Міні-коло ДНК: відкриття майбутнього генної терапії

Генна терапія, як передовий терапевтичний підхід, дає нову надію для багатьох невиліковних захворювань. Серед них мінікільцева ДНК (мкДНК), яка є носієм невірусної ДНК, поступово демонструє свою неповторну чарівність.

Введення mcDNA

мкДНК походить від плазмідної ДНК (пДНК) шляхом видалення прокаріотичних послідовностей і збереження лише еукаріотичних послідовностей, утворюючи менший і безпечніший вектор для доставки генів. Порівняно з pDNA, mcDNA значно знижує імуногенність, запобігає ризику передачі гена резистентності до антибіотиків і досягає більш ефективної експресії генів у клітинах, підвищуючи ефективність лікування.

Компанія Yaohai Bio-Pharma створила виробничі платформи, сумісні з вимогами GMP, як для круглих, так і для лінійних плазмід, підкріплені розробкою зрілих процесів і досвідом виробництва GMP. Yaohai може задовольнити різні потреби клієнтів, починаючи від доклінічних досліджень, подання IND і клінічних випробувань, до комерційного виробництва та ефективно просувати прогрес проектів.

Процес виробництва мкДНК

Виробництво мкДНК включає такі етапи, як ампліфікація батьківської плазміди (PP), індукція рекомбінації та видалення домішок. В даний час для виробництва макДНК використовуються різні рекомбіназні системи, включаючи Phage λ-інтегразу, Phage P1 Cre рекомбіназу, ParA-резольвазу та PhiC31-integrase/I-SceI homing endonuclease system. Однак кожна система стикається з проблемами щодо виходу, чистоти та вартості. Щоб збільшити врожайність, дослідники вивчають такі стратегії, як модифікація генних штамів і оптимізація умов бродіння.

Очищення мкДНК

Методи очищення мкДНК еволюціонували від модифікації скелета до нових методів хроматографії. Незважаючи на різні стратегії очищення, залишаються такі проблеми, як низький рівень відновлення та висока вартість. Останні дослідження досягли ефективного очищення mcDNA за допомогою таких методів, як монолітні колонки, модифіковані кадаверином, але подальше зниження вартості та підвищення рівня відновлення все ще необхідні.

Кількісний аналіз мкДНК

В даний час кількісний аналіз мкДНК в основному покладається на такі методи, як КПЦР і електрофорез, які мають проблеми з високою вартістю та обмеженою точністю. Останні дослідження використали технологію хроматографії для швидкого та точного кількісного аналізу мкДНК, забезпечуючи новий засіб контролю якості мкДНК.

Перспективи застосування та проблеми mcDNA

mcDNA має широкі перспективи застосування в генній терапії, ДНК-вакцинах і клітинній терапії. Однак такі проблеми, як низький вихід, висока вартість, складний контроль якості та обмежена ефективність доставки in vivo все ще потребують вирішення. У майбутньому дослідники зосередяться на збільшенні виходу мкДНК, зниженні витрат, оптимізації методів контролю якості та розробці більш ефективних систем доставки для сприяння розвитку мкДНК у клінічних застосуваннях.

Висновок

Як новий невірусний носій ДНК, mcDNA має великий потенціал у генній терапії та суміжних областях. Незважаючи на численні проблеми, з розвитком досліджень і технологій очікується, що mcDNA стане найпопулярнішим носієм невірусної ДНК у майбутньому, принісши прорив у галузі медицини.

Yaohai Bio-Pharma також активно шукає інституційних або індивідуальних глобальних партнерів і пропонує найконкурентнішу компенсацію в галузі. Якщо у вас виникли запитання, зв’яжіться з нами: [email protected]