Plásmido: Una Pequeña Molécula de ADN Circular con Gran Potencial

Los plasmidos, pequeñas moléculas circulares de ADN, sirven como vectores esenciales para la recombinación de ADN en la investigación de biología molecular y terapia génica. El rendimiento y calidad de los plasmidos son cruciales, con la proporción de superenrollamiento y el contenido de endotoxinas siendo dos factores significativos que afectan la calidad del plasmido.

Subtipos de Plásmidos

Los plásmidos extraídos de Escherichia coli (E. coli) existen en varios subtipos: formas superenrolladas (SC), circulares abiertas (OC) y lineales (L) (Figura 1). Entre ellos, los plásmidos superenrollados muestran una excelente estabilidad, antigenicidad y alta eficiencia de transfección y expresión.

Figura 1. Diagrama Esquemático de Subtipos Comunes de Plásmidos

En la electroforesis de gel de agarosa del ADN de plásmido, el orden de velocidad de migración es ADN superenrollado, ADN lineal y ADN circular abierto (Figura 2).

Figura 2. Patrón de Migración de Electroforesis de Gel de Agarosa de Diferentes Subtipos de Plásmidos

Yaohai Bio-Pharma ha mejorado continuamente sus procesos y técnicas para asegurar que la proporción de superbobinados en los plásmidos de grado de transfección sea ≥85% y en los plásmidos de grado de investigación sea ≥50%. A continuación se presenta un caso demostrativo (Figura 3), donde se combina la electroforesis en gel de agarosa con el software Gel-Pro Analyzer para detectar la proporción de superbobinados.

Figura 3. Resultados de la Inspección de Calidad de la Proporción de Superbobinados de Plásmidos

Endotoxina

El endotoxina, un componente de la pared celular de las bacterias Gram-negativas, consiste principalmente en lipopolisacárido A (LPS-A) como su componente tóxico. Durante la extracción del plásmido, el endotoxina se libera en la solución de lisis, afectando gravemente la eficiencia de la transfección del plásmido en las células. Además, puede activar respuestas inmunitarias no específicas en las células, lo que lleva a falsos positivos en los experimentos.

Yaohai Bio-Pharma adopta un enfoque de "no introducción" y "alta eliminación", controlando estrictamente el uso de reactivos y materiales que contienen endotoxinas durante todo el proceso de purificación. La empresa también ha desarrollado un método eficiente para la eliminación de endotoxinas, ofreciendo tres niveles de contenido de endotoxinas: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg y ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma posee una línea de servicio de extracción de plásmidos de alta capacidad, capaz de entregar 1 mg de plásmidos extraídos en tan solo una semana. Por defecto, proporciona más de siete pruebas de control de calidad (QC) para garantizar la entrega de plásmidos de alta calidad y alto estándar desde múltiples perspectivas.

También estamos buscando activamente socios globales institucionales o individuales. Ofrecemos la compensación más competitiva de la industria. Si tiene alguna pregunta, no dude en contactarnos: [email protected]