Hôm nay, Yaohai rất vui mừng được chia sẻ giao thức phiên mã in vitro cho RNA dài. Đây là một chiến lược hiệu quả mà các nhà khoa học thường sử dụng để sản xuất RNA trong phòng thí nghiệm. Theo cách này, các nhà nghiên cứu có thể sản xuất một số lượng lớn RNA dài — một điều cần thiết cho nghiên cứu trong các lĩnh vực sinh học khác nhau. Ở đây, chúng tôi cung cấp hướng dẫn từng bước để chuẩn bị RNA dài thông qua phiên mã in vitro. Chúng tôi cũng sẽ nói về cách chúng tôi có thể cải thiện quy trình này và cố gắng giải quyết một số vấn đề mà bạn gặp phải khi tổng hợp RNA dài.
Một số thành phần thiết yếu cần thiết cho quá trình phiên mã trong ống nghiệm, đặc biệt là RNA dài. Bạn sẽ phải cung cấp một loại enzyme gọi là RNA polymerase, vật liệu viết dưới dạng nucleotide triphosphate (NTP), một chất đệm để hỗ trợ phản ứng và một số khuôn mẫu DNA. Cách thực hiện từng bước, bạn có thể tìm thấy hướng dẫn chi tiết tại đây:
Một số yếu tố rất quan trọng đối với hoạt động tốt của quá trình tổng hợp RNA. Đáng chú ý nhất là lượng ion magiê trong chính chất đệm rất quan trọng. RNA polymerase cần một lượng lớn magiê để hỗ trợ tương tác thích hợp với khuôn mẫu DNA và quá trình gấp RNA sau đó. Một khía cạnh quan trọng thứ hai cần xem xét là nồng độ khuôn mẫu DNA. Cụ thể, bạn phải có đủ phản ứng DNA khuôn mẫu để có được sản lượng RNA tốt.
Tất nhiên, RNA dài sẽ đi kèm với một loạt các vấn đề riêng của nó. Những vấn đề này có thể liên quan đến sự phân hủy của RNA, ảnh hưởng đến cách RNA gấp lại và xây dựng các cấu trúc có khả năng can thiệp vào quá trình tổng hợp RNA. Một cách để giải quyết những thách thức này là điều chỉnh bộ đệm bạn sử dụng. Để có cấu trúc toàn diện hơn của RNA, các nhà nghiên cứu có thể thêm các hóa chất đặc biệt khác nhau như DTT và p-mercaptoethanol để giúp RNA gấp lại đúng cách và ngăn không cho nó dính vào nhau hoặc vón cục.
Ngoài ra, không phải tất cả các loại RNA dài đều giống nhau và một số có thể yêu cầu các phương pháp tổng hợp thay thế. Có những đặc điểm đặc biệt mà các nhà nghiên cứu có thể cần thêm vào RNA, chẳng hạn như thêm mũ 5 hoặc đuôi Poly-A. Nếu cần (như đã giải thích sau) thì các nhà nghiên cứu nên bao gồm các enzyme khác như Guanylyltransferase và Poly(A)Polymerase. Người ta cũng phải chọn một enzyme RNA polymerase thích hợp cho phép họ sản xuất nhiều RNA hơn một cách tự nhiên. Ngay khi RNA dài cần được tổng hợp, chúng ta sẽ cần xác định điều kiện tốt nhất.
Bản sao RNA dài trong ống nghiệmCó một số ứng dụng chính cho giao thức bản sao RNA dài trong ống nghiệm trong nhiều nỗ lực nghiên cứu, thử nghiệm và điều trị. Nó giúp các nhà khoa học hiểu được cấu trúc của RNA, cách thức hoạt động của nó và cách họ có thể sửa đổi gen bằng các công nghệ hiện đại. Ngày khác - việc phát hiện ra nhiều bệnh khác nhau và phương pháp điều trị của chúng như liệu pháp RNA rất hiện đại - hãy cho chúng ta biết công nghệ đọc này có thể hữu ích như thế nào đối với y học.
Có rất nhiều lợi thế khi sử dụng giao thức này. Phương pháp dựa trên điện di thường là cách hiệu quả và tiết kiệm chi phí nhất để sản xuất số lượng lớn RNA dài. Bên cạnh chất lượng RNA, sản lượng tốt cũng là yếu tố quan trọng đối với các nhà nghiên cứu để hỗ trợ họ trong quá trình nghiên cứu, đặc biệt là nếu họ cần một lượng lớn RNA cho các thí nghiệm do vật liệu đầu vào cao ngay từ đầu. Ngoài ra, phiên mã trong ống nghiệm đối với RNA dài thường chính xác và có thể tái tạo hơn so với tổng hợp hóa học hoặc tổng hợp RNA tế bào.
Yaohai BioPharma là một CDMO vi sinh hàng đầu 10 kết hợp Giao thức phiên mã trong ống nghiệm cho RNA dài cũng như các vấn đề pháp lý. Chúng tôi có hệ thống quản lý chất lượng phù hợp với các tiêu chuẩn GMP hiện hành cũng như các quy định toàn cầu. Đội ngũ chuyên gia pháp lý của chúng tôi thành thạo các khuôn khổ pháp lý toàn cầu để đẩy nhanh việc ra mắt sản phẩm sinh học. Chúng tôi đảm bảo các quy trình sản xuất có thể truy xuất nguồn gốc các sản phẩm chất lượng, cũng như tuân thủ các quy định của FDA Hoa Kỳ và EMA EU. TGA Úc và NMPA Trung Quốc cũng hài lòng. Yaohai BioPharma đã vượt qua thành công cuộc kiểm toán tại chỗ của Người đủ điều kiện (QP) của Liên minh Châu Âu đối với hệ thống chất lượng GMP cũng như cơ sở sản xuất của chúng tôi. Hơn nữa, chúng tôi đã vượt qua các cuộc kiểm toán chứng nhận đầu tiên của Hệ thống quản lý chất lượng ISO9001, Hệ thống quản lý môi trường ISO14001 và Hệ thống quản lý an toàn và sức khỏe nghề nghiệp ISO45001.
Yaohai Bio-Pharma, một trong 10 nhà sản xuất sản phẩm sinh học hàng đầu, là một chuyên gia về lên men vi sinh. Chúng tôi đã thành lập một cơ sở tiên tiến được trang bị các cơ sở hiện đại và năng lực sản xuất RD mạnh mẽ. Chúng tôi có năm dây chuyền sản xuất dược chất tuân thủ các yêu cầu của GMP về lên men và tinh chế vi sinh, cũng như hai dây chuyền chiết rót tự động cho hộp mực, lọ và ống tiêm đã chiết sẵn. Các thang lên men có sẵn thay đổi từ 100L đến 500L, 1000L và 2000L. Giao thức phiên mã trong ống nghiệm cho RNA dài cho vias là 1ml đến 25ml, trong khi thông số kỹ thuật của ống tiêm đã chiết sẵn và ống tiêm đã chiết sẵn bao gồm 1-3ml. Xưởng sản xuất của chúng tôi tuân thủ cGMP và đảm bảo cung cấp ổn định các mẫu lâm sàng cũng như các mặt hàng thương mại. Nhà máy của chúng tôi sản xuất các phân tử lớn được vận chuyển đến toàn cầu.
Yaohai Bio-Pharma có kinh nghiệm trong sản xuất các sản phẩm sinh học được tạo ra từ vi sinh vật. Chúng tôi cung cấp các giải pháp RD theo yêu cầu cũng như các dịch vụ sản xuất trong khi giảm thiểu các rủi ro tiềm ẩn. Chúng tôi đã làm việc với nhiều kỹ thuật khác nhau, chẳng hạn như các tiểu đơn vị tế bào tái tổ hợp, vắc-xin (bao gồm cả peptide), các yếu tố tăng trưởng, hormone và Giao thức phiên mã trong ống nghiệm cho RNA dài. Chúng tôi là chuyên gia trong nhiều loại vi sinh vật như tiết dịch ngoại bào và nội bào của nấm men (năng suất lên đến 15g/L) và vi khuẩn hòa tan nội bào, và thể vùi (năng suất lên đến 10g/L). Chúng tôi cũng đã phát triển một nền tảng lên men BSL-2 để tạo ra vắc-xin vi khuẩn. Chúng tôi có thành tích trong việc cải thiện quy trình sản xuất, do đó tăng năng suất và giảm chi phí. Chúng tôi có một đội ngũ công nghệ hiệu quả cao để đảm bảo giao hàng dự án đúng hạn và chất lượng cao. Điều này giúp chúng tôi đưa các sản phẩm độc đáo của bạn ra thị trường nhanh hơn.
Yaohai Bio-Pharma là công ty hàng đầu trong Giao thức phiên mã in vitro cho CDMO RNA dài. Trọng tâm chính của chúng tôi là sản xuất vắc-xin vi khuẩn và liệu pháp điều trị cho vật nuôi, sức khỏe con người và thú y. Chúng tôi sở hữu nền tảng công nghệ sản xuất và RD tiên tiến bao gồm toàn bộ quy trình sản xuất từ kỹ thuật chủng vi khuẩn, đến xử lý ngân hàng tế bào và thiết kế phương pháp đến sản xuất lâm sàng và thương mại, đảm bảo rằng chúng tôi có thể đảm bảo cung cấp thành công các giải pháp tiên tiến nhất. Chúng tôi đã tích lũy được lượng kiến thức khổng lồ trong lĩnh vực vi khuẩn xử lý sinh học. Hơn 200 dự án đã được hoàn thành thành công và chúng tôi giúp khách hàng tuân thủ các quy định như FDA Hoa Kỳ cũng như EMA EU. Chúng tôi cũng giúp họ điều hướng TGA Úc và NMPA Trung Quốc. Chúng tôi có thể phản ứng nhanh chóng với các yêu cầu của thị trường và cung cấp các dịch vụ CDMO tùy chỉnh nhờ kinh nghiệm và chuyên môn của mình.