Explotando los CBs Bacterianos para la Producción de Proteínas Recombinantes

Los cuerpos de inclusión bacterianos (IBs) en la producción de proteínas recombinantes ofrecen facilidad de separación, estabilidad, alta expresión y resistencia a la degradación, y pueden expresar proteínas tóxicas con actividad biológica. Los avances en la comprensión de los IB abren nuevas vías para el procesamiento, con desafíos y soluciones identificadas para futuras investigaciones.

Yaohai Bio-Pharma cuenta con más de 10 años de experiencia en la producción de proteínas recombinantes utilizando sistemas de fermentación microbiana. Nuestro fuerte y profesional equipo de expertos garantiza que la proteína refoldada purificada pueda alcanzar los 1.5 g/L.

Estrategias de Procesamiento y Desafíos de los IBs

Separación de IBs Los métodos para la separación de IB dependen de la estructura-función de la proteína y las necesidades de la aplicación. Los métodos físicos rompen las células, pero pueden dañar la calidad de la proteína. Los métodos enzimáticos mejoran la pureza, pero son costosos. Los detergentes suaves funcionan para IB clásicos, no para los no clásicos. El control de pH es crucial para la solubilidad. La deposición por electroforesis es simple, pero no escalable para proteínas biológicamente activas.

Solubilización de IB La solubilización de IB es crucial para recuperar proteínas activas. Los desnaturalizantes fuertes dañan la estructura nativa, mientras que los no desnaturalizantes no son adecuados para IB clásicos. Los solubilizadores suaves pueden disolver IB mientras protegen la estructura de la proteína, pero no para todas las proteínas. El trabajo futuro necesita mejores algoritmos para seleccionar solubilizadores.

Estrategias de Renaturación La renaturación de proteínas es vital para su funcionalidad. La renaturación in vitro enfrenta desafíos. La elección del solubilizante, la concentración de proteínas, las condiciones y los métodos afectan el resultado. Los solubilizantes suaves protegen la estructura nativa y mejoran la calidad. Las concentraciones moderadas y las condiciones optimizadas reducen la agregación. Los métodos basados en columnas con matrices monolíticas ofrecen mayor pureza y rendimiento.

Purificación de Proteínas Renaturadas Una purificación adicional separa las proteínas mal plegadas de las correctamente plegadas. La cromatografía tradicional lucha con proteínas similares. Los métodos alternativos ofrecen ventajas pero requieren una selección específica para la proteína objetivo. El desarrollo de un método de purificación universal sigue siendo un desafío.

Conclusión

Las IB ofrecen ventajas en la producción de proteínas recombinantes, pero plantean desafíos en el procesamiento. Con una comprensión más profunda de la estructura-función de las proteínas dentro de las IB y los avances en separación, solubilización, renaturación y purificación, pronto podría lograrse la recuperación de alta velocidad de proteínas activas. Esto reducirá costos y acelerará el desarrollo e investigación de biofármacos, impulsando el crecimiento de la industria.

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