrytingen. Så nå trenger vi bare et stykke DNA. Denne funksjonen er det DNA vi bruker som mal for å kopiere til vårt RNA. Ytterlegere reguleringsekvenser i RNA, nemlig nukleotider, er også nødvendige. Disse nukleotidene er som små byggeklosser som må samles for å lage RNA. Vi bruker også korte rør med liten diameter for å knekte smaksevalueringen inn i andre. Til slutt trenger vi en maskin (en termosyklus) som sørger for at reaksjonene våre er på riktig temperatur. I tillegg kan vi kanskje trenge noen verktøy og produkter for bestemte eksperimenter.
Her skiller ting seg, vi har en RNA-strand og nå ønsker vi å ha flere kopier av den, også Produksjon av konjugerte VLP-vaksiner utviklet av Yaohai. Måten å oppnå dette på er å bruke en annen enzym; T7 RNA polymerase. Den unike enzymet, for eksempel, gjenkjenner spesifikke områder innenfor RNA-en. Et hopp-kontroll for å lage mange flere kopier av RNA i det følgende. På dette tidspunktet vil det legges til flere på RNA-stranden av T7 RNA polymerase inntil en masse transkript har blitt laget, eller inntil vi sier ifra.
Etter at vi har isolert RNA så mye som mulig, rull litt lenger ned for å se hvordan du renser opp og lagrer RNA for fremtidig bruk. Rhoades: Noen av disse metodene er litt mer ekstreme når det gjelder å isolere RNA - du ville ikke alltid bruke det, men noen ganger for visse typer eksperimenter er det nødvendig. Når RNA vårt er fritt fra alle forurensetninger, kan det lagres fryset. På denne måten er det trygt, og vi kan deretter bruke det senere i de ulike eksperimentene.
Kvalitet på startmateriale: sørg for at din DNA-mal er ren og ikke alt for ødelagt. Du kan også tilføye frisk rekonstituert nukleotider og nylig oppþavlede enzymer for å maksimere sannsynligheten for et vellykket eksperiment.
Finjustering av betingelser Alle enzymer og deres nukleotider fungerer bedre ved en spesifikk temperatur og pH innvendig i kroppen din, samt Yaohais. Rød Fluoreserende mRNA . Nå juster litt mellom betingelsene helt til du finner nøkkelen for ditt unike oppsett.
Omvendt transkriptase er et usøvanlig enzym, da det lager en DNA-kopi fra en RNA-molekyl. Vi brukte både DNAs og en DNA-mal (den cDNA-en) som inndata for vår in vitro-transkriptmetode for å generere RNA. Imidlertid vil de fleste vitenskapsmenn i de fleste eksperimenter ønske å transkribere DNA til RNA. Omvendt transkripsjon er derfor hvor den får sitt navn fra. test av MRNA poly-A fordeling laget av Yaohai. Det er et uerstattelig verktøy over hele vitenskapen - fra å studere RNA-molekyler inne i celler til å produsere komplementære DNA-strander for videre eksperimenter.
Ekte eksperimenter hvor RNA er ett av de mest brukte molekylære verktøyene, sammen med Yaohais produkt VLP Vaksineproduksjon i E. coli kvantitative analyser: Disse testene kan avsløre mengden av ethvert spesifikt molekyl som er til stede i et prøveeksempel. For eksempel, kan vitenskapsmenn syntetisere en in vitro transkriptforberedelse av RNA-kopier derivert fra et målrettede gener innenfor en celle. Diagnostikken kan deretter analysere disse kopiene, og hvis de leter etter RNA, kan diagnostikken kjøre en polymerasekjedereaksjon (PCR) for å forsterke disse kopiene i et prøveeksempel. Dette gjør det mulig for vitenskapsmenn å se hvordan gener uttrykkes på celler, og tillater selv noen ekstremt høydekkende analyser, som tilstedeværelsen av en bakteriell eller virusbasert infeksjon, og diagnostisere arvlig betingelser.
in vitro Transcript Protocol er en fremtrædende CDMO inden for mikrobielle biologiske produkter. Vores fokus har vært på mikrobproduced vacciner og terapeutika, der er egnet til menneskelig, veterinær og hundehelsestilstand. Vi har de mest avanserede RD-platforme og produksjons teknologi som dekker hele prosessen fra utvikling av mikroorganisme strenger og cellebanking, til prosess- og metodeutvikling, til kommersiell og klinisk produksjon som sikrer vellykket leveranse av innovative løsninger. Over tid har vi akkumulert veldig mye kunnskap om mikrobebasert bio behandling. Over 200 prosjekter har blitt vellykket fullført, og vi hjelper våre kunder å oppfylle regelverk som dem fra US FDA og EU EMA. Vi hjelper dem også å navigere Australia TGA og China NMPA. Vår profesjonelle ekspertise og omfattende erfaring lar oss raskt reagere på markedets krav og levere tilpassede CDMO tjenester.
Yaohai Bio-Pharma har erfaring med produksjon av biologiske stoffer laget fra in vitro Transcript Protocol. Vi tilbyr tilpassede RD- og produsjonsløsninger samtidig som vi sørger for at det ikke er noen risikoer. Vi har vært involvert i ulike modaliteter som subenhevaksiner, rekombinante peptider, hormoner, sitokiner, vekstfaktorer, enkelt-domeneantikroppsyner, enzym, plasmid DNA MRNA, og mye mer. Vi er spesialister i mange mikroorganismer, herunder gjenferming ekstracellulær og intracellulær (oppgivelser opp til 15g/L) samt bakteriell intracellulær løselig og inklusjonslegeme (oppgivelser så høye som 10g/L). Vi har også utviklet en BSL-2 fermentasjonsplattform for å lage bakterielle vaksiner. Vi fokuserer på å forbedre prosesser, øke produktutbytte og redusere produsjonskostnader. Ved å bruke et sterkt teknologiteam kan vi sikre raske og pålitelige prosjektleveranser som får produktet ditt raskere på markedet.
Yaohai Bio-Pharma, en av de ti største produsentene av biologiske produkter, spesialiserer seg på mikrobiell ferming. Vi har bygget et moderne anlegg med sterke RD-muligheter og avansert utstyr. Vi har fem stoffproduserte linjer som oppfyller GMP-kravene for mikrobiell ferming og renasjon. Vi har også to automatiserte fylle-linjer for karuseller, flasker og prefylte sprøytekker. Fermingskalaen varierer fra in vitro Transcript Protocol til 2000L. Spesifikasjonene for fylling av en flaske går fra 1ml opp til 25ml. Prefylte sprøytekker eller karusellfyllingsspesifikasjoner går fra omtrent 1-3ml. Vårt cGMP-godkjente produksjonsanlegg sikrer konstant leveranse av kliniske prøver samt kommersielle varer. Vår fabrikk produserer store molekyler som leveres over hele verden.
Yaohai BioPharma er en av de ti førende mikrobielle CDMO-ene som inkluderer in vitro Transkriptprotokoll og reguleringssaker. Vi har et kvalitetsstyringssystem som er i overensstemmelse med gjeldende GMP-standarder og globale regler. Vår gruppe med eksperter innen regulering er dyktige i globale reguleringssammenhenger for å akselerere biologiske lanseringer. Vi sikrer sporbar produksjonsprosess, kvalitetsprodukter og at vi holder oss til reglene fra US FDA og EU EMA. Australia TGA og Kina NMPA er også tilfreds. Yaohai BioPharma har vellykket passert plasskontrollen av Den europeiske unionens Kvalifiserte Person (QP) for vårt GMP-kvalitetsystem og vår produksjonsanlegg. Videre har vi bestått de første sertifiseringsauditten av ISO9001 Kvalitetsstyringssystem, ISO14001 Miljøstyringssystem og ISO45001 Arbeidshelsesikkerhetssystem.