Plasmid: Một phân tử DNA tròn nhỏ có tiềm năng lớn

Plasmid, phân tử DNA dạng vòng nhỏ, đóng vai trò là vector thiết yếu cho sự tái tổ hợp DNA trong nghiên cứu sinh học phân tử và liệu pháp gen. Năng suất và chất lượng plasmid rất quan trọng, trong đó tỷ lệ siêu xoắn và hàm lượng nội độc tố là hai yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến chất lượng plasmid.

Các loại Plasmid

Plasmid chiết xuất từ ​​Escherichia coli (E. coli) tồn tại ở nhiều phân nhóm khác nhau: dạng siêu xoắn (SC), dạng vòng hở (OC) và dạng tuyến tính (L) (Hình 1). Trong số đó, plasmid siêu xoắn thể hiện tính ổn định, tính kháng nguyên và hiệu quả chuyển gen và biểu hiện cao.

Hình 1. Sơ đồ các loại Plasmid phổ biến

Trong điện di gel agarose của DNA plasmid, thứ tự tốc độ di chuyển là DNA siêu xoắn, DNA thẳng và DNA vòng mở (Hình 2).

Hình 2. Mẫu di chuyển điện di gel agarose của các phân nhóm plasmid khác nhau

Yaohai Bio-Pharma đã liên tục cải tiến các quy trình và kỹ thuật của mình để đảm bảo rằng tỷ lệ siêu xoắn của plasmid cấp độ chuyển gen là ≥85% và tỷ lệ plasmid cấp độ nghiên cứu là ≥50%. Sau đây là một ví dụ minh họa (Hình 3), trong đó điện di gel agarose được kết hợp với phần mềm Gel-Pro Analyzer để phát hiện tỷ lệ siêu xoắn.

Hình 3. Kết quả kiểm tra chất lượng tỷ lệ siêu xoắn Plasmid

Nội độc tố

Nội độc tố, một thành phần của thành tế bào vi khuẩn Gram âm, chủ yếu bao gồm lipopolysaccharide A (LPS-A) là thành phần độc hại của nó. Trong quá trình chiết xuất plasmid, nội độc tố được giải phóng vào dung dịch ly giải, ảnh hưởng nghiêm trọng đến hiệu quả chuyển plasmid vào tế bào. Ngoài ra, nó có thể kích hoạt phản ứng miễn dịch không đặc hiệu trong tế bào, dẫn đến kết quả dương tính giả trong các thí nghiệm.

Yaohai Bio-Pharma áp dụng phương pháp "không đưa vào" và "loại bỏ cao", kiểm soát chặt chẽ việc sử dụng thuốc thử và vật liệu chứa nội độc tố trong suốt quá trình tinh chế. Công ty cũng đã phát triển phương pháp loại bỏ nội độc tố hiệu quả, cung cấp ba mức hàm lượng nội độc tố: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg và ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma sở hữu một dây chuyền dịch vụ chiết xuất plasmid thông lượng cao, có khả năng cung cấp 1 mg plasmid chiết xuất trong vòng một tuần. Theo mặc định, nó cung cấp hơn bảy xét nghiệm kiểm soát chất lượng (QC) để đảm bảo cung cấp plasmid chất lượng cao, tiêu chuẩn cao từ nhiều góc độ.

Chúng tôi cũng đang tích cực tìm kiếm các đối tác toàn cầu là tổ chức hoặc cá nhân. Chúng tôi cung cấp mức bồi thường cạnh tranh nhất trong ngành. Nếu bạn có bất kỳ câu hỏi nào, xin vui lòng liên hệ với chúng tôi: [email protected]