Evoluce genové terapie: Nová DNA a optimalizace Česká republika

V oblasti DNA aplikací byla plazmidová DNA (pDNA) vždy velmi oblíbená díky své výjimečné stabilitě, snadné produkci, skladování a přepravě. Jak však vědecký výzkum pokračuje, postupně se objevila řada nových typů DNA, jako je Minicircle DNA (mcDNA), Doggybone DNA (dbDNA) a Close-Ended DNA (ceDNA), které otevírají nové cesty pro genovou terapii. a další špičkové obory.

mcDNA

mcDNA je odvozena z procesu rekombinace rodičovských plazmidů, s odstraněnými bakteriálními elementy při zachování kruhové struktury. Proces jeho přípravy spoléhá na specifické enzymatické aktivity, jako je φC31 integráza, dosahující vyšší účinnosti rekombinace. Pozoruhodnou vlastností mcDNA je nedostatek bakteriálních sekvencí, což jí umožňuje spoléhat se na malé nosiče DNA, čímž se zlepšuje genová exprese.

dbDNA

dbDNA má uzavřenou dvouvláknovou konformaci s malými jednovláknovými smyčkami na obou koncích a je zcela bez bakteriálních sekvencí a genů rezistence na antibiotika. Jeho menší velikost usnadňuje dodání do buněk a jader a zároveň vykazuje úplnou nukleázovou rezistenci. Počáteční forma dbDNA obsahuje pouze prvky nezbytné pro genovou expresi, vynechává nepotřebné sekvence, a tak má silné schopnosti genové transfekce a vyšší hladiny proteinové exprese.

ceDNA

ceDNA je inženýrsky vytvořený dvouvláknový, lineární, kovalentně uzavřený DNA konstrukt obsahující cílový gen a další regulační elementy exprese. Jeho konce jsou invertované terminální repetice (ITR), poskytující konstruktovou kapacitu tisíců bází, daleko přesahující limity tradičních vektorů adeno-asociovaných virů (AAV). Struktura ITR ceDNA je klíčová pro vstup do jádra a její expresní vzor je konzistentní s neintegrovanými epizomy. Kromě toho je proces přípravy ceDNA rychlý a nákladově efektivní, díky čemuž je vhodný pro výzkum genové terapie v oblastech, jako jsou vzácná onemocnění, vakcíny a onkologie.

Optimalizace DNA

Pokud jde o optimalizaci DNA, výzkumníci zlepšují expresi transgenních genů optimalizací vnitřních složek plazmidové DNA. Současně jsou nahrazeny selekční markery, jako je substituce ampicilinu kanamycinem, aby se snížila autoimunitní rizika. Kromě toho se sacharózový selekční systém také používá k nahrazení tradičních selekčních markerů. Pokud jde o optimalizaci kodonů, výzkumníci zlepšují hladiny exprese proteinů změnou využití kodonů, přičemž plně berou v úvahu preferenci hostitele pro expresi genové sekvence. Během procesu optimalizace musí výzkumníci také věnovat pozornost zkreslení kodonů, stabilitě sekundární struktury mRNA, vyhýbání se trans-působícím prvkům a místům restrikčních enzymů a vyváženosti obsahu GC.

Stručně řečeno, vývoj nových typů DNA a optimalizace DNA poskytly nové příležitosti a výzvy pro obory, jako je genová terapie. Yaohai Bio-Pharma zavedla GMP produkční platformy pro cirkulární i linearizované plazmidy. Yaohai také může poskytnout vývoj procesů a optimalizaci různých typů DNA, včetně těchto nových typů DNA, splňující různé potřeby klientů.

Yaohai Bio-Pharma také aktivně hledá institucionální nebo individuální globální partnery a nabízí nejkonkurenceschopnější kompenzaci v oboru. Máte-li jakékoli dotazy, neváhejte nás kontaktovat: [email protected]