Плазмід: Малий циркулярний молекула ДНК з величезним потенціалом

Плазміди, маленькі циркулярні молекули ДНК, виступають як ключові вектори для рекомбінації ДНК у дослідженнях молекулярної біології та генотерапії. Видільна здатність і якість плазмід є критичними, причому пропорція суперзакрученості та вміст ендотоксинів є двома значущими факторами, що впливають на якість плазмід.

Підтипи плазмід

Плазміди, витягнуті з Escherichia coli (E. coli), існують у різних підтипах: суперзакручені (SC), відкриті циркулярні (OC) та лінійні (L) форми (Рисунок 1). Серед них суперзакручені плазміди відзначаються відмінною стійкістю, антегенічністю та високою ефективністю трансфекції та експресії.

Рисунок 1. Схематичний малюнок загальноприйнятих підтипів плазмід

У електрофорезі плазмідної ДНК у агарозному гелі швидкість міграції упорядкована за спаданням: суперзакрученна ДНК, лінійна ДНК та відкрита циркулярна ДНК (Рисунок 2).

Рисунок 2. Паттерн міграції електрофорезу у агарозному гелі для різних підтипів плазмід

Yaohai Bio-Pharma непреривно вдосконалює свої процеси та технології, щоб забезпечити, що частка суперсплутаних плазмідів для трансфекції буде ≥85%, а для науково-дослідних плазмідів - ≥50%. Наведено демонстрацію випадку (Рисунок 3), де електрофорез у агарозному гелі kombinovanij з програмним забезпеченням Gel-Pro Analyzer для виявлення частки суперсплутаних молекул.

Рисунок 3. Результати перевірки якості частки суперсплутаних плазмідів

Ендотоксин

Ендотоксин, компонент стінки грамвід'ємних бактерій, головним чином складається з ліполігосахариду A (LPS-A) як своєї токсичної частини. Під час екстракції плазмідів ендотоксин викидається у розчин лізису, що суттєво впливає на ефективність трансфекції плазмідів до клітин. Крім того, він може активацію неспецифічних імунних відповідей у клітинах, що призводить до хибнопозитивних результатів у дослідженнях.

Yaohai Bio-Pharma використовує підхід "ненадходження" та "високе видалення", строго контролюючи використання реактивів і матеріалів, що містять ендотоксин, на всьому протязі процесу очищення. Компанія також розробила ефективний метод видалення ендотоксину, пропонуючи три рівні вмісту ендотоксину: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg та ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma має високопродуктивну лінію витягування плазмід, яка здатна доставляти 1 мг витягнутих плазмід за тиждень. За замовчуванням вона проводить більше сiedм тестів контрольної якості (QC), щоб забезпечити поставку плазмід високої якості та стандарту з різних перспектив.

Ми також активно шукаємо глобальних партнерів серед установ або окремих осіб. Ми пропонуємо найбільш конкурентоспроможну компенсацію в галузі. Якщо в вас є будь-які питання, будь ласка, не соромтеся звертатися до нас: [email protected]