Firefly luciferazės (F-Luc) mRNR išreiškia luciferazės baltymą, iš pradžių išskirtą iš ugniagesio Photinus pyralis. Šis baltymas skleidžia bioliuminescenciją esant substratui – luciferinui.
Firefly luciferazės mRNR dažniausiai naudojama kaip teigiama kontrolė mRNR transfekcijai ir pristatymo sistemos kūrimui. Firefly luciferazė taip pat gali būti naudojama žinduolių ląstelių kultūroje genų ekspresijai ir ląstelių gyvybingumui matuoti.
Yaohai Bio-Pharma siūlo nemodifikuotą arba N1Ψ modifikuotą Firefly luciferazės mRNR, su Cap1 struktūra, optimizuotais kodonais, sukonstruotu UTR ir 110nt polyA uodega, siekiant pagerinti mRNR stabilumą ir vertimo efektyvumą.
Produktas
Firefly luciferazės mRNR, Cap1, poli(A) uodega, nemodifikuota arba modifikuota mRNR
Produkto Aprašymas
| Produktas |
Firefly luciferazės mRNR |
| Katė. Ne |
mP003 |
| RNR turinys |
100 µg ~ 10 mg (OD260) |
| Tyrumas |
A260 / A280 |
| Identifikuoti ir grynumas |
Agarozės gelio elektroforezė (AGE) |
| 5'Cap |
1 skyrius |
| 3' poli(A) uodega |
110±5 nt |
| Pagrindo modifikacija |
Nemodifikuotas, N1Ψ |
| Buferio |
Vanduo be RNazės (skystas) |
| Pristatymas |
Laivas su sausu ledu; arba žemesnėje nei aplinkos temperatūroje |
| saugojimas |
Skystas, -20°C arba žemesnėje temperatūroje; Liofilizuoti milteliai, 4°C temperatūroje |
| taikymas |
Reporterio genai, teigiama kontrolė |
Kitos tinkinamos parinktys
| 5' Cap |
● Neuždengtas
● Cap0, kartu su dangteliu
● Cap1, kartu su dangteliu
● Cap1, fermentinis dangtelis
|
| 5' UTR/3' UTR |
● Gamtos UTR seka
● Mutantinė / inžinierinė UTR seka
|
| 3' PolyA Tail |
● 100A ~ 120A uodega (rekomenduojama)
● Segmentuota poliA uodega
● Kita pritaikyta uodega
|
| Modifikuoti nukleozidai |
● Nepakeistos bazės,
● pseudouridinas (Ψ),
● N1-metilseudouridinas (N1Ψ),
● 5-metilcitozinas (m5C),
● 5-metiluridinas (m5U),
● 5-metoksiuridinas (5 mln. TV),
● 2-tiouridinas (s2U),
● 2′-O-metil-U
● kiti
|
mRNR paruošimas ir ląstelių ekspresija
Linijinės plazmidės DNR (pDNR) ėmimas F-Luc mRNR koduojančius genus kaip IVT šabloną, mes gavome grynus F-Luc mRNR transkriptus bendrai transkripcijos dangteliu ir gryninimu su cap1 struktūra ir N1Ψ modifikacija.
Gryna F-Luc mRNR (1 μg), sumaišyta su komerciniu transfekcijos reagentu, buvo transfekuota į 293T ląsteles 96 šulinėlių plokštelėje. O luciferazės tyrimas buvo atliktas po 24 valandų.
Firefly luciferazės mRNR ekspresija 293T ląstelėse
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NE
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
