Plasmid: Một Phân Tử DNA Tròn Nhỏ Nhưng Có Tiềm Năng Lớn

Plasmids, các phân tử DNA tròn nhỏ, đóng vai trò là vector thiết yếu cho quá trình tái tổ hợp DNA trong nghiên cứu sinh học phân tử và liệu pháp gen. Sản lượng và chất lượng của plasmid rất quan trọng, với tỷ lệ supercoiled và hàm lượng endotoxin là hai yếu tố đáng kể ảnh hưởng đến chất lượng plasmid.

Các subtype Plasmid

Plasmid được chiết xuất từ Escherichia coli (E. coli) tồn tại ở nhiều subtype khác nhau: dạng supercoiled (SC), dạng vòng mở (OC) và dạng tuyến tính (L) (Hình 1). Trong số đó, plasmid supercoiled thể hiện sự ổn định tuyệt vời, tính kháng nguyên và hiệu suất chuyển nhiễm cũng như biểu hiện cao.

Hình 1. Sơ đồ minh họa các subtype Plasmid phổ biến

Trong điện泳 trên gel agarose của DNA plasmid, thứ tự tốc độ di chuyển là DNA supercoiled, DNA tuyến tính và DNA vòng mở (Hình 2).

Hình 2. Mẫu hình di chuyển điện泳 trên gel agarose của các subtype Plasmid khác nhau

Yaohai Bio-Pharma đã không ngừng cải tiến quy trình và kỹ thuật để đảm bảo rằng tỷ lệ siêu cuộn của plasmid cấp độ chuyển nhiễm là ≥85% và của plasmid cấp độ nghiên cứu là ≥50%. Dưới đây là một ví dụ minh họa (Hình 3), trong đó điện泳 trên gel agarose được kết hợp với phần mềm Gel-Pro Analyzer để phát hiện tỷ lệ siêu cuộn.

Hình 3. Kết quả kiểm tra chất lượng tỷ lệ siêu cuộn của plasmid

Endotoxin

Endotoxin, một thành phần của tường tế bào vi khuẩn Gram âm, chủ yếu bao gồm lipopolysaccharide A (LPS-A) như thành phần độc hại. Trong quá trình chiết xuất plasmid, endotoxin được giải phóng vào dung dịch phân hủy, ảnh hưởng nghiêm trọng đến hiệu suất chuyển plasmid vào tế bào. Ngoài ra, nó có thể kích hoạt phản ứng miễn dịch không đặc hiệu trong tế bào, dẫn đến kết quả dương tính giả trong thí nghiệm.

Yaohai Bio-Pharma áp dụng phương pháp "không đưa vào" và "loại bỏ cao", kiểm soát nghiêm ngặt việc sử dụng các chất làm đặc và vật liệu chứa endotoxin trong suốt quá trình tinh chế. Công ty cũng đã phát triển một phương pháp loại bỏ endotoxin hiệu quả, cung cấp ba mức độ endotoxin: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg, và ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma sở hữu một dây chuyền dịch vụ trích xuất plasmid công suất cao, có khả năng cung cấp 1 mg plasmid đã trích xuất chỉ trong vòng một tuần. Theo mặc định, nó cung cấp hơn bảy bài kiểm tra chất lượng (QC) để đảm bảo việc giao plasmid chất lượng cao, tiêu chuẩn cao từ nhiều góc độ khác nhau.

Chúng tôi cũng đang tích cực tìm kiếm đối tác toàn cầu là tổ chức hoặc cá nhân. Chúng tôi cung cấp mức bồi thường cạnh tranh nhất trong ngành. Nếu bạn có bất kỳ câu hỏi nào, xin vui lòng liên hệ với chúng tôi: [email protected]