Plásmido: una pequeña molécula de ADN circular con un gran potencial

Los plásmidos, pequeñas moléculas circulares de ADN, sirven como vectores esenciales para la recombinación del ADN en la investigación de biología molecular y la terapia génica. El rendimiento y la calidad de los plásmidos son cruciales, siendo la proporción de superenrollamiento y el contenido de endotoxinas dos factores significativos que afectan la calidad del plásmido.

Subtipos de plásmidos

Los plásmidos extraídos de Escherichia coli (E. coli) existen en varios subtipos: superenrollados (SC), circulares abiertos (OC) y lineales (L) (Figura 1). Entre ellos, los plásmidos superenrollados exhiben excelente estabilidad, antigenicidad y alta eficiencia de transfección y expresión.

Figura 1. Diagrama esquemático de los subtipos de plásmidos comunes

En la electroforesis en gel de agarosa del ADN plasmídico, el orden de velocidad de migración es ADN superenrollado, ADN lineal y ADN circular abierto (Figura 2).

Figura 2. Patrón de migración de diferentes subtipos de plásmidos mediante electroforesis en gel de agarosa

Yaohai Bio-Pharma ha mejorado continuamente sus procesos y técnicas para garantizar que la proporción de plásmidos superenrollados de grado de transfección sea ≥85% y la de plásmidos de grado de investigación sea ≥50%. A continuación, se muestra un caso de demostración (Figura 3), donde la electroforesis en gel de agarosa se combina con el software Gel-Pro Analyzer para detectar la proporción de plásmidos superenrollados.

Figura 3. Resultados de la inspección de calidad de la proporción de superenrollamiento del plásmido

endotoxina

La endotoxina, un componente de la pared celular de las bacterias gramnegativas, se compone principalmente de lipopolisacárido A (LPS-A) como componente tóxico. Durante la extracción del plásmido, la endotoxina se libera en la solución de lisis, lo que afecta gravemente la eficiencia de la transfección del plásmido en las células. Además, puede activar respuestas inmunitarias no específicas en las células, lo que da lugar a falsos positivos en los experimentos.

Yaohai Bio-Pharma adopta un enfoque de "no introducción" y "alta eliminación", controlando estrictamente el uso de reactivos y materiales que contienen endotoxinas durante todo el proceso de purificación. La empresa también ha desarrollado un método eficiente de eliminación de endotoxinas, que ofrece tres niveles de contenido de endotoxinas: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg y ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma posee una línea de servicio de extracción de plásmidos de alto rendimiento, capaz de entregar 1 mg de plásmidos extraídos en tan solo una semana. De manera predeterminada, proporciona más de siete pruebas de control de calidad (QC) para garantizar la entrega de plásmidos de alta calidad y alto estándar desde múltiples perspectivas.

También estamos buscando activamente socios globales institucionales o individuales. Ofrecemos la compensación más competitiva de la industria. Si tiene alguna pregunta, no dude en contactarnos: Director de [email protected]