Плазміда: невелика кільцева молекула ДНК з великим потенціалом

Плазміди, малі кільцеві молекули ДНК, служать важливими векторами для рекомбінації ДНК у дослідженнях молекулярної біології та генної терапії. Вихід і якість плазмід є вирішальними, причому суперскручена пропорція та вміст ендотоксину є двома важливими факторами, що впливають на якість плазмід.

Підтипи плазмід

Плазміди, виділені з Escherichia coli (E. coli), існують у різних підтипах: суперспіральні (SC), відкриті кільцеві (OC) і лінійні (L) форми (рис. 1). Серед них суперскручені плазміди виявляють чудову стабільність, антигенність і високу ефективність трансфекції та експресії.

Малюнок 1. Схематична діаграма поширених підтипів плазмід

При електрофорезі плазмідної ДНК у агарозному гелі порядок швидкості міграції: суперспіральна ДНК, лінійна ДНК та відкрита кільцева ДНК (рис. 2).

Рисунок 2. Схема міграції різних підтипів плазмід за допомогою електрофорезу в агарозному гелі

Компанія Yaohai Bio-Pharma постійно вдосконалює свої процеси та методи, щоб гарантувати, що частка суперскручених плазмід трансфекційного класу становить ≥85%, а плазмід дослідницького класу – ≥50%. Нижче наведено демонстраційний випадок (рис. 3), де електрофорез у агарозному гелі поєднується з програмним забезпеченням Gel-Pro Analyzer для виявлення суперспіральної частки.

Малюнок 3. Результати перевірки якості плазмідної суперскрученої пропорції

Ендотоксин

Ендотоксин, компонент клітинної стінки грамнегативних бактерій, в основному складається з ліпополісахариду A (LPS-A) як його токсичного компонента. Під час екстракції плазміди ендотоксин виділяється в розчин для лізису, що серйозно впливає на ефективність трансфекції плазміди в клітини. Крім того, він може активувати неспецифічні імунні реакції в клітинах, що призводить до помилкових позитивних результатів в експериментах.

Yaohai Bio-Pharma використовує підхід «без введення» та «високого видалення», суворо контролюючи використання реагентів і матеріалів, що містять ендотоксин, протягом усього процесу очищення. Компанія також розробила ефективний метод видалення ендотоксинів, пропонуючи три рівні вмісту ендотоксину: ≤0.1 EU/мкг, ≤0.01 EU/мкг і ≤0.005 EU/мкг.

Yaohai Bio-Pharma володіє високопродуктивною лінією екстракції плазмід, здатною доставити 1 мг екстрагованих плазмід всього за тиждень. За замовчуванням він забезпечує більше семи тестів контролю якості (QC), щоб забезпечити доставку високоякісних плазмід високого стандарту з різних точок зору.

Ми також активно шукаємо інституційних або індивідуальних глобальних партнерів. Ми пропонуємо найконкурентнішу компенсацію в галузі. Якщо у вас виникли запитання, зв’яжіться з нами: [email protected]