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Sintesi di circRNA altamente pura

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RNA circolari (circRNA) sono una classe di RNA a filamento singolo, chiusi covalentemente, senza estremità 5' o 3'. Questa caratteristica unica può prevenire la degradazione del circRNA da parte delle esonucleasi e conferire al circRNA un'elevata stabilità ed efficienza di traduzione rispetto all'mRNA lineare.

Il circRNA è sintetizzato mediante circolazione in vitro da un precursore lineare di RNA. Le impurità legate al processo o al prodotto possono portare a una risposta immunitaria innata, in particolare gli RNA lineari (precursori dell'RNA, RNA intaccato, introni asportati). È fondamentale rimuovere le impurità dell'RNA lineare e ottenere rese elevate di circRNA puro per la ricerca in vitro/vivo e le applicazioni terapeutiche.

Yaohai Bio-Pharma ha creato una serie di tecnologie di sintesi del circRNA per fornire circRNA altamente puro, che prevede la progettazione e l'ottimizzazione della sequenza, la trascrizione in vitro (IVT), la circolarizzazione/ciclizzazione, la cromatografia liquida ad alte prestazioni preparativa per la purificazione (HPLC) e le nanoparticelle lipidiche ( incapsulamento LNP). Tutti i prodotti vengono rilasciati secondo rigorosi standard di controllo qualità (QC).

Risultati finali

Prodotto CircRNA altamente puro personalizzato
Metodo di sintesi Auto-giunzione degli introni del gruppo I
Contenuto dell'RNA 100 µg~10 mg (OD260)
Lunghezza 50~8,000 nucleotidi
Purezza A260 / A280
Identificazione e purezza Elettroforesi su gel di agarosio (AGE), cromatografia lipidica ad alte prestazioni (HPLC)
Buffer Acqua priva di RNasi (liquida)
Spedizione Spedire con ghiaccio secco; o a temperatura ambiente
Archiviazione Liquido, pari o inferiore a -20°C; Polvere liofilizzata, a 4°C
Applicazioni Sviluppo di formulazioni LNP, saggi cellulari, esperimenti su animali

Portfolio

Abbiamo sviluppato un processo di purificazione scalabile utilizzando principalmente HPLC preparativa e preparato circRNA con elevata purezza (> 95%).

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Fig. Purificazione e analisi del circRNA con elevata purezza (98%)

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