mRNA Plasmidové šablony: Klíčové prvky a strategie návrhu

Vytváření mRNA pro vakcíny nebo terapie začíná dobře navrženou plazmidovou šablonou. Tady je krátký průvodce klíčovými prvky a tím, jak jsou optimalizovány pro úspěch.

Promotor: Kde začíná transkripcese

T7 promotor je nejoblíbenější volbou pro zahájení syntézy mRNA. Jeho klasická sekvence „TAATACGACTCACTATAGGG“ zajišťuje efektivní transkripci. Během času vědci vyvinuli variace, jako jsou šablony GG, AG a AT/AU, které fungují s pokročilými systémy zakončování, jako je CleanCap nebo samozvyšující se RNA platformy.

Linearizace: Řezání plazmidu pro přesnost

Aby plazmid neprováděl nekonečnou transkripci, musí být截断 na konkrétním místě. Enzymy typu IIS, jako BspQⅠ nebo BsaⅠ, jsou dokonalé pro tento úkol. Ořízají DNA mimo svou rozpoznávací sekvenci, aniž by zanechaly další útržky, a zachovávají tak důležitý polyA ocas.

Modrý plán mRNA: Stavební kameny úspěchu

Posloupnost mRNA zahrnuje 5' kryt, nekódované oblasti (UTR), kódovací posloupnost (CDS) a polyA ocas. Následuje vysvětlení, jak je každá část navržena:

• UTR : Tyto lze převzít z vysoce expresovaných přirozených genů (například těch z virů) nebo vytvořit na míru pomocí pokročilých algoritmů pro lepší výkon.
• CDS : Vědci nejprve navrhnou posloupnost bílkoviny a poté optimalizují DNA kód pro efektivnější expresi.
• PolyA ocas : Posloupnost 100–120 adeninů, nebo segmentovaná verze jako 30A + Linkér + 70A, zajistí, aby mRNA zůstala stabilní a funkční.

Díky ovládnutí těchto prvků mohou výzkumníci vytvářet výkonné mRNA šablony pro všechno, od vakcín po inovativní léčby. Budoucnost medicíny začíná právě tady!

Yaohai Bio-Pharma je platformní podnik specializující se na služby pro mikrobiologické expresní systémy. Na základě desetiletého odborného zkušeností vyvinula Yaohai komplexní soubor technologií v souladu s GMP pro syntézu lineárního a kruhového mRNA, nabízí vysoko kvalitní RNA produkty, které zahrnují návrh a optimalizaci sekvence, syntézu genu, in vitro transkripci (IVT), circularizaci, čištění RNA a encapsulaci LNP.

Hledáme také aktivně globální partnery, jak institucionální, tak jednotlivce. Nabízíme nejvyšší odškodnění v odvětví. Pokud máte jakékoli otázky, neváhejte nás kontaktovat: [email protected]