Potenziamento del mRNA del reporter eGFP con modifiche dei nucleotidi

Nel campo in espansione della biologia sintetica, le modifiche dei nucleotidi si sono rivelate uno strumento potente per migliorare le prestazioni degli mRNA reporter, come quelli che codificano la proteina fluorescente verde betterata (eGFP). Queste modifiche non solo migliorano la stabilità dell'mRNA, ma aumentano anche l'efficienza della traduzione, amplificando così il segnale reporter.

Incorporando nucleotidi modificati, come la pseudouridina e l'uridina 5-metossicarbossimetilica, nella sequenza dell'mRNA reporter eGFP, i ricercatori possono significativamente prolungarne il mezzo-vita all'interno delle cellule. Queste alterazioni chimiche mimano le modifiche naturali dell'RNA, riducendo la risposta immunitaria indotta dall'RNA estraneo e consentendo un'espressione di eGFP più duratura.

Inoltre, le modifiche dei nucleotidi possono regolare con precisione il tasso di traduzione degli mRNA reporter eGFP. Regolando il contesto della sequenza e i tipi di nucleotidi modificati, i ricercatori possono ottimizzare il flusso del ribosoma, garantendo una sintesi proteica più fluida ed efficiente.

In conclusione, le modifiche dei nucleotidi rappresentano un avanzamento fondamentale nei mRNA sintetici, in particolare per i sistemi di segnalazione eGFP. Offrono un modo per rafforzare la stabilità del mRNA, migliorare l'efficienza della traduzione e, infine, amplificare il segnale del reporter, rendendoli indispensabili per studi accurati e affidabili di espressione genica.

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