Miglioramento dell'mRNA del reporter eGFP con modifiche dei nucleotidi

Nella frontiera avanzata della biologia sintetica, le modifiche nucleotidiche sono emerse come un potente strumento per migliorare le prestazioni degli mRNA reporter, come quelli che codificano la proteina fluorescente verde potenziata (eGFP). Queste modifiche non solo migliorano la stabilità dell'mRNA, ma aumentano anche l'efficienza della traduzione, amplificando così il segnale reporter.

Incorporando nucleotidi modificati, come pseudouridina e 5-metossicarbonil metiluridina, nella sequenza di mRNA del reporter eGFP, i ricercatori possono estendere significativamente la sua emivita all'interno delle cellule. Queste alterazioni chimiche imitano le modifiche naturali dell'RNA, riducendo la risposta immunitaria innescata dall'RNA estraneo e consentendo un'espressione più duratura dell'eGFP.

Inoltre, le modifiche dei nucleotidi possono ottimizzare la velocità di traduzione degli mRNA reporter eGFP. Regolando il contesto della sequenza e i tipi di nucleotidi modificati, i ricercatori possono ottimizzare il flusso dei ribosomi, assicurando una sintesi proteica più fluida ed efficiente.

In conclusione, le modifiche nucleotidiche sono un progresso fondamentale negli mRNA sintetici, in particolare per i sistemi reporter eGFP. Offrono un mezzo per rafforzare la stabilità dell'mRNA, migliorare l'efficienza della traduzione e, in ultima analisi, amplificare il segnale reporter, rendendoli indispensabili per studi precisi e affidabili sull'espressione genica.

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