mCherry mRNR ekspresuoja fluorescencinį baltymą mCherry, iš pradžių gautą iš DsRed, baltymo, esančio Discosoma sp. mCherry baltymas rodo monomerinį fluoroforą, kai jį veikia šviesa, kurio emisijos pikas yra 610 nm. Ši mRNR dažniausiai naudojama kaip teigiama transfekcijos ir pristatymo sistemos kūrimo kontrolė.
eGFP mRNR išreiškia sustiprintą žalią fluorescencinį baltymą (eGFP), iš pradžių gautą iš medūzos Aequorea victoria. eGFP baltymas rodo ryškiai žalią fluorescenciją, kai jį veikia šviesa nuo mėlynos iki ultravioletinės spinduliuotės diapazone, o emisijos pikas yra 509 nm. eGFP mRNR dažniausiai naudojama kaip teigiama kontrolė kuriant transfekciją ir pristatymo sistemą.
mCherry-eGFP mRNR kartu išreiškia abu mCherry ir eGFP.
Yaohai Bio-Pharma siūlo nemodifikuotą arba N1Ψ modifikuotą mCherry-eGFP mRNR, su Cap1 struktūra, optimizuotais kodonais, sukonstruotu UTR ir 110nt polyA uodega, siekiant pagerinti mRNR stabilumą ir vertimo efektyvumą.
Produktas
mCherry-eGFP mRNR, Cap1, poli(A) uodega, nemodifikuota arba modifikuota mRNR
Produkto Aprašymas
| Produktas |
mCherry-eGFP mRNR
|
| Katė. Ne |
mP004 |
| RNR turinys |
100 µg ~ 10 mg (OD260) |
| Tyrumas |
A260 / A280 |
| Identifikuoti ir grynumas |
Agarozės gelio elektroforezė (AGE) |
| 5'Cap |
1 skyrius |
| 3' poli(A) uodega |
110±5 nt |
| Pagrindo modifikacija |
Nemodifikuotas, N1Ψ |
| Buferio |
Vanduo be Rnazės (skystas) |
| Pristatymas |
Laivas su sausu ledu; arba žemesnėje nei aplinkos temperatūroje |
| saugojimas |
Skystas, -20°C arba žemesnėje temperatūroje; Liofilizuoti milteliai, 4°C temperatūroje
|
| taikymas |
Reporterio genai, teigiama kontrolė |
Kitos tinkinamos parinktys
| 5' Cap |
● Neuždengtas
● Cap0, kartu su dangteliu
● Cap1, kartu su dangteliu
● Cap1, fermentinis dangtelis
|
| 5' UTR/3' UTR |
● Gamtos UTR seka
● Mutantinė / inžinierinė UTR seka
|
| 3' PolyA Tail |
● 100A ~ 120A uodega (rekomenduojama)
● Segmentuota poliA uodega
● Kita pritaikyta uodega
|
| Modifikuoti nukleozidai |
● Nepakeistos bazės,
● pseudouridinas (Ψ),
● N1-metilseudouridinas (N1Ψ),
● 5-metilcitozinas (m5C),
● 5-metiluridinas (m5U),
● 5-metoksiuridinas (5 mln. TV),
● 2-tiouridinas (s2U),
● 2′-O-metil-U
● kiti
|
mRNR paruošimas ir ląstelių ekspresija
Linijinės plazmidės DNR (pDNR) ėmimas mCherry-eGFP mRNR koduojant genus kaip IVT šabloną, mes gavome grynus mCherry-eGFP mRNR nuorašus bendrai transkripcijos dangteliu ir gryninimu su cap1 struktūra ir N1Ψ modifikacija.
Gryna mCherry-eGFP mRNR (1 μg), sumaišyta su komerciniu transfekcijos reagentu, buvo transfekuota į 293T ląsteles 96 šulinėlių plokštelėje. O fluorescencinė fotografija buvo atlikta po 48 valandų.
mCherry-eGFP mRNR ekspresija 293T ląstelėse
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NE
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
