Ma a Yaohai annyira izgalmas, hogy megosztja a hosszú RNS in vitro átírási protokollját. Ez egy hatékony stratégia, amelyet a tudósok gyakran alkalmaznak az RNS laboratóriumi előállítására. Ily módon a kutatók jelentős számú hosszú RNS-t tudnak előállítani, ami lényeges a különböző biológiai területeken végzett vizsgálatokhoz. Itt lépésről lépésre nyújtunk útmutatót a hosszú RNS-ek in vitro transzkripcióval történő előállításához. Arról is fogunk beszélni, hogyan tudnánk jobbá tenni a folyamatot, és megkíséreljük kezelni azokat a problémákat, amelyekkel a hosszú RNS szintézise során szembesülünk.
Az in vitro transzkripcióhoz számos lényeges komponens szükséges, különösen a hosszú RNS. Biztosítania kell egy RNS-polimeráz nevű enzimet, íróanyagot nukleotid-trifoszfátok (NTP-k) formájában, egy puffert a reakció elősegítésére és néhány DNS-sablont. Lépésről lépésre, részletes útmutatót itt talál:
Számos tényező nagyon fontos az RNS szintézisének megfelelő működéséhez. Leginkább a pufferben lévő magnéziumionok mennyisége a fontos. Az RNS-polimeráznak jelentős mennyiségű magnéziumra van szüksége a DNS-templáttal való megfelelő kölcsönhatás támogatásához, és az RNS ezt követő hajtogatásához. Egy másik fontos szempont, amelyet figyelembe kell venni, a DNS-templát koncentrációja. Pontosabban, elegendő templát DNS-reakcióval kell rendelkeznie ahhoz, hogy jó RNS-hozamot kapjon.
A hosszú RNS-nek természetesen megvannak a maga problémái. Ezek a problémák az RNS lebomlásához kapcsolódhatnak, befolyásolhatják az RNS redősödését, és olyan struktúrákat, amelyek potenciálisan zavarják az RNS szintézisét. E kihívások kezelésének egyik módja a használt puffer módosítása. Az RNS átfogóbb szerkezete érdekében a kutatók különféle speciális vegyszereket, például DTT-t és p-merkaptoetanolt adhatnak hozzá, hogy segítsenek az RNS-nek megfelelően hajtogatni, és megakadályozzák annak összetapadását vagy csomósodását.
Ezenkívül nem minden hosszú RNS-típus egyforma, és néhány esetben alternatív szintézismódszerekre lehet szükség. Vannak speciális funkciók, amelyeket a kutatóknak szükségük lehet hozzáadni az RNS-hez, ilyen például az 5-sapkás vagy a Poly-A-farok hozzáadása. Ha erre szükség van (amint azt később kifejtjük), a kutatóknak más enzimeket is be kell vonniuk, mint például a guanilil-transzferázt és a poli(A)polimerázt. Ezenkívül ki kell választani egy megfelelő RNS-polimeráz enzimet, amely természetesen lehetővé teszi, hogy több RNS-t termeljenek. Amint a hosszú RNS-t szintetizálni kell, meg kell határoznunk a legjobb állapotot.
Hosszú RNS-ek in vitro átírása A hosszú RNS in vitro átírási protokollnak számos kulcsfontosságú felhasználása van számos kutatási, vizsgálati és terápiás törekvés során. Segít a tudósoknak megérteni az RNS szerkezetét, működését, és hogyan módosíthatják a géneket a kortárs technológiákkal. Még inkább más nap – a különféle betegségek és gyógymódjaik felfedezése, mint például a nagyon modern RNS-terápiák –, higgyük el, mennyire hasznos lehet ez a beolvasási technológia az orvostudomány számára.
Ennek a protokollnak számos előnye van. Az elektroforézisen alapuló módszer általában a leghatékonyabb és legköltséghatékonyabb módja nagy mennyiségű hosszú RNS előállításának. Az RNS minősége mellett a jó hozam is fontos tényező a kutatók számára, hogy segítsék őket a kutatásban, különösen akkor, ha nagy mennyiségű RNS-re van szükségük a kísérletekhez a kezdetben nagy mennyiségű bemeneti anyag miatt. Ezenkívül a hosszú RNS in vitro transzkripciója jellemzően pontosabb és reprodukálhatóbb, mint az RNS kémiai szintézise vagy celluláris szintézise.
A Yaohai BioPharma a 10 legjobb mikrobiális CDMO, amely magában foglalja a hosszú RNS in vitro átírási protokollját, valamint a szabályozási ügyeket. Olyan minőségirányítási rendszerünk van, amely megfelel a jelenlegi GMP-szabványoknak és a globális előírásoknak. Szabályozási szakértőinkből álló csapatunk jártas a globális szabályozási keretrendszerekben, hogy felgyorsítsa a biológiai bevezetéseket. Nyomon követhető gyártási folyamatokat biztosítunk minőségi termékekről, valamint az USA FDA és EU EMA előírásainak betartásáról. Az ausztrál TGA és a kínai NMPA is elégedett. A Yaohai BioPharma sikeresen teljesítette az Európai Unió által minősített személy (QP) helyszíni auditját a GMP minőségbiztosítási rendszerünkre és a gyártóüzemünkre vonatkozóan. Ezen túlmenően elvégeztük az ISO9001 minőségirányítási rendszer, az ISO14001 környezetirányítási rendszer és az ISO45001 munkahelyi egészség- és biztonságirányítási rendszer első tanúsító auditjait.
A Yaohai Bio-Pharma, a biológiai termékek 10 legjobb gyártója, a mikrobiális fermentáció specialistája. Létrehoztunk egy fejlett létesítményt, amely modern berendezésekkel és erős RD gyártási képességekkel van felszerelve. Öt gyógyszergyártó sorunk van, amelyek megfelelnek a mikrobiális fermentáció és tisztítás GMP-követelményeinek, valamint két automatizált töltő-befejező sorunk van a patronok, fiolák, valamint előretöltött fecskendők számára. A rendelkezésre álló fermentációs méretek 100 litertől 500 literig, 1000 literig és 2000 literig terjednek. Az In vitro Transcript Protocol for Long RNA for vias 1–25 ml, míg az előretöltött fecskendők és patronok töltési specifikációi 1–3 ml-re vonatkoznak. Gyártóműhelyünk cGMP-kompatibilis, és garantálja a klinikai minták, valamint a kereskedelmi cikkek folyamatos ellátását. Üzemünk nagy molekulákat állít elő, amelyeket a világra szállítanak.
A Yaohai Bio-Pharma tapasztalattal rendelkezik mikroorganizmusokból előállított biológiai anyagok gyártásában. Testre szabott RD megoldásokat, valamint gyártási szolgáltatásokat kínálunk, miközben minimalizáljuk a lehetséges kockázatokat. Különféle technikákkal dolgoztunk, például rekombináns sejtalegységekkel, vakcinákkal (beleértve a peptideket), növekedési faktorokkal, hormonokkal és a hosszú RNS In vitro transzkriptum protokolljával. Számos mikroorganizmus specialistája vagyunk, mint például az élesztő extracelluláris és intracelluláris szekréciója (15 g/l hozam) és a baktériumok intracellulárisan oldódó és zárványteste (termék 10 g/l). Kifejlesztettünk egy BSL-2 fermentációs platformot is bakteriális vakcinák létrehozására. Eddigi tapasztalataink vannak a termelési folyamatok javításában, ezáltal növelve a hozamot és csökkentve a költségeket. Rendkívül hatékony technológiai csapatunk van, amely biztosítja a projektek időben történő és minőségi teljesítését. Ez segít abban, hogy az Ön egyedi termékeit gyorsabban piacra vigyük.
A Yaohai Bio-Pharma vezető szerepet tölt be a hosszú RNS CDMO in vitro átírási protokolljában. Fő célunk a mikrobiális oltások és terápiák előállítása volt a háziállatok, valamint az emberi és állategészségügy kezelésére. Korszerű RD és gyártástechnológiai platformokkal rendelkezünk, amelyek lefedik a teljes gyártási folyamatot a mikrobatörzsek tervezésétől a sejtbanki feldolgozáson és módszertervezésen át a klinikai és kereskedelmi gyártásig, biztosítva ezzel a legfejlettebb megoldások sikeres szállítását. Hatalmas mennyiségű tudást halmoztunk fel a biofeldolgozás mikrobiális területén. Több mint 200 projekt zárult le sikeresen, és segítünk ügyfeleinknek megfelelni az olyan előírásoknak, mint az amerikai FDA és az EU EMA előírásai. Segítünk nekik navigálni az Australia TGA-ban és a kínai NMPA-ban is. Tapasztalatunknak és szakértelmünknek köszönhetően gyorsan tudunk reagálni a piaci igényekre, és testreszabott CDMO szolgáltatásokat kínálunk.