Выраб лякаў на базе рекамбінантных белкоў: інжынерыя штамаў E. coli

Escherichia coli (E. coli) прадстаўляе значную ролю ў вырабе рэкомбінантных белкаў у біяфармацэўскай пралесі, быцьчы першым вектарам экспresasii для выработкі біялічных лекальств. E. coli мае хуткі рост, зручнасць генэтых маніпуляцый і швидкае сінтэз рэкомбінантных белкаў, серед іншых пераваг. Шырокія модыфікацыі зробілі E. coli аптымальным выбарам для экспresasii белкаў, што прывяло да дызайнавання розных інжынерных штрых E. coli.

Yaohai Bio-Pharma спецыялізуецца на адпрокольных сервісах пад ключ для ферментавання, чыстэння, разрабоўкі формулявання і вытвору серыі біяфармацеўтых вырабоў з выкарыстаннем сістэм экспresasii E. coli. Удзелеміраючы шырокі досвед Yaohai, мы падсумавалі, што чатыры часта выкарыстоўваюцца штрыхі E. coli для вытвору рэкомбінантных белкаў і іх уласцівасці.

BL 21 штрых

Пачатковая ад E. coli B лініі, штам BL21 не мае протэазы Lon і наружняй мембраны протэазы OmpT. Протэаза Lon галоўным чынам разламлівае зонкавыя белкі, пакуль OmpT галоўным чынам разламлівае белкі матрыцы. Адсутнасць гэтых двух ключавых протэаз можа эфектна спаборонаць разлам рекамбінатных белкаў.

Штам Origami

Штам Origami, паходзенне ад E. coli K-12, мае_mutacyi ў тhioredoxyn reductase і glutathione reductase, якія дапамагаюць фарміраванню правільна складзеных белкаў, якія ўключаюць двусур'одныя сувязі і падвышуюць рашальнасць белкаў. Штамы Origami, уключынныя Origami, Origami 2 і Origami B, падыходзяць для экспрэсіі актыўных белкаў, якія ўключаюць двусур'одныя сувязі.

Штам SHuffle

Штам а SHuffle канстытуцыйна вырашвае изамеразу дысульфідных сувязаў DsbC у цытаплазме, што спрыяе фарміраванню правільных дысульфідных сувязаў ў аксідованых белках. Ян таксама выступае як молекулярны чаперон для складання белка, дапамагаючы ў фарміраванні правільнай канфігурацыі.

Штам Rosetta

Штам Rosetta допаўняе E. coli tRNA, які адпавядае рэдкім кодонам, метуючыся на падзешчэнне ўзроўня экспрэсіі залежных генаў, уключна еўкарыятных генаў, у прокарыйтных сістэмах. Пачынаецца ад BL21 і несе хлорамфенікавы стойкі плазмід pRARE, які допаўняе шэсць tRNA, якія адпавядаюць рэдкім кодонам (AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, і GGA), якія першапачаткова адсутнічаюць у E. coli, забезпечваючы больш "універсальную" экспрэсію белка.

Заключэнне

Тры галоўныя чыннікі для паспяховага вытвору рекамбінацыйных белкаў — гэта хост, вектар і умовы культивавання. У залежнасці ад знання фізікальна-хімічных ўласцівасцей рекамбінацыйнага белка, унікальных пераваг кожнага штама і спецыфічных патрабаванняў эксперыменту, трэба выбраць найболее падходзячы хост. Падобна, чыннікі, такія як плазмідныя вектары, температура і індуктары, павінны быць аптымізаваныя для павелічэння экспрэсіі белка.

Yaohai Bio-Pharma таксама акtyўна шукае глобальныя партнёраў — інстытуцыі або адзінак — і прапануе найвышчыя ва ўсьцім промысловым секторы выкуп. Калі у вас ёсць якія-небудзь пытанні, калі ласка, не лячас ці свяжыцеся з намі: [email protected]