Circular RNR arba cirRNR yra specifinė RNR rūšis, kuri turi skirtingą formą. Nors normali RNR turi linijinę tiesią išvaizdą, cirRNR yra kilpinė. CircRNAs - tipas, kurio struktūra yra labai svarbi, nes paprastai pasirodo, kad jų yra daug ir jie dalyvauja daugelyje svarbių ląstelių procesų. Viena vertus, jie reguliuoja mūsų genų išraišką, o tai gali turėti įtakos viskam – nuo mūsų kūno augimo modelių iki mūsų reakcijos į ligas. CircRNAs labai domina mokslininkus; geresnis jų supratimas gali atskleisti, kaip vystosi ligos, ir nustatyti naujus gydymo metodus. Tačiau yra problema: cirRNR yra labai mažos ir mokslininkų tiriamuose mėginiuose paprastai būna labai mažais kiekiais. Dėl to sunku surinkti pakankamai cirkRNR tyrimams.
Prieš sukuriant galutinį cirRNR rinkimo pagrindą, buvo naudojamas nusistovėjęs metodas, vadinamas didelio efektyvumo skysčių chromatografija arba trumpai HPLC. HPLC yra universalus metodas, naudojamas atskirti įvairias molekules pagal jų fizines ir chemines savybes. Jis veikia atskirdamas molekules pagal dydį ir formą. Kadangi cirRNR yra labai mažos, jas galima lengvai prarasti tarp tūkstančių kitų mėginyje esančių molekulių. Tai reiškia, kad cirRNR galima atskirti nuo kitų RNR, baltymų ir egzogeninių šiukšlių, kurios galėjo būti įtrauktos į mėginį, naudojant veiksmingus metodus, tokius kaip dydžio išskyrimo chromatografija (SEC), HPLC technika. Tai svarbus atskyrimas mokslininkams, kuriems reikia išskirti cirkRNR savo tyrimams.
Kai HPLC padeda išvalyti cirRNR, mokslininkai turi ją kruopščiai išanalizuoti, kad suprastų jos funkcijas mumyse. CircRNR pasirodė kaip svarbios molekulės, dalyvaujančios daugelyje biologinių funkcijų, todėl nuodugniai suprantami įvairūs cirkRNR tipai ir vaidmenys, būtini norint iššifruoti jų dalyvavimą įvairiose ligose. Mokslininkai nežino išgrynintos cirRNR sekos ir turės, kad atrastų šių vaidmenų funkcijas. Tam jie naudoja tokius metodus kaip atvirkštinės transkripcijos PGR (RT-PGR). Naudodami RT-PGR, mokslininkai daro papildomas cirRNR kopijas, kad galėtų konkrečiau ją ištirti. Jie dažnai yra informatyvūs ir suteikia informacijos apie tai, kaip šios molekulės veikia ir ką jos veikia mūsų ląstelėse, analizuojant cirRNR sekas.
Tyrėjai turi susigrąžinti visą cirRNR, kurią jie gali gauti. Biologiniuose mėginiuose CircRNR yra tik nedideliais kiekiais, o HPLC gali būti naudingas norint atskirti ir surinkti didesnį šių kritinių molekulių kiekį. Taigi mokslininkai turi didesnę tikimybę gauti pakankamai cirRNR savo eksperimentams ir gauti veiksmingų išvadų. Kuo daugiau cirRNR jie gali surinkti, tuo daugiau funkcijų ir vaidmenų jie gali sužinoti apie sveikatą ir ligas.
CirRNR ekstrahavimo iš sudėtingų biologinių medžiagų metodai dažnai yra brangūs (pvz., ultrafiltravimas), varginantys ir linkę į užteršimą. Norint gauti cirRNR neprarandant, dažnai reikia kruopštaus tvarkymo ir kelių veiksmų. Čia HPLC yra tikrai naudinga. HPLC metodai gali pagreitinti ir efektyvinti ekstrahavimo procesą. Sumažinus ekstrahavimo etapus, HPLC taip pat sumažina galimą vertingų mėginių praradimą. Šis kruopštus metodas sukuria patikimesnius duomenis ir padeda užtikrinti, kad izoliuota cirRNR būtų kuo grynesnė.
CircRNR yra labai sunku ištirti, todėl mokslininkai turi būti ypač tikslūs nustatydami ir išmatuodami. Remiantis šiuo veiksniu, HPLC yra ne tik pagrindinis žingsnis pašalinant kitus teršalus, bet ir garantuoja, kad galima išskirti tik cirRNR molekules, pagerinant cirkRNR aptikimo specifiškumą ir jautrumą. Taip gaunamas švaresnis mėginys, kuris yra svarbus tyrimo tikslumui. Turėdami išgrynintą cirRNR pavyzdį, mokslininkai gali labiau pasitikėti savo rezultatais ir turėti mažiau galimybių daryti klaidų studijose.
„Yaohai Bio-Pharma“ yra 10 geriausių biologinių įmonių, kurios specializacija yra HPLC pagrįstas cirkRNR valymas. Mes pastatėme modernią gamybos įmonę su tvirtomis RD galimybėmis ir moderniomis gamybos priemonėmis. Lengvai prieinamos penkios vaistinių medžiagų gamybos linijos, atitinkančios GMP mikrobinės fermentacijos ir gryninimo standartus, taip pat dvi buteliukų ir užtaisų užpildymo ir galutinės linijos bei iš anksto užpildytos adatos. Galimos fermentacijos skalės svyruoja nuo 100L iki 2000L. Pripildymo tūris svyruoja nuo 1 ml iki 25 ml. Iš anksto užpildytuose švirkštuose arba užtaisuose yra 3–3.5 ml. Mūsų gamybos cechas, atitinkantis cGMP, užtikrina nuolatinį klinikinių mėginių ir komercinių produktų tiekimą. Mūsų įmonė gamina dideles molekules, kurios eksportuojamos į visą pasaulį.
„Yaohai Bio-Pharma“, HPLC pagrįsto mikrobų biologinių medžiagų cirRNR valymo lyderė, yra Jiangsu mieste. Mes orientuojamės į mikrobų gaminamus vaistus ir vakcinas, kurios yra tinkamos žmonių, veterinarijos ir naminių gyvūnėlių sveikatos priežiūrai. Turime modernias RD ir gamybos technologijų platformas, apimančias visą procesą – nuo inžinerinių mikrobų padermių, ląstelių bankininkystės, procesų ir metodų kūrimo iki komercinės ir klinikinės gamybos, todėl galime užtikrinti sėkmingą pažangiausių sprendimų tiekimą. Įgijome didelę patirtį mikrobų biologinio apdorojimo srityje. Sėkmingai įgyvendinta daugiau nei 200 projektų ir mes padedame savo klientams įveikti tokius reglamentus kaip JAV FDA ir ES EMA. Mes taip pat padedame jiems su Australijos TGA ir Kinijos NMPA. Dėl savo patirties ir kompetencijos galime greitai reaguoti į rinkos reikalavimus ir pasiūlyti pritaikytas CDMO paslaugas.
„Yaohai Bio-Pharma“ yra HPLC pagrindu sukurtas cirRNR valymas iš mikrobų gautų biologinių medžiagų. Siūlome individualius RD ir gamybos sprendimus, sumažindami riziką. Mes dalyvavome daugelyje būdų, tokių kaip rekombinantinės subvienetinės vakcinos, peptidiniai hormonai, citokinų augimo faktoriai, vieno domeno antikūnai, fermentai, plazmidinė DNR, mRNR ir kt. Esame ekspertai kelių mikrobų šeimininkų, tokių kaip mielių tarpląstelinės ir intracelulinės (išeiga iki 15 gramų litre) bakterijų periplazminės sekrecijos, taip pat tirpių tarpląstelinių inkliuzinių kūnų (išeiga iki 10 gramų/l) ekspertai. Be to, sukūrėme BSL-2 mikrobų fermentacijos platformą, skirtą bakterinėms vakcinoms kurti. Turime patirties tobulindami gamybos procesus, taip didindami derlių ir mažindami išlaidas. Su labai efektyvia technologijų komanda garantuojame greitą ir patikimą projektų pristatymą ir greičiau pateikiame jūsų produktus į rinką.
Yaohai BioPharma, 10 geriausių mikrobų CDMO, kuris integruoja kokybės valdymą ir reguliavimo reikalus. Mūsų kokybės sistema, atitinkanti dabartinius GMP standartus ir tarptautinius reglamentus. Mūsų reguliavimo ekspertų komanda išmano pasaulines reguliavimo sistemas, kad paspartintų biologinį paleidimą. Užtikriname atsekamas gamybos procedūras kokybiškus gaminius, taip pat HPLC pagrindu veikiančio cirRNR valymo ir ES EMA reikalavimus. Taip pat atitinka Australijos TGA ir Kinijos NMPA. Yaohai BioPharma sėkmingai išlaikė asmeninį auditą, kurį atliko kvalifikuotas Europos Sąjungos asmuo (QP), kad patikrintų mūsų GMP sistemą ir gamybos įrenginį. Taip pat atlikome pirminius ISO9001 kokybės vadybos sistemos ir ISO14001 aplinkosaugos vadybos sistemos sertifikavimo auditus.