Šablony plazmidu mRNA: Klíčové prvky a strategie návrhu

Vytváření mRNA pro vakcíny nebo terapie začíná dobře navrženým plazmidovým templátem. Zde je rychlý průvodce klíčovými prvky a tím, jak jsou optimalizovány pro úspěch.

Promotér: Kde začíná přepis

Promotor T7 je nejoblíbenější volbou pro zahájení syntézy mRNA. Jeho klasická sekvence „TAATACGACTCACTATAGGG“ zajišťuje účinnou transkripci. V průběhu času vědci vyvinuli varianty jako GG, AG a AT/AU šablony pro práci s pokročilými capping systémy, jako jsou CleanCap nebo samozesilující RNA platformy.

Linearizace: přesné řezání plazmidu

Aby se zabránilo nekonečnému přepisování plazmidu, je třeba jej rozřezat na konkrétním místě. Enzymy typu IIS, jako BspQⅠ nebo BsaⅠ, jsou pro tuto práci ideální. Odříznou DNA mimo svou rozpoznávací sekvenci, nezanechají za sebou žádné další bity a zachovají rozhodující polyA ocas.

Plán mRNA: Stavební kameny úspěchu

Sekvence mRNA zahrnuje 5' čepičku, netranslatované oblasti (UTR), kódující sekvenci (CDS) a polyA konec. Zde je návod, jak je každá část navržena:

• UTR: Ty lze vypůjčit z vysoce exprimovaných přirozených genů (jako jsou geny ve virech) nebo je lze navrhnout na zakázku pomocí pokročilých algoritmů pro lepší výkon.
• CDS: Vědci nejprve navrhnou proteinovou sekvenci a poté optimalizují kód DNA pro účinnou expresi.
• PolyA ocas: Úsek 100–120 adeninů nebo segmentovaná verze jako 30A + Linker + 70A zajišťuje, že mRNA zůstane stabilní a funkční.

Zvládnutím těchto prvků mohou výzkumníci vytvořit výkonné šablony mRNA pro vše od vakcín po špičkové terapie. Budoucnost medicíny začíná zde!

Yaohai Bio-Pharma je platforma specializující se na služby pro mikrobiální expresní systémy. Yaohai, čerpající z desetiletých zkušeností, vyvinula komplexní sadu technologií vyhovujících GMP pro syntézu lineární a cirkulární mRNA, která nabízí vysoce kvalitní produkty RNA, které zahrnují sekvenční návrh a optimalizaci, genovou syntézu, in vitro transkripci (IVT), cirkularizaci, purifikaci RNA a zapouzdření LNP.

Aktivně také hledáme institucionální nebo individuální globální partnery. Nabízíme nejkonkurenceschopnější kompenzaci v oboru. Máte-li jakékoli dotazy, neváhejte nás kontaktovat: [email protected]