Aprovechamiento de los IB bacterianos para la producción de proteínas recombinantes

Los cuerpos de inclusión bacterianos (IB) en la producción de proteínas recombinantes ofrecen facilidad de separación, estabilidad, alta expresión y resistencia a la degradación, y pueden expresar proteínas tóxicas con actividad biológica. Los avances en la comprensión de los IB abren nuevas vías para el procesamiento, con desafíos y soluciones identificados para futuras investigaciones.

Yaohai Bio-Pharma cuenta con más de 10 años de experiencia en la producción de proteínas recombinantes mediante sistemas de fermentación microbiana. Nuestro sólido y profesional equipo de expertos garantiza que la proteína replegada purificada pueda alcanzar 1.5 g/L.

Estrategias de procesamiento y desafíos de los IB

Separación de los IB Los métodos para la separación de IB dependen de la estructura y función de la proteína y de las necesidades de la aplicación. Los métodos físicos alteran las células pero pueden dañar la calidad de la proteína. Los métodos enzimáticos mejoran la pureza pero son costosos. Los detergentes suaves funcionan para los IB clásicos, no para los no clásicos. El control del pH es crucial para la solubilidad. La deposición por electroforesis es simple pero no escalable para proteínas biológicamente activas.

Solubilización de IB La solubilización de los IB es crucial para recuperar las proteínas activas. Los desnaturalizantes fuertes dañan la estructura nativa, mientras que los no desnaturalizantes no son adecuados para los IB clásicos. Los solubilizantes suaves pueden disolver los IB y al mismo tiempo proteger la estructura de la proteína, pero no todas las proteínas. En el futuro, se necesitarán mejores algoritmos para seleccionar solubilizantes.

Estrategias de renaturalización La renaturalización de proteínas es vital para la funcionalidad. La renaturalización in vitro enfrenta desafíos. La elección del solubilizador, la concentración de proteínas, las condiciones y los métodos afectan el resultado. Los solubilizadores suaves protegen la estructura nativa y mejoran la calidad. Las concentraciones moderadas y las condiciones optimizadas reducen la agregación. Los métodos basados ​​en columnas con matrices monolíticas ofrecen mayor pureza y rendimiento.

Purificación de proteínas renaturalizadas Una purificación adicional permite separar las proteínas mal plegadas de las plegadas correctamente. La cromatografía tradicional tiene dificultades con proteínas similares. Los métodos alternativos ofrecen ventajas, pero requieren una selección específica de la proteína objetivo. El desarrollo de un método de purificación universal sigue siendo un desafío.

Conclusión

Los IB ofrecen ventajas en la producción de proteínas recombinantes, pero plantean desafíos de procesamiento. Con una comprensión más profunda de la estructura y función de las proteínas dentro de los IB y avances en la separación, solubilización, renaturalización y purificación, pronto se podrá lograr una recuperación de alto rendimiento de proteínas activas. Esto reducirá los costos y acelerará la I+D biofarmacéutica, impulsando el crecimiento de la industria.

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