Hei der. Har du noen gang lurt på hvordan forskere kan klone et RNA? RNA er dette spesielle molekylet som vi finner i cellene våre som gjør en haug med ting for å lage proteiner, og proteinene er der slik at kroppen vår kan gjøre alle de riktige tingene. I denne delen vil vi gå igjennom den langt mer nysgjerrige protokollen som brukes av forskere: In vitro-transkripsjon. Og alt som betyr er at forskere tar RNA og lager mye av det i et reagensrør (som er denne lille krukken som laboratoriene bruker), så la gå inn på hvert trinn her.
Etter å ha fullført mitt forrige innlegg, skjønte jeg at det siste kan ha vært et lite tørt-kom bli med-moro-i-våt-lab-innlegg; så, i tråd med form nå som du er godt og virkelig på det morsomme (sic RNA-making) toget: Hvilke reagenser andc trenger for din EF?? For å oppnå dette vil vi kreve spesielle proteiner kalt enzymer, identiske med Yaohais produkt Rekombinant Midkine Manufacturing. Det katalyserer de kjemiske reaksjonene, disse enzymene hjelper til med nedbrytningen. Så nå trenger vi bare vår bit av DNA. Denne funksjonen er DNA som vi bruker som en mal for å kopiere over for vårt RNA. Ytterligere regulatoriske sekvenser i RNA, nemlig nukleotider, er også nødvendig. Disse nukleotidene er som små byggesteiner som må settes sammen for å lage RNA. Vi bruker også korte rør med liten diameter for å kne inn smaksevalueringen til andre. Til slutt trenger vi en maskin (en termosykler) som sørger for at reaksjonene våre har riktig temperatur. I tillegg kan det hende vi trenger noen få verktøy og produkter for enkelte eksperimenter.
Så her skiller ting seg, vi har én RNA-streng og nå liker vi å ha flere kopier av den, også Produksjon av konjugat VLP-vaksiner utviklet av Yaohai. Måten å oppnå å bruke et annet enzym; T7 RNA polymerase. Dette unike enzymet gjenkjenner for eksempel spesifikke områder i RNA. en hoppekjegle for å lage mange flere kopier av RNA i prosessen. På dette tidspunktet vil mer bli lagt til RNA-strengen av T7 RNA-polymerasen inntil en masse av transkripsjon har blitt opprettet, eller til vi ber den stoppe.
Etter at vi har isolert RNA så mye som mulig, bla lenger ned for å se hvordan du kan rydde opp, og lagre RNA for fremtidig bruk. Rhoades: Noen av disse metodene er litt mer på den ekstreme siden når det gjelder å isolere RNA - du vil ikke alltid bruke det, men noen ganger for visse typer eksperimenter er det nødvendig. Når vårt RNA er fri for forurensninger, kan det lagres frosset. På denne måten er dette sikkert og vi kan bruke det senere i de ulike eksperimentene.
Kvaliteten på utgangsmaterialet: sørg for at DNA-malen din er ren og ikke helt oppbrent. Du kan også supplere med nyrekonstituerte nukleotider og nylig tinte enzymer for å maksimere sjansene for et vellykket eksperiment.
Finjusterende forhold Alle enzymer og deres nukleotider fungerer bedre ved en spesifikk temperatur og pH inne i kroppen din, så vel som Yaohai's Rødt fluorescerende mRNA. Juster nå nyansen litt mellom forholdene til du kommer dit nøkkelen er for ditt unike oppsett.
Revers transkriptase er et uvanlig enzym, da det lager en DNA-kopi fra et RNA-molekyl. Vi brukte både DN-er og en DNA-mal (cDNA) som input for vår in vitro-transkripsjonsmetode for å generere RNA. Imidlertid vil forskere i de fleste eksperimenter ønske å transkribere DNA til RNA. Omvendt transkripsjon er der den får navnet sitt på samme måte som mRNA poly-A distribusjonstesting laget av Yaohai. Det er et uvurderlig verktøy på tvers av vitenskap - Fra å studere RNA-molekyler inne i celler til å produsere komplementære DNA-tråder for videre eksperimenter.
Eksperimenter fra det virkelige liv der RNA er et av de mest brukte molekylære verktøyene, sammen med Yaohais produkt VLP-vaksineproduksjon i E. coli. Kvantitative analyser: Disse testene kan avsløre mengden av et hvilket som helst spesifikt molekyl som er tilstede i en prøve. For eksempel kan forskere syntetisere et in vitro-transkriptpreparat av RNA-kopier avledet fra et målrettet gen som befinner seg i en celle. Diagnostikken kan deretter analysere for disse kopiene, i tilfelle de er. på jakt etter RNA, kan diagnostikken kjøre en polymerasekjedereaksjon (PCR) for å forsterke disse kopiene i et par. Dette gjør det mulig for forskere å se hvordan gener uttrykkes på celler, og muliggjør til og med noen ekstremt høykapasitetsanalyser, for eksempel tilstedeværelsen av en bakteriell eller viral infeksjon, og diagnostisere genetiske lidelser.
in vitro Transcript Protocol er en ledende CDMO innen mikrobiologisk biologi. Vårt fokus har vært på mikrobiell-produserte vaksiner og terapeutika som er egnet for helsebehandling for mennesker, veterinær og kjæledyr. Vi har de mest banebrytende RD-plattformene og produksjonsteknologien som dekker hele prosedyren som begynner med utviklingen av mikrobielle stammer og cellebanking, til prosess- og metodeutvikling, til kommersiell og klinisk produksjon som sikrer vellykket levering av innovative løsninger. Over tid har vi akkumulert enorm kunnskap om mikrobiell-basert bioprosessering. Over 200 prosjekter har blitt fullført, og vi hjelper våre kunder med å overholde forskrifter som de fra US FDA og EU EMA. Vi hjelper dem også med å navigere i Australia TGA og Kina NMPA. Vår profesjonelle ekspertise og omfattende erfaring gjør at vi raskt kan svare på markedskrav og tilby skreddersydde CDMO-tjenester.
Yaohai Bio-Pharma har erfaring med produksjon av biologiske stoffer laget fra in vitro transcript Protocol. Vi tilbyr tilpassede RD og produksjonsløsninger samtidig som vi sørger for at det ikke er noen risiko. Vi har vært involvert i ulike modaliteter som rekombinante underenhetsvaksiner, peptidhormoner, cytokiner, vekstfaktorer, enkeltdomene antistoffenzymer, plasmid DNA MRNA og mange flere. Vi er spesialist på mange mikroorganismer, inkludert ekstracellulær og intracellulær sekresjon av gjær (gir opp til 15g/L) samt bakterier intracellulært oppløselig og inklusjonskropp (gir så høyt som 10g/L). Vi har også laget en BSL-2-fermenteringsplattform for å lage bakterievaksiner. Vi fokuserer på å forbedre prosesser, øke produktutbyttet og redusere produksjonskostnadene. Ved å bruke et sterkt teknologiteam kan vi sikre rask og pålitelig prosjektleveranse som vil bringe produktet ditt raskere ut på markedet.
Yaohai Bio-Pharma, en topp 10 produsent av biologiske produkter, spesialiserer seg på mikrobiell gjæring. Vi har bygget et moderne anlegg med robuste RD-egenskaper og avansert utstyr. Vi har fem produksjonslinjer for legemiddelstoff som samsvarer med GMP-kravene for mikrobiell gjæring og rensing. Vi har også to automatiske fyllingslinjer for patroner, hetteglass og ferdigfylte sprøyter. Fermenteringsskalaene som er tilgjengelige for bruk varierer fra in vitro Transcript Protocol til 2000L. Spesifikasjonene for fylling av et hetteglass varierer fra 1 ml til 25 ml. Fyllingsspesifikasjonene for ferdigfylt sprøyte eller patron varierer fra ca. 1-3 ml. Vårt cGMP-kompatible produksjonsanlegg sikrer konstant tilførsel av kliniske prøver så vel som kommersielle varer. Vårt anlegg produserer store molekyler som sendes til kloden.
Yaohai BioPharma er en topp 10 mikrobiell CDMO som inkluderer in vitro transcript Protocol samt regulatoriske forhold. Vi har et kvalitetsstyringssystem som er i tråd med gjeldende GMP-standarder samt globale forskrifter. Vårt team av regulatoriske eksperter er dyktige i globale regulatoriske rammeverk for å akselerere biologiske lanseringer. Vi sikrer sporbare produksjonsprosesser kvalitetsprodukter, samt overholdelse av reglene til US FDA og EU EMA. Australia TGA og Kina NMPA er også fornøyd. Yaohai BioPharma har bestått tilsynet på stedet til EUs kvalifiserte person (QP) for vårt GMP-kvalitetssystem så vel som vårt produksjonsanlegg. Videre har vi godkjent de første sertifiseringsrevisjonene av ISO9001 Quality Management System, ISO14001 Environmental Management System og ISO45001 Occupational Health and Safety Management System.